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同时检测CSFV、PRRSV的二重RT-PCR方法的建立及其在临床样品检测中的初步应用 总被引:1,自引:0,他引:1
建立了1种一步法RT-PCR用于同时检测典型猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖呼吸道综合征病毒(PRRSV)的多重PCR诊断方法(Multiplex PCR,mPCR)。根据Genbank上公布的CSFV、PRRSV基因组全序列及部分序列,借助DNAStar和Oligo6.0基因序列和引物设计软件,设计2对特异性引物分别用于扩增CFSV、PRRSV病毒777bp和434bp的目的片断。该mPCR由RT反应和PCR反应构成。将病毒核酸连接到PMD18-T载体,提取质粒后,以10倍进行倍比稀释,取每个稀释度的病毒核酸进行mPCR反应,对CSFV、PRRSV的最低检测量分别为8.5pg、8.3×10-2pg。以PCV2、PCV1、PPV、PRV、SIV、E.coil和双蒸水为模板进行mPCR反应,扩增结果均为阴性,表明该mPCR具有较好的特异性。对临床样品的检测表明,本研究建立的mPCR诊断方法能够对CSFV和PRRSV进行快速的诊断,同时对CSFV、PRRSV在猪群中的流行病学调查也具有十分重要的意义。 相似文献
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猪繁殖与呼吸综合征病毒反转录环媒恒温检测方法的建立 总被引:2,自引:1,他引:1
本研究利用PrimerExplorer V4软件设计了针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)N基因保守区6个特异性部位的4种引物,建立了PRRSV的反转录环媒恒温检测方法.利用该方法所建立的反应体系在恒温水浴锅中作用1 h即可得到其特有的阶梯状条带,而且猪细小病毒、猪圆环病毒、猪瘟病毒、伪狂犬病毒和健康猪睾丸细胞的扩增结果均为阴性.本方法对PRRSV的最低检出量为1 ×100个~1×101个基因拷贝.反转录环媒恒温检测方法和普通RT-PCR方法检测临床样品的符合率为96.2%.该方法为现地开展猪繁殖与呼吸综合征的快速诊断和综合防治方案的提出提供了有力的诊断工具. 相似文献
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复合微生态制剂对肉仔鸡肠道菌群及抗氧化机能的影响 总被引:18,自引:1,他引:18
将160只一日龄健康艾维因肉仔鸡随机分成四组,其中三组在饮水中添加不同益生茵组合的复合微生态制剂,分别抽样测定其在7、14、21、28、35、42、49日龄时盲肠内容物菌群的数量和血清中SOD、GSH-PX、MDA的活性。结果表明:复合微生态制剂组与对照组比较显著地增加了肠道内乳杆菌、肠球菌的数量,同时显著地降低了肠道内大肠杆菌的数量;另一方面复合微生态制剂能显著提高肉仔鸡血清中soD、GSH-PX的活性,降低血清中MDA的含量,明显提高机体的抗氧化机能,增强了肉仔鸡的抗病力。 相似文献
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张超范 《畜牧兽医科技信息》2020,(2):22-23
本文从畜牧兽医研究所图书馆所处的历史沿革和时代背景,通过分析畜牧兽医研究所图书馆面临的实际困境和当下运转现状,阐明新时代图书馆馆员必须运用新理念来管理图书馆,不断转变服务方式和服务内容,借助网络平台,让图书馆不断焕发生机和活力。 相似文献
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从临床疑似猪伪狂犬病发病仔猪的脑组织病料中,经聚合酶链式反应(PCR)证实为猪伪狂犬病病毒(PRV)野毒感染,采用无PCV1污染的猪肾细胞系(PK-15)分离培养,经蚀斑克隆纯化,培育1株细胞培养适应毒,命名为PRV-JF株。该分离株经细胞培养传代,能够产生典型的细胞病变,病毒滴度随代次显著增加,第24代毒价达10^8.5 TCID50/mL。免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)检测病毒抗原分布在细胞核及细胞质内。病毒感染细胞可被已知PRV阳性血清中和。电镜负染观察到病毒粒子呈椭圆或圆形外观,无囊膜的病毒粒子直径约110nm~150nm,有囊膜的成熟病毒粒子直径约150nm~180nm。PCR鉴定该毒株含有gE基因,其序列与GenBank登录的7株PRV同源性为97.7%~100%。用不同剂量病毒培养物接种家兔于24h~72h内全部死亡。研究表明,PRV-JF分离株对易感动物具有高致病性,为进一步开展该病毒流行病学、致病机理、疫苗免疫与诊断研究奠定了基础。 相似文献
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造成我国奶牛低产的主要传染病危害情况分析 总被引:1,自引:0,他引:1
近年来,我国饲养的奶牛数量呈快速增长势头,对农业调整、农牧换位,促进农业发展和农民致富发挥了重要作用。然而由于多种因素造成我国奶牛单产低、效益差,与当初养牛时能快速致富的想法差距较大。根据调查,我国许多地区的奶牛单产不足3t,是现有条件本应达到产量的一半。有些地区奶牛养殖业经过30多年的精心培育,奶牛品种和饲养管理都有较大提高,部分地区的奶牛甚至全部是进口的优质奶牛,饲养和管理都是遵循国外的先进做法。 相似文献
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PRV-IPMA抗体检测试剂盒的研制及其应用 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究建立了一种免疫过氧化物酶单层细胞试验法(IPMA),用于猪伪狂犬病病毒(PRV)血清抗体检测。通过对IPMA反应条件的优化,组装成PRV-IPMA诊断试剂盒,并对该试剂盒检测的敏感性、特异性、重复性及保存期等进行了试验。结果表明,IPMA检测相对于SN的敏感性为96.2%,特异性为97.7%,两者的总符合率为96.9%;该试剂盒检测的重复性好,与其它病毒参考血清无交叉反应;试剂盒可在-20℃保存12个月,用该试剂盒检测PRV人工感染猪血清,于感染后2周抗体全部阳转,健康对照组猪血清抗体检测均为阴性结果。对来自黑龙江、吉林、上海、内蒙古、河北等地采集的5个猪场后备母猪150份血清样本进行检测,PRV血清抗体阳性检出率为16.7%~50%。检测结果表明这些猪场后备猪群仍需加强疫苗免疫。该试剂盒的研制为我国PRV流行病学调查和疫苗免疫效果的评价提供了技术手段。 相似文献