两种细胞株检测重组犬α-干扰素效价的比较

本研究采用人羊膜细胞WISH株和人喉癌上皮细胞Hep-2株,以微量细胞病变抑制法(CPE抑制法)对同批次的8组重组犬α干扰素样品进行了效价检测,以中国药品生物制品检定所使用的标化重组人α干扰素为标准,将在两株细胞上所测结果进行比较.其检测的结果具有很好的相关性(r=0.9976.P>0.05),并且重复性较好.用结晶紫染色法评价干扰素效价能够准确地反应细胞的状态,所得结果准确、客观.表明Hep-2与WISH细胞测定结果没有差异,该方法可用于重组犬干扰素制品的效价测定.此外本研究还测定了最适试验条件如细胞浓度、接种用病毒滴度、加样方法等.     

重组猪干扰素α1冻干粉针剂对猪的安全性试验研究简

试验旨在观察自行研制的重组猪干扰素α1冻干粉针剂对猪的安全性。将20头健康仔猪随机分为4组（3组试验组和1组对照组）,每组5只,3组试验组分别肌肉注射低、中和高剂量重组猪干扰素α1冻干粉针剂,连续注射7 d,对照组同时肌肉注射生理盐水。对动物基本生命体征、血常规、血液生化指标、组织标本病理学指标进行观察。各试验组仔猪的外表及行为特征均正常;体温、体重的变化也在正常范围之内;重要脏器如脑、肺脏、肝脏、心脏和脾脏病理解剖HE染色结果显示无器质性病变发生;血常规、血液生化指标均正常。试验结果表明本项目研制的重组猪干扰素α1冻干粉针剂对仔猪无明显毒副作用,使用安全。     

重组猪α干扰素理化性状及其体外抗病毒活性研究(摘要)(英文)

[目的]研究重组猪α干扰素(rPoIFN-α)半成品理化性状并对其体外抗病毒活性进行测试与鉴定。[方法]用HEp-2/VSV体系对3批rPoIFN-α蛋白进行抗病毒活性检测,以重组人IFN-α为参比品,测定干扰素效价;用0.25%胰蛋白酶HCl以及鼠抗猪α干扰素单克隆抗体作用已知效价的rPOIFN-α半成品,并检测各批次抗病毒活性,对rPoIFN-α理化性状进行评价;在猪肾细胞株(PK-15)上检测rPoIFN-α对猪细小病毒(PPV)和猪伪狂犬病毒(PRV)的致细胞病变抑制效应,观察rPoIFN-α的体外抗病毒活性。[结果]HEp-2/VSV体系滴定rPoIFN-α半成品效价可达1.5×105IU/ml,比活性达1.1×106IU/mg;rPoIFN-α经0.25%胰蛋白酶37℃作用1h,效价残留率低于1%,经HCl(pH=2.0)处理72h效价残留率高达95%以上,经56℃处理30min效价残留率高于47%,经鼠抗猪α干扰素单克隆抗体37℃作用1h后效价残留率约为1%;体外抗病毒试验表明,用50和500IU/mlr PoIFN-α可分别抑制PRV和PPV对PK-15细胞株致细胞病变效应。[结论]rPoIFN-α具有IFN-α的基本理化性状,其在体外可分别抑制PRV、PPV对PK-15细胞株致细胞病变效应,但剂量有差别。     

