豆粕和棉粕日粮中添加α-半乳糖苷酶对肉仔鸡生长性能的影响

试验研究了豆粕日粮和含5%～8%棉粕的日粮中添加α-半乳糖苷酶对肉仔鸡生长性能的影响及可能机制。试验Ⅰ为肉仔鸡饲养试验,选用1日龄AA商品代肉仔鸡公雏672只,随机分为4个处理,每个处理12个重复,每个重复14只鸡,试验期42d。结果表明:在棉粕和豆粕日粮中添加α-半乳糖苷酶对42日龄肉仔鸡体增重分别提高了4.35%和3.49%。试验Ⅱ为排空强饲代谢试验。结果显示:豆粕日粮中添加α-半乳糖苷酶增加蛋公鸡色氨酸真消化率(P<0.001),对其他氨基酸消化率无影响。添加α-半乳糖苷酶的豆粕的,真代谢能值与不添加酶的相比,提高了4.69%(0.51MJ/kg)。本研究表明,在玉米-豆粕型日粮中添加α-半乳糖苷酶,提高了色氨酸真消化率和真代谢能,有利于提高肉仔鸡生长性能。     

蝉抗菌肽基因密码子优化及其毕赤酵母表达载体构建

根据毕赤酵母（Pichia pastoris）密码子的偏嗜性,通过SOEing法合成改造后的抗菌肽Cryptonin基因片段。基因克隆到pGAPZα-A质粒中,获得分泌型重组酵母表达载体pGAPZα-A-Cryptonin。经酶切分析、PCR和测序鉴定证明载体构建成功。表达载体的正确构建为Cryptonin的高效表达和生物学活性研究奠定基础。     

黄芪多糖在LPS诱导的DF-1细胞炎症反应中的抗炎作用及其调节机制

为探讨黄芪多糖(Astragalus polysaccharide,APS)在LPS(lipopolysaccharide,LPS)诱导的鸡胚成纤维细胞系DF-1(chicken embryonic fibroblast cell line,DF-1)炎症模型中对IL-1β和TNF-α表达的影响,以及细胞因子信号转导抑制因子3(suppressers of cytokine signaling 3,SOCS3)对炎症信号通路NF-κBp65和p38MAPK的调节机制。将DF-1细胞分为对照组(C)、LPS组(L)、APS组(A)以及APS+LPS组(A+L),分别在LPS刺激后6,12,24,48,72 h检测各组细胞IL-1β、TNF-α、NF-κBp65、p38MAPK和SOCS3 mRNA和蛋白水平的变化。研究发现,当LPS终质量浓度为2 mg/L时可诱导DF-1细胞出现明显的炎症反应,而APS终质量浓度为100 mg/L时为本试验最佳抗炎浓度。与对照组相比,APS组炎性因子IL-1β和TNF-αmRNA表达及蛋白含量在6~72 h均显著升高(P<0.05);与LPS组相比,APS+LPS组SOCS3 mRNA表达在6~72 h均显著升高(P<0.05),NF-κBp65、IL-1β和TNF-αmRNA表达在6~72 h均显著降低(P<0.05),而p38MAPK变化不显著(P>0.05)。在DF-1细胞中,APS单独处理可以促进IL-1β和TNF-α等细胞因子释放而增强免疫;APS和LPS共处理时,APS通过抑制炎性因子IL-1β和TNF-α的释放发挥抗炎作用,这种抑制作用与高表达的SOCS3对NF-κBp65过度激活密切相关。     

Functional analysis of the venom allergen-like protein gene from pine wood nematode Bursaphelenchus xylophilus using a baculovirus expression system

The pine wood nematode, Bursaphelenchus xylophilus, infects pine trees, leading to fatal pine wilt disease. Here, recombinant venom allergen-like protein (VAP) was obtained by expressing Bx-vap-1 in insect cells. Three-year-old Pinus massoniana were inoculated with recombinant VAP, simulating B. xylophilus esophageal gland secretions. Recombinant VAP up-regulated α-pinene synthase gene expression, the trees showed disease symptoms 15 d after inoculation and the xylem pith revealed brown tissue discoloration, indicating that recombinant VAP could damage P. massoniana cells. Recombinant VAP did not, however, lead to cavitation, indicating that the VAP secreted from B. xylophilus acts as a defense response elicitor.     

