大肠杆菌hemA基因的高效表达及对5-氨基乙酰丙酸合成的影响

大肠杆菌(Escherichia coli)中的hemA基因编码谷氨酰tRNA还原酶,该酶是E.coli生物合成5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)途径中的限速酶。本试验在pEXT20-hem AE.coliBL21(DE3)表达载体的基础上,从质粒克隆hemA基因克隆到载体,构建表达载体pET28a-hemA,以探讨更佳的重组大肠杆菌hemA基因的表达效果。对其蛋白质进行纯化,测得发酵菌液上清液中5-ALA含量达到42.5 mg/L;并对上清提取液中卟啉类物质的积累量进行初步测定,发现403 nm处吸收峰值明显高于同条件发酵提取pEXT20-hemAE.coliBL21(DE3)重组菌。试验表明,用表达载体可以更好地表达hemA基因。     

蓝田县小麦“一喷三防”工作实践与思考

通过对西安蓝田2013年、2014年小麦"一喷三防"工作的成效、具体做法、存在问题进行分析,并提出了改进建议意见,对进一步做好"一喷三防"工作颇有益处。     

硫酸庆大霉素药剂学研究进展

本文以“庆大霉素”“制剂”“药物动力学”“Gentamycin”“preparation”“pharmacokinetics”为关键词,组合查询1988-2018年在中国知网、万方、维普、中国专利信息网、PubMed、Web of Science等国内外数据库中收录的相关文献,归纳、总结硫酸庆大霉素制剂学及药物动力学方面的研究进展。结果表明:共检索到相关文献261篇,其中有效文献44篇。硫酸庆大霉素作为常用的氨基糖苷类药物之一,具有广泛的临床应用价值。目前,以硫酸庆大霉素作为单一主药上市的庆大霉素制剂多为注射途径给药制剂与普通口服制剂。缓控迟释制剂、经皮给药制剂等近年来发展迅速,逐步成为硫酸庆大霉素制剂研发的重点,为硫酸庆大霉素制剂研发开辟了新的思路。     

1例肉雏鸡白痢杆菌病的诊断与治疗

2014年4月下旬，河南省信阳市平桥区某养殖户购入5000只肉雏鸡，14日龄开始出现病鸡，并有死亡，据临床症状观察、剖检变化和实验室诊断，诊断为鸡白痢杆菌病，现将诊治情况介绍如下。     

孔雀念珠菌感染的中药诊治

念珠菌病又称霉菌性口炎、鹅口疮、念珠菌口炎等,是由白色念珠菌引起的消化道上部真菌病。以口、咽、食道、嗉囊及腺胃的黏膜形成白色假膜或溃疡以致坏死为特征。在自然条件下,多种禽类均易感染该病,也可感染其他动物和人。     

枯草芽孢杆菌bioI基因的克隆和高效表达及BioI蛋白的纯化

【目的】克隆和表达枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)bioI基因并纯化表达产物。【方法】提取B.sub-tilis1A747基因组DNA,从中扩增bioI基因并将其克隆到大肠杆菌(Escherichia coli)的表达载体pET-28a(+)上,构建bioI的表达载体pET28a-bioI。将重组质粒pET28a-bioI电转化到大肠杆菌表达宿主BL21(DE3)中进行IPTG诱导表达,对表达产物BioI用Ni2+-NAT亲和层析树脂进行纯化,并对纯化蛋白进行波长扫描。【结果】成功构建了表达载体pET28a-bioI,酶切鉴定结果正确并在大肠杆菌中表达成功,经IPTG诱导8 h后,重组蛋白BioI的表达量占总可溶性蛋白的20%;波长扫描发现,重组蛋白BioI在400 nm处有特征吸收峰。【结论】bioI基因克隆表达成功,其表达产物BioI具有P450蛋白的特征,为蛋白性质的进一步研究和抗体的制备奠定了基础。     

郑州市犬细小病毒病的流行特点

<正>为了解郑州市犬细小病毒病的流行规律,本研究用犬细小病毒抗原检测试剂盒和犬冠状病毒抗原检测试剂盒对2009年3月—2011年3月河南农大附属动物医院接诊的427例具有腹泻、呕吐、粪便带血等症状的患犬作病原检测,从而了解郑州地区犬细小病毒病的流行特点。     

中西结合治疗蛋鸡鼻气管炎鸟杆菌并发大肠杆菌病

鸡鼻气管炎鸟杆菌属于革兰氏阴性菌,单纯的鼻气管炎鸟杆菌感染往往不引起明显的呼吸道症状,但并发大肠杆菌感染时,可加重鼻气管炎鸟杆菌的感染,并表现为明显的呼吸道症状。2011年12月,河南省信阳市平桥区一养殖场蛋鸡发病,导致大批鸡死亡,造成严重的经济损失,经诊断为鸡鼻气管炎鸟杆菌合并大肠杆菌病,现将诊     

硫酸头孢喹肟脂质体的毒理学试验及安全性评价

采用急性毒性试验、局部刺激性试验和亚慢性毒性试验对硫酸头孢喹肟脂质体安全性进行评价,以期为临床用药提供参考。小鼠腹腔注射硫酸头孢喹肟脂质体半数致死量（LD₅₀）为639.73 mg/kg,95%可信限为573.06~714.17 mg/kg;该制剂对家兔股四头肌未见明显刺激作用;各给药剂量组家兔的体重、血液学指标、生化指标与对照组比较均无显著差异（P>0.05）;对肝脏和肾脏病理学观察表明,正常治疗剂量和中剂量组肝脏和肾脏组织结构清晰,但高剂量组出现肝细胞排列紊乱,肝血窦间出血,肾小球、肾间质有散在出血。以上结果表明硫酸头孢喹肟脂质体安全可靠,可应用于兽医临床。     

饲料中硝基咪唑类药物的GC-MS检测方法

采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)法测定饲料中硝基咪唑类药物的含量,通过色谱分离,发现保留时间与标准一致,线性关系良好,检出限为0.20～0.63 ng/kg,回收率为83.7%～95.4%,此外日内和日间的变异系数均小于15%。结果表明,GC-MS法适用于饲料中的硝基咪唑类药物的含量测定。