啤酒花总黄酮的超声波提取及含量测定

[目的]对啤酒花总黄酮进行提取和含量测定。[方法]采用超声波技术辅助乙醇回流法提取啤酒花总黄酮,用分光光度法进行了含量测定。[结果]啤酒花总黄酮的含量为42.8 mg/g,平均回收率为99.5%,RSD=2.4%(n=6),与传统法相比,提取率增长了16.3%。[结论]首次运用超声波技术从啤酒花中提取出总黄酮,提取纯度较高,方法简单、易操作,无任何污染,是提取啤酒花中黄酮类物质的有效、便捷的方法。     

鸡传染性法氏囊病超强毒Gx及其致弱株基因组B节段的克隆和序列分析

用蛋白酶K法分离提取了鸡传染性法氏囊病病毒强毒株Gx及其致弱株Gt的病毒核酸dsRNA,应用随机引物将RNA反转录成cDNA,以此为模板用长距离一步法扩增出全长基因B节段,将其克隆入PMD18-T载体,进行了测序,并用DNAStar软件进行序列分析.测序结果表明,克隆的Gx株B节段全长为2 827bp,与超强毒参考株UK661的同源性为88.2%,与强毒参考株Harbin-1株的同源性达96.3%;克隆的Gt株B节段全长为2827bp,与弱毒参考株P2的同源性达99.5%.而Gx株与Gt株B节段的核苷酸的同源性只有89.8%;vvIBDV-Gx、IBDV-Gt株B节段全长的获得将为进一步构建感染性分子克隆奠定必要的基础.     

鸡传染性贫血重组抗原间接ELISA诊断方法的建立

本研究应用重组抗原,成功建立了检测鸡传染性贫血病毒血清抗体的间接ELISA诊断方法.确定了抗原最适包被浓度为5μg/mL,血清最适稀释度为1:100,其作用时间为60min,酶标抗体最适作用时间为60min,S/P≥0.24为阳性,≤0.19为阴性,介于二者之间为可疑的判定标准.该抗原不与鸡其他疾病的10种阳性血清反应,具有良好的特异性;批内重复试验,变异系数小于10%,批间重复试验,变异系数小于15%,具有良很好的重复性;该方法可检出人工接毒后20d的血清抗体,直到试验结束110 d时,仍能检出鸡血清阳性率为81%与全病毒包被抗原ELISA方法的检测结果符合率达92%以上,与进口诊断试剂盒的符合率为97%.本研究为现地免疫鸡群抗体检测和进行CIA流行病学调查提供了一种简便的血清学诊断方法.     

绿洲土壤含硫气体释放的环境影响因素研究

挥发性含硫化合物(VOSCs),如H2S、COS、DMS、CS2和CH3SH等在全球硫循环中有着重要作用.通过室内培养分析了环境条件对新疆地区土壤释放的VOSCs的影响.单因素和正交试验的结果表明,土壤水分、温度、硫源物质和pH值是影响土壤CS2和DMS释放的主要因素.当土壤水分为50%～100%、温度35～45℃、硫源物质添加量在2.5 mg/S左右和pH值接近中性的条件下,土壤释放的CS2和DMS显著增加.     

维吾尔药材刺山柑组织快繁无菌系建立的初步研究

[目的]建立的刺山柑组织快繁无菌系.[方法]根据不同部位、不同采集时间等,确定刺山柑外植体的采集时间、部位、灭菌剂和灭菌时间.[结果]建立刺山柑的无菌体系时,选择晴天去采集外植体为好;带芽的茎段污染率高,腋芽的污染率低,选用腋芽作为外植体;操作台外的最佳消毒方法是饱和的洗洁精清洗后用自来水冲洗20 min;操作台内消毒对比10;次氯酸钠、2;双氧水、2;溴水、0.1;升汞,0.1;升汞灭菌效果好,而最佳操作台内最佳灭菌体系为75;酒精消毒10 s,以灭菌去离子水冲洗2次,后于0.1;升汞中浸泡9 min,以灭菌去离子水冲洗5次.[结论]对外植体的采集时间晴天相对雨天污染率低,腋芽出芽率高,酒精和升汞双灭菌效果最佳.     

