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21.
黄瓜花叶病毒甜菜分离物的分离鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
从新疆石河子地区春季采种甜菜和夏播母根用甜菜上分离到3个病毒分离物,代号为石-B-2、石-B-5和石-B-D,自然感染甜菜引起叶片黄色花叶、扭曲、皱缩和植株严重矮化。病毒粒体球状、直径28~30 nm、均含有分子量约为2 9k D外壳蛋白、3种相同的较大片段的双链RNA (即3400 bp的RNA1、3100 bp的RNA2、2300 bp的RNA3)和片段大小约400 bp的小RNA,石-B-2和石-B-D具有1100 bp的RNA4,在ELISA和琼脂双扩散试验中,3个分离物均与CMV-83抗血清有特异反应,初步认为这3个球状病毒分离物属于CMV,但它们具有狭窄的寄主范围,不感染心叶烟、蔓陀罗、番茄,在寄主反应、双链RNA4和卫星RNA的大小上明显不同于国内外报道的CMV株系或分离物,同时说明侵染甜菜的CMV可能存在着株系分化。 相似文献
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前言酶联免疫吸附技术(Enzyme Linked Immunosorbent assay简称ELISA)自1976年在植物界问事以来,已获得日益广泛的应用,方法也逐渐改进和完善,充分体现出它灵敏度高、特异性强、快速、准确之优越性。本试验试图利用同种抗原免疫两种动物制备特异抗体,和市售优质廉价的酶标记物合组ELISA-异种动物抗体双夹心试验,既保持双抗体法灵敏度高、特异性强的特点,又省去制备标记抗体的烦琐手续,也降低了成本,使ELISA检测技术更易于推广应用。 相似文献
24.
A 蛋白酶联法检测植物病毒的研究 总被引:6,自引:0,他引:6
用一种动物的特异抗体,与市售 A 蛋白(SPA)、A 蛋白酶标记物(HRP-SPA)组合成 A 蛋白酶联免疫吸附试验(SPA-ELISA)检测南方菜豆花叶病毒(SBMV)、烟草花叶病毒(TMV)纯化抗原和病株粗澄清液,灵敏度分别为0.128μg/ml 和1:10000。使用的 A 蛋白包被的适宜工作浓度为2.5μg/ml,兔抗 SBMV 血清作第一抗体适宜工作浓度为1:100000,作第二抗体适宜工作浓度为1:1000。检测 TMV 也得到相似的结果。该法的灵敏度是 ELISA-异种动物抗体双夹心法的1~25倍;是 ELISA 间接法的10~125倍;是免疫双扩散法的3000~6000倍。应用这种酶联法既不需要纯化抗体、也不要自己制备酶标记抗体,又不需要制备第二种动物特异抗体就可以得到酶联双抗体夹心法和异种动物抗体双夹心法相似或更好的结果,使 ELISA 更适于在植物检疫上推广应用。 相似文献
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由联合国粮农组织和联合国开发计划署资助,FAO项目协调员奥贝尔(B.Auberi)博士主持的亚太地区柑桔黄龙病防治研究第一次学术讨论会于1987年12月6—12日在福州举行。参加会议的47名代表分别来自菲律宾、印度尼西亚、泰国、马来西 相似文献
27.
ELISA—异种动物抗体双夹心法检测植物病毒及阳性判断标准的初步研究 总被引:1,自引:0,他引:1
用烟草花叶病毒(Tobacco mosaic Virus—TMV)的兔抗血清和鼠腹水抗体与市售的羊抗鼠酶标记物组合成异种动物抗体双夹心酶联免疫吸附试验(ELISA—DSM),检测用14个 TMV 分离物接种、分期采集的番茄、大椒、烟草大量样品和健康样品,磨碎制取澄清液,作系列稀释,测得每一样品各稀释度的光密度(O、D)值,统计分析,找出待检样品以稀释100倍为最适宜的稀释倍数,阳性反应判断标准以 P/N≥1.8—2为好(P 为待检样品 O·D 值,N 为阴性对照 O·D 值),检出率达96.5—95.2%,误诊率为0。 相似文献
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1962年Feldorr等首次介绍了胶体金可作为一种在电镜下示踪的标志,1971年Faulk第一次将胶体金颗粒作为一种特异的标记物用于电镜研究中,1974年Romano等将胶体金标记在第二抗体上,由此产生了间接免疫金染色法。1978年Geoghegan发表了胶体金标记物在光学显微镜上的应用,1981年Danscher建立了用银显色液增强光学显微镜下金颗粒可见性的方法,其后发展成免疫金银染色法。直到1982年Giunchedi等首次 相似文献