重组猪干扰素α对急性病毒性腹泻仔猪肾脏损伤的保护作用研究

为研究重组猪干扰素α(rPoIFNα)在人工感染仔猪病毒性腹泻模型上对肾脏损伤的保护作用,选取10日龄健康三元哺乳仔猪15头,随机分为rPoIFNα治疗组(使用剂量100万单位/头)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染对照组和正常对照组,每组5头仔猪。rPoIFNα治疗组和感染对照组仔猪经口饲喂PEDV悬液4 mL(接种量为4.0×10~(5.5) TCID_(50)/头),正常对照组仔猪同步饲喂4 mL生理盐水,建立PEDV致哺乳仔猪病毒性腹泻模型。模型建立结果显示,攻毒后72 h,感染对照组仔猪全部出现腹泻、脱水等典型病毒性腹泻症状,仔猪小肠及肾脏病料组织的PEDV核酸检测为阳性。同时发现,该组仔猪血肌酐水平显著升高(P0.05),尿比重较其他两组偏高,并检测出颗粒管型和尿蛋白。镜下HE染色病理学观察到肾间质组织中出现嗜酸性粒细胞,提示超敏反应参与对肾脏的损伤。rPoIFNα治疗组仔猪症状轻微且易恢复,PEDV核酸检测阳性率仅为30%。仔猪相关血液及病料组织样本检测结果显示,rPoIFNα对PEDV感染仔猪治疗有效率达到60%。试验表明,rPoIFNα可有效治疗PEDV感染引起的仔猪腹泻,同时对肾脏具有明显保护作用。     

基于ASP．NET的农业管理决策信息化系统的设计与实现

在了解NET技术和三层体系结构的基础上,分析了一个基于该技术的B/S结构的应用系统——农业管理决策信息系统。该系统是数字化农业信息的重要设施。本文介绍了用ASP．NET作为Web应用程序开发工具所具有的优越性和安全性,说明了Web Services的体系结构及其在本系统中所提供的聚类功能,WebGIS地图组件所提供的各种功能和具体的使用方法,阐述了本系统采用的产业空间分布组件的基本算法。此外还将系统的设计从结构和功能两个方面来进行了说明。     

中国IT科技人员培训状况探析

基于实地调研和调查问卷的结果分析,对中国IT科技人员培训现状和问题进行了深入剖析,并提出了相应对策与建议。     

对农业机械化水平评价及其指标的浅见

农业机械化水平，是对机器在农业生产中使用程度和效果的一种度量。农业机械化水平的提高是农业现代化发展、农业综合生产能力和社会经济效益提高的重要体现。虽然在不同国家或不同的社会经济发展阶段，农业机械化具有不同的内涵，但在一定的社会经济条件下是不变的。     

菩提树药学研究概况

菩提树是治疗哮喘、糖尿病、腹泻等的传统中药,其应用潜力较大.在广泛文献检索基础上,对菩提树的成分、药理、临床应用等进行了概述,为深入开发利用菩提树提供基础资料.     

两种细胞株滴定重组猪α干扰素效价的比较研究

采用水泡性口炎病毒（VSV）作为攻击病毒,以微量细胞病变抑制法对同批次不同浓度的8组重组猪α干扰素（rPoIFN-α）样品进行了效价检测,以中国药品生物制品检定所指定使用的标化重组人α干扰素为效价滴定的参比标准,对在牛肾细胞（MDBK）株和人喉癌上皮细胞（HEp-2）株所得结果进行比较,并对细胞与待测样品按＂一步法＂和先加细胞,待细胞长满单层再加待测样品的＂两步法＂所得的rPoIFN-α抗病毒效价进行比较。结果表明：MDBK细胞株与HEp-2细胞株对于rPoIFN-α抗病毒活性检测结果无显著性差异,均可用于rPoIFN-α抗病毒活性的检测,重组人α干扰素滴定系统可用于rPoIFN-α效价检测。两种加样方法所得结果基本相同,推荐使用＂一步法＂。     

重组猪干扰素α的纯化工艺研究

[目的]研究重组猪干扰素α的纯化工艺,为进一步研究该蛋白的分子结构及rPoIFN-α标准品的制备奠定基础。[方法]将含重组菌E.coliBL21诱导表达后得到的粗制rPoIFN-α,分别用2种方案进行纯化。方案1,依次用GST亲和层析法、DEAE阴离子交换法及分子筛法层析三步法进行纯化;方案2,依次用GST亲和层析和分子筛法层析两步法进行纯化。纯化结果用SDS-PAGE及Western-blot进行纯度检测及鉴定。[结果]诱导表达后的表达产物经SDS-PAGE检测,发现在45Kd分子量处有目的条带,Western-blot检测有特异性条带。通过两步法纯化后的rPoIFN-α纯度达96%,蛋白得率为42.8%,三步纯化纯度为98.8%。[结论]两步法得到的蛋白纯度非常接近三步法,但与三步法相比工艺更为简单方便。