牛脑钙调素的分离纯化、鉴定及其免疫原制备

[目的]从牛脑中分离纯化钙调素(CaM),并进行生化鉴定,同时用碳二亚胺法制备CaM偶联免疫原.[方法]以phenyl-Sepharose层析法从牛脑中分离纯化CaM,用PDE法检测其活性,以SDS-PAGE、PAGE检测其分子量并观察CaM有无Ca~(2+)结合时的电泳行为,检测其紫外扫描光谱,同时用交联剂碳二亚胺制备CaM偶联抗原进行动物免疫,并用间接Elisa法检测动物血清免疫效价.[结果]纯化后的CaM对PDE有明显的激活作用,电泳结果显示为均一条带,分子量约为17.3 kDa,在SDS-PAGE中,CaM结合Ca~(2+)时比未结合Ca2+时迁移率快;而在PAGE中,迁移率在结合Ca~(2+)比未结合Ca~(2+)时慢;紫外光谱扫描显示约在251、260、267、272 和283 nm有5个吸收峰,动物血清免疫效价为1∶800.[结论]用phenyl-Sepharose层析法纯化CaM和用碳二亚胺法制备CaM偶联抗原是成功的.     

主动免疫肾上腺素能受体肽苗对小鼠生长及血清生理生化指标的影响

旨在评价主动免疫三种肾上腺素能受体肽苗(重组绵羊α2A-AR、β2-AR和化学合成β2-AR第二细胞外环肽)对雌性小白鼠生长、屠宰性能及血清生理生化指标的影响。试验选取雌性昆明小白鼠100只,根据体重随机分为5组(对照组、CL组、α2A-AR组、β2-AR组、SP组)。α2A-AR组、β2-AR组和SP组分别主动免疫重组绵羊α2-AR,β2-AR和化学合成β2-AR第二细胞外环肽,对照组免疫等体积佐剂,CL组从第3周开始饲喂含盐酸克仑特罗的饲粮(10mg/kg),试验期共7周。结果表明,小白鼠在首次免疫重组绵羊α2A-AR、β2-AR和化学合成β2-AR第二细胞外环肽后均可产生抗体,加强免疫后抗体水平持续增加,但是SP组的抗体水平总体较低。与对照组相比,α2A-AR组、β2-AR组和SP组的采食量、体重、屠宰率、内脏重和腿肌重均无显著影响。免疫组的腹脂重有降低的趋势。血液指标显示,免疫组的甘油三酯、谷丙转氨酶活力、谷草转氨酶活力、高密度载脂蛋白胆固醇、尿素氮、血糖、总胆固醇和乳酸脱氢酶活力与对照组无显著差异,但α2A-AR组的低密度载脂蛋白胆固醇水平显著低于对照组和β2-AR组。小白鼠口服盐酸克仑特罗后,采食量增加,试验末体重显著高于免疫组;屠宰率和腿肌重显著增加,肠系膜脂肪重显著降低;血液生理指标与对照组无显著差异,甘油三脂水平显著低于免疫组。研究结果表明,小白鼠主动免疫重组绵羊α2A-AR、β2-AR或化学合成β2-AR第二细胞外环肽后可产生抗体,但并不影响小白鼠的生长、采食量和脂肪沉积。     

南瓜及刺山柑多糖对小鼠免疫功能的影响

[目的]研究南瓜和刺山柑多糖对正常小鼠免疫功能调节作用的影响.[方法]利用超声提取法得到80;的乙醇粗提物,并绘制葡萄糖标准曲线.实验小鼠分为2组,将南瓜和刺山柑多糖配成(50mg/kg·d),分别经胃灌注南瓜及刺山柑多糖,每天1次连续7 d,对照组小鼠用等量蒸馏水代替.于实验第8 d进行小鼠体内免疫功能测试.[结果]南瓜和刺山柑多糖含量分别为67.30;和37.39;,南瓜多糖能提高小鼠免疫器官重量、巨噬细胞的吞噬功能,刺山柑多糖作用不明显.[结论]南瓜多糖具有免疫调节活性作用.     

HPLC法测定新疆巴旦杏中苦杏仁苷的含量

为了建立新疆巴旦杏中苦杏仁苷的HPLC定量测定方法,采用乙醇回流提取法提取苦杏仁苷,以 Zirchrom C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,10 μm)为固定相,甲醇∶水∶冰醋酸(20∶80∶0.05)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为210 nm,柱温为35℃.测定结果显示,苦杏仁苷在20.0～70.0 μg/mL成良好的线性关系,r=0.999 9 ,日内、日间RSD均为0.59;(n=5),平均回收率99.6;(n=6).研究表明,该方法灵敏度高,结果准确,重现性好,方法简便可行,适用于新疆巴旦杏中苦杏仁苷的含量测定,并为其质量控制提供理论依据.