月季花瓣中农杆菌介导的基因瞬时表达体系的优化及其在RNAi中的应用

在植物中通过农杆菌介导的基因瞬时表达和基于RNAi的基因沉默可便捷高效地研究基因功能。本研究采用农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)注射侵染法,利用GUS作为报告基因,探讨了月季(Rosa hybrida)品种、农杆菌菌株、开花级别、花瓣位置、农杆菌侵染浓度和侵染液成分等因素对月季花瓣中基因瞬时表达效果的影响。结果表明,月季品种蜜糖3级切花的中层花瓣中瞬时表达效果最佳;农杆菌菌株GV3101介导的瞬时表达效果最好,侵染浓度以OD600=0.9为宜,添加10 mmol/L MgCl2及10 mmol/L MES的侵染液效果优于重蒸水。同时,利用上述优化瞬时表达体系进行RNAi沉默,成功抑制了外源报告基因GUS和内源基因RhSAG的表达。相比对照,RhSAG沉默花瓣的萎蔫速度较慢,说明衰老进程得到延缓。该体系的优化为月季花瓣中基因功能的鉴定提供了有效工具。     

茉莉离体微繁及无糖生根技术

为解决茉莉长期无性繁殖导致的种性退化、抗逆性下降、花朵产量逐年下降等问题,进行了茉莉离体微繁及无糖生根技术的研究.结果表明:茉莉腋芽萌发的适宜培养基为MS 6-BA 2.0 mg/L NAA 0.1 mg/L;继代增殖的适宜培养基为MS 6-BA 1.5 mg/L NAA 0.3 mg/L GA3 0.5 mg/L;无糖生根的适宜培养基为1/2 MS NAA 1.2 mg/L;适宜培养条件为光强5 000～5 500 lx、CO2浓度1 500 mg/L、通气孔数为3个.无糖试管苗移栽后长势健壮,成活率可达95%.     

地被菊花幼苗耐旱性评价方法研究

 选用地被菊品种White Snow 10叶龄扦插生根幼苗进行自然失水胁迫和PEG胁迫处理。划分了不同处理萎蔫指数，测定了鲜样质量保持率、叶片水势、叶片溶质渗透势、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活性。结果表明，萎蔫指数划分的主要形态特征因胁迫方法而异。自然失水胁迫8 h为幼苗恢复极限；在恢复极限内复水，幼苗鲜样质量保持率、叶片水势、MDA含量和SOD以及CAT活性的变化规律显著。20％PEG胁迫4 h为恢复极限；复水期间的鲜样质量保持率、叶片溶质渗透势、MDA含量和SOD活性的变化规律显著。综合上述，这2种方法都可以用于地被菊花幼苗耐旱性快速评价；不同的胁迫处理方式可利用的水分状况和生理指标存在一定的差异。     

无菌条件下野蔷薇种子快速催芽的研究

野蔷薇种子休眠深,发芽极不整齐,给育苗带来很大麻烦。以野蔷薇的3个无刺品系No.3、No.4、No.11和野蔷薇变种荷花蔷薇为试材,研究在无菌条件下,冷藏时间、GA3浓度和不同基质对野蔷薇种子发芽的影响,探索快速得到无菌实生苗的条件。结果表明:(1)影响野蔷薇种子萌发最主要的因素是冷藏时间;(2)3个无刺品系种子在冷藏10～15d、GA30.05～0.1mg/L处理时发芽率均在90%～100%,而荷花蔷薇种子在冷藏15d、GA30.05mg/L处理时最高发芽率为73%;(3)选用沙子作基质比蛭石更适合种子发芽。     

北京市医院植物多样性与植物景观分析

医院是向人们提供医疗服务、健康恢复的机构,其绿化空间是反映医院形象,提高患者舒适度的重要场所。为此,我们以北京市30所综合医院作为研究对象。对现有园林绿化中植物种类、配置模式、造景手法进行了实地调研,分析医院绿地覆盖率、植物种类、各个生活型植物所占比例、常见植物应用频度等方面,总结园林植物不同的配置模式。结果表明,共记录园林植物128种,隶属于73科。园林植物配置模式有乔木、灌木、地被等单层群落,也有乔灌、乔草等复层群落,及乔灌草共3层群落。医院园林总体规划欠缺、植物种类偏少、景观相对单调、室内景观缺乏。针对存在的问题,对医院园林的总体布局、垂直绿化、特色保健植物的选用等提出了建议,希望能为北京医院绿地规划和建设提供参考。     

