猪2型圆环病毒核酸疫苗的研制及其对小白鼠的免疫效果

为研制猪2型圆环病毒（PCV2）新型核酸疫苗，以pcDNA3为载体，与PCV2的ORF2及其高变区V1、V2、V3、V1-V2连接，分别成功构建了真核表达质粒pcDNA3-ORF2、pcDNA3-V1、pcDNA3-V2、pcDNA3-V3和pcDNA3-V1-V2。对阳性真核表达质粒大量生产并纯化后，以每只小白鼠0．2mg免疫5周龄左右的雌性小白鼠，然后用ELISA检测免疫小白鼠血清中抗体的产生情况。结果显示，这5种真核表达质粒均能刺激小白鼠产生特异性抗体，但相比之下，真核表达质粒pcDNA3-V1-V2诱导小白鼠产生的抗体水平更高，维持的时间更久。表明质粒pcDNA3-V1-V2的免疫效果较好，有望成为防制猪2型圆环病毒的候选疫苗。     

南方三省猪繁殖与呼吸综合征病毒分子流行病学调查研究

根据VR2332和CH-1aE基因序列设计一对特异性引物，对广西、广东、海南三省15个猪繁殖与呼吸综合征病毒毒株E基因进行RT-PCR扩增，将扩增出的668bp片段插入pMD18-T载体中，进行序列测定。结果显示，15个毒株的E基因核苷酸序列之间的相似性为84．1％～100％，推导编码的氨基酸序列之间的相似性为81．1％～100％；与VR2332、CH-1a、LV株核苷酸之间的相似性分别为85．4％～98．5％、87．1％～96．2％、62．5％～63．8％，与VR2332、CH-1a、LV株氨基酸之间的相似性分别为83．1％～95．5％、86．1％～95．0％、51．7％～57．2％，表明15个毒株的E基因区域变异较大，均属美洲型。将15个流行毒株与国内外已发表的37株猪繁殖与呼吸综合征病毒相应序列进行比较，建立的遗传进化树表明这15个毒株分别属于3个亚群。推导编码氨基酸的比较结果表明，分别属于不同亚群的不同地区流行的猪繁殖与呼吸综合征病毒毒株在E基因编码蛋白的潜在糖基化位点数目、抗原表位区域和与毒力相关的氨基酸等均存在变异。     

仔猪伪狂犬病的诊断

猪伪狂犬病 (PR)是由伪狂犬病毒引起的一种以发热、脑脊髓炎为主要症状的急性传感病。本病在成年猪主要是隐性感染 ,无任何症状 ,怀孕母猪常出现流产、死胎、木乃伊、不育等生殖障碍。仔猪尤其是哺乳仔猪表现发热、神经症状、麻痹、衰竭死亡。世界上已有 44个国家发生本病 ,许多发达国家已将本病列为猪的重点防制疾病之一。我国自刘永纯 (1 947)首先在我国报道家猫伪狂犬病以来 ,到目前已超过2 2个省 (市 )报道本病 ,给养猪业造成巨大的经济损失 ,已成为影响我国养猪业发展的重要传染病之一。我们在 1 998年 5月从桂东南某市猪场诊断了一起…     

马铃薯Y病毒N-Wi株系广西分离物的鉴定

 马铃薯Y病毒 (potato virus Y,PVY) 是一种重要的农作物病毒,可造成产量损失和产品质量下降。其宿主范围广泛,包括马铃薯、烟草、番茄和辣椒等经济作物。在广西从叶片表现斑驳褪绿症状的马铃薯上分离到一株PVY分离物DX,其基因组包含一个大的开放阅读框 (open reading frame,ORF),由9 186 nt组成,编码3 061个氨基酸。系统发育进化分析显示,分离物DX与PVY^N-Wi株系分离物IUNG-12、SGS-AG、MAF-VOY聚类成一个分支。重组分析表明分离物DX基因组在496 nt和2 388 nt存在重组位点,分别位于P1和HC-Pro/P3结合区,是分离物Oz和N605的重组体。通过机械摩擦接种,分离物DX可侵染茄科9种作物,引起本生烟叶片花叶、皱缩和泡状突起等症状;引起普通烟草和番茄的轻微花叶症状;引起马铃薯叶片花叶症状,接种辣椒没有发病。序列比对分析显示,分离物DX缺乏引起烟草叶脉坏死相关的氨基酸位点N₂₀₅、K₄₀₀和E₄₁₉。本研究比较了分离物DX对茄科共12种作物的侵染能力和病害症状差异,结果表明分离物DX可用于探索PVY在不同寄主中的致病机理。     

