鸡源性沙门氏菌临床分离株的耐药性分析

氟喹诺酮类药物在临床上被广泛使用。病原微生物对大多数喹诺酮类药物的耐药率达10％以上，有的甚至达到40％～70％。很多资料表明，沙门氏菌对氟喹诺酮类药物的耐药现象也很严重，且耐药率呈逐年升高的趋势。本试验对来源于不同地区的样本进行分离、鉴定，经过筛选，得到9株对氟喹诺酮类药物耐药水平较高的鸡源性沙门氏菌，分析了它们对10种抗菌药物的敏感性，为研究和探讨沙门氏菌的耐药机制打下了基础。     

禽白血病研究进展

禽白血病是由反转录病毒科禽白血病 /肉瘤病毒群病毒 ( AL /SV)引起的禽类多种肿瘤性疾病的总称 ,感染率高 ,发病率低。 AL /SV可通过水平和垂直两种方式传播感染鸡群。鸡群感染此病会导致严重的经济损失 ,一是产生肿瘤 ,导致鸡的死亡 ;二是生产指标下降。但至今人类还不能有效的预防和治疗本病 ,控制禽白血病的主要方法是通过病原检测 ,淘汰阳性鸡 ,净化种群。国内外相继建立了多种检测禽白血病的方法 ,其中 EL ISA法能高效的检测到蛋清中的 AL SV抗原 ,具有敏感、简便、快捷、适用于大面积检测的特点 ,在种群净化中得到了广泛的应用 ,但 EL ISA诊断试剂盒在我国还未实现商品化。随着我国养禽业的发展以及科研、生产和检疫的需要 ,建立高效、实用的禽白血病检测方法 ,研究和控制本病将是今后的重要任务。文章就禽白血病的病原、流行病学、种群净化及防制等方面的研究进展进行了综述。     

兔出血症病毒VP60蛋白的原核表达及检测方法初步应用

VP60是免出血症病毒（RHDV）的主要结构蛋白，也是免疫原性蛋白，与诱导抗病毒免疫反应直接相关，因而也是检测用首选抗原。本实验在原核系统pPRoEX^TMHTa中表达了VP60基因，经SDS—PAGE电泳中可见表达带。Western blot鉴定结果表明，重组蛋白可被RHD阳性血清特异性识别，具有相应的抗原性。将表达蛋白经SDS—PAGE电泳切胶纯化后免疫BALB／c小鼠，免疫血清经全病毒ELISA检测，效价可达1：3200-1：6400，经琼脂扩散试验检测效价为1：16。重组蛋白纯化、复性后，作为包被抗原初步建立了间接ELISA方法，并检测了48份免血清样品，与全病毒间接ELSIA试剂盒检测结果相同。实验结果表明．用原核系统表达的VP60蛋白．可以作为RHD新型诊断试剂的候选抗原。     

黑龙江野鲤细菌人工染色体基因组文库构建

为了开展鲤基因组研究，深入研究遗传连锁图谱遗传标记的定位及数量性状的定位和克隆，并最终为分子育种提供服务，本实验构建了鲤的Cyprinus caxpio haematopterus）全血细胞制备琼脂糖凝胶包埋块的方法获     

[03]黑龙江野鲤细菌人工染色体基因组文库构建

为了开展鲤基因组研究,深入研究遗传连锁图谱遗传标记的定位及数量性状的定位和克隆,并最终为分子育种提供服务,本实验构建了鲤的BAC基因组文库.通过采集黑龙江野鲤(Cyprinus caxpio haematopterus)全血细胞制备琼脂糖凝胶包埋块的方法获得了高分子量(HMW)DNA.通过BamHI部分酶切和PFGE电泳分离选择获得1130～300 kb的DNA片段,用电洗脱和透析的方法对产物进行浓缩和纯化.纯化的HMW DNA连接到大小为7.2 kh的克隆载体pEZ BAC上.为了评估构建的文库的质量使用一系列引物对文库进行了验证.本研究首次构建黑龙江野鲤的BAC文库,该库含有46656个克隆,插入片段大小在50～300 kh之间,平均大小在100 kb左右,覆盖鲤全基因组2.45倍,调取任一基因的概率为90070左右.获得的BAC克隆,保存在378块96孔板和27块384孔板中.建立了高效稳定的2步3维PCR筛选黑龙江野鲤BAC文库的方法.本实验为今后进一步进行鲤的功能基因定位及染色体步行、BAC-FLSH等研究工作打下重要基础.