重要观赏植物花发育的分子机理

花是观赏植物重要的经济器官,控制花发育的基因包括花序分生组织特性基因、花分生组织特性基因、花器官特性(同源异型)基因等。全面回顾了观赏植物花发育基因调控的分子机理,重点介绍了花器官发育的ABCDE模型和四因子模型,以及月季、百合等重要观赏植物的花器官特性基因。从基因资源和观赏性状等方面,提出了观赏植物花期花型分子育种的策略,为进一步探索观赏植物花发育的分子机理,定向控制观赏植物的花期花型奠定了基础。     

月季Rh-ADF1基因在花瓣扩展中响应乙烯的表达特性分析

 为探讨肌动蛋白解聚因子（actin depolymerizing factor,ADF）是否参与乙烯对月季花瓣细胞扩展的调节,以切花月季‘Samantha’为试材,从花瓣中分离到响应乙烯的ADF基因,并将其命名为Rh-ADF1,在GenBank中的登录号为JN048105。推定的氨基酸序列分析表明,Rh-ADF1的开放阅读框长度为423 bp,编码140个氨基酸。半定量RT-PCR分析结果表明,Rh-ADF1在花朵的各个器官中均有表达,在花瓣中略高于其他器官;该基因表达能够被乙烯处理强烈诱导升高,被乙烯作用抑制剂1-MCP（1-Methylcyclopropene）处理明显降低。在洋葱表皮细胞中进行的瞬时表达分析表明,Rh-ADF1蛋白分布在整个细胞中,主要与actin组成的微丝网络结合。据此推测,Rh-ADF1基因在转录水平上参与乙烯对花瓣扩展的调节,乙烯可能通过Rh-ADF1基因调控了花瓣细胞骨架的动态变化,进而影响花瓣细胞扩展和形态变化。     

基于种植设计单元的清华大学植物景观营造研究

以种植设计单元理论为基础,以清华大学各类种植设计单元作为研究对象,采用有别于以植物观赏特性或生态学的植物群落样方法为主要手段的传统研究方式,利用AHP法对不同单元进行评价。研究结果表明:养护管理水平、结构层次的清晰性与地被覆盖率是影响所有植物景观的关键因素,而不同类型的种植设计单元的其他影响因素各不相同。     

月季切花乙烯受体ETR1 cDNA克隆及其序列分析*

 根据乙烯受体基因ETR1 保守区设计引物, 分别以瓶插寿命差异显著的月季切花品种‘德克萨斯’和‘维亚蒂’为材料, 通过RT-PCR 从花瓣中扩增出了797 bp 的cDNA 片段, 它编码265 个氨基酸。测序和序列分析表明,‘德克萨斯’重组质粒中插入片段的核苷酸序列之间完全相同, 命名为pRT-ETR1。而‘维亚蒂’所获得的重组质粒中插入片段的核苷酸和氨基酸序列之间存在差异, 同源性分别为85. 2 %和92. 1 % , 分别命名为pRV-ETR1-V4 和pRV-ETR1-V5。pRV2 ETR12V5 的核苷酸和氨基酸序列与‘德克萨斯’pRT2 ETR1 的同源性均达99 %以上; pRV-ETR1-V4 中的核苷酸和氨基酸序列与‘德克萨斯’pRT-ETR1 的同源性分别为85. 0 %和92. 5 %。上述插入片段与桃、苹果、天竺葵、拟南芥等植物的ETR1相应区域高度同源, 其氨基酸同源性均大于90 %。     

菊花18个品种的RAPD分析

 采用RAPD 技术分析了18 个菊花品种DNA 的多态性。从80 个10 碱基随机引物中筛选出多态性频率高的3 个引物。扩增的多态性片段在600 bp～1300 bp 之间。检测出两个品种特有的分子标记, ‘大红托桂’有OPD15 (1200 bp) ,‘玉翎管’缺失OPA17 (1100 bp) 。瓣型一致的品种间基因型相似系数较高。