牛结核病研究进展

牛结核病是由牛分支杆菌引起的一种人畜共患慢性传染病,近年来该病的发病率有增长的趋势,不仅给我国的养殖业造成重大经济损失,而且影响到公共卫生安全。主要对牛结核病的流行病学、病原学、发病机制、诊断方法、综合防控等方面的研究进展作一介绍,以期为相关研究提供参考。     

S-腺苷高半胱氨酸水解酶在甲基循环中的代谢调节

S-腺苷高半胱氨酸水解酶(Adohcyase)广泛存在生物体内,其功能主要是催化细胞S-腺苷高半胱氨酸(Adohcy)可逆水解生成腺苷(Ado)和高半胱氨酸(Hcy).论文主要阐述了S-腺苷高半胱氨酸水解酶在真核生物细胞中调节S-腺苷高半胱氨酸、S-腺苷甲硫氨酸、腺苷、高半胱氨酸的代谢途径和S-腺苷高半胱氨酸、S-腺苷...     

RT-PCR检测猪瘟病毒初探

本研究建立了反转录聚合酶链反应 ( RT PCR)技术检测猪瘟病毒 ( Hog Cholera Virus,HCV)方法。合成的二对引物 HCV 1 / HCV 2和 HCV A1 / HCV A2成功地扩增兔化弱毒株、法国株和石门株的核酸 ,并对采自博白县 3个、贵港市 1个和武宣县 1个猪场共 1 3份病料进行检测。结果从博白县和贵港市的 1 1份材料中检测到 HCV的核酸。     

RT-PCR检测健康猪扁桃体和流产死胎猪瘟病毒的应用及RFLP分析

本研究用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术对广西部分猪场的健康猪扁桃体材料以及流产胎儿和死胎中的猪瘟病毒(HCV)进行检测.70份健康猪扁桃体材料中阳性11份,阳性率达15.7%;52份流产胎儿及死胎材料中检出阳性9份,阳性率达17.3%.表明广西猪场中有比较严重的健康带毒情况.用限制性片段长度多态性分析法(RFLP)对25份阳性材料、HCLV和石门毒的引物A1/A2的PCR产物进行分析,发现HCLV、石门强毒和广西流行野毒的RT-PCR扩增产物中均有Rsa工的一个识别序列,但HCLV上的识别序列所在位置不同.本研究表明,用引物A1/A2作RT-PCR检测,并结合RFLP分析技术可把兔化弱毒和流行野毒区分开来,这将对预防猪瘟起到十分重要的作用.     

猪繁殖与呼吸综合征病毒GXA株分离及主要结构基因的克隆和序列分析

近来,广西一些养殖场频繁发生以母猪流产、死胎、木乃伊、仔猪呼吸道症状等为特征的流行性传染病,怀疑为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染所致。本研究从病猪中采集材料,经RT-PCR检测为阳性后,接种于Marc-145细胞,经过6代盲传,发现典型的细胞病理变化(CPE),经鉴定为PRRSV,命名为GXA株,其毒价为105.33TCID50/mL。参考VR-2332和CH-1a株基因序列,设计了3对特异性引物,分别对GXA株的E、M、N基因同时进行了RT-PCR扩增、克隆和测序。应用DNAstar生物学软件拼接得到GXA株的E、M和N3个基因片段共长为1473bp。同源性分析表明,GXA株与VR-2332、MLV和BJ-4的同源性为99.7%～100%,而与欧洲型代表株LV的同源性只有66.4%。表明GXA与VR-2332、MLV及BJ-4株亲缘关系比较密切,与欧洲型代表株LV亲缘关系最远,属于美洲型毒株,有可能来源于疫苗株。