正交试验法优化黄褐毛忍冬总皂苷的提取工艺

[目的]建立黄褐毛忍冬（Lonicera fulvotomentosa Hsu et S.C.Cheng）总皂苷的水提工艺。[方法]以黄褐毛忍冬总皂苷中有效成分α-常春藤皂苷的含量为考察指标,采用正交设计法考察加水量、煎煮时间、煎煮次数及浸泡时间4个因素对黄褐毛忍冬总皂苷提取工艺的影响,同时采用高效液相法测定α-常春藤皂苷的含量。[结果]加水量、煎煮次数、煎煮时间、浸泡时间对α-常春藤皂苷含量的影响程度不同,各因素影响程度的大小为：煎煮次数〉加水量〉浸泡时间〉煎煮时间,即煎煮次数对煎煮条件影响最大,为最重要的因素,其次为加水量、浸泡时间、煎煮时间。最优方案为：黄褐毛忍冬药材不用浸泡,加10倍量水煎煮3次,每次1.0h。方差分析结果表明,加水量和煎煮次数对α-常春藤皂苷含量的影响具有显著意义（PA=0.034〈0.05,PB=0.020〈0.05）,而煎煮时间、浸泡时间对水α-常春藤皂苷含量无显著影响（PC=0.500〉0.05,PD=0.264〉0.05）,对测定结果影响小,这与直观分析结果相吻合。[结论]优选提取工艺简单、稳定、可行。     

Improving the Field Emergence Performance of Super Sweet Corn by Sand Priming

Abstract

A priming method called sand priming was developed using sand as a priming solid matrix. The effect of sand priming on improving the field emergence performance of five super sweet corn cultivars was investigated. Sand priming significantly improved field emergence performance of all super sweet corn cultivars, and there was marked improvement by priming at 20ºC for 24 hr. After sand priming at 20ºC for 24 hr, field emergence percentage (FEP) of “Green Superman”, “Huatian 1”, “Yangtian 1”, “Mitian 8”, and “Chaotian 43” was increased by 52.1%, 37.5%, 38.0%, 40.9%, and 33.3%, respectively. Their field emergence speed (FES) was 2.3, 1.8, 2.0, 2.0, and 1.8 times of the control, respectively. To further elucidate the effect of sand priming on improving the field emergence performance of super sweet corn, we analyzed the membrane system integrity, α-amylase activity and protein content. Sand priming at 20ºC for 24 hr improved membrane system integrity and α-amylase activity in all super sweet corn cultivars. Furthermore, sand priming at 20ºC for 24 hr accelerated the degradation of embryo protein after 1 d germination in “Green Superman”.     

橙皮素对金黄葡萄球菌α-溶血素表达的抑制作用

α-溶血素在金黄葡萄球菌的致病过程中发挥着不可或缺的作用。本研究采用最小抑茵浓度测定、茵液上清溶血活性以及α-溶血素含量测定、荧光定量PCR及细胞毒性的测定等相关试验验证了橙皮素对金黄葡萄球菌α-溶血素表达的影响。结果显示，无抗茵活性的橙皮素在较低质量浓度下即可抑制金黄葡萄球菌α-溶血素的表达及其编码基因的转录，是-种潜在的以毒力因子为靶标的前导化合物，并可进一步开发用于抗金黄葡萄球茵感染。     

热加工方式对牛乳过敏原αs1-酪蛋白二级结构和抗原性的影响

为探究热加工方式对牛乳过敏原αs1-酪蛋白构象和抗原性的影响,利用间接竞争酶联免疫吸附测定方法、 免疫印迹方法分析不同加热条件下αs1-酪蛋白免疫原性的变化,进而通过8-苯胺-1-萘磺酸荧光探针和圆二色谱分 析其二级结构变化,初步揭示热处理调控过敏原αs1-酪蛋白抗原性的机制。结果表明：在80 ℃、60 min,90 ℃、 10 min,90 ℃、60 min条件下热处理后,αs1-酪蛋白中α-螺旋结构含量显著低于未加热αs1-酪蛋白,在70 ℃、 20 min,80 ℃、20 min,90 ℃、20 min条件下热处理后,αs1-酪蛋白中无规卷曲含量显著增加,70～100 ℃加热 20 min条件下表面荧光强度最强,其他温度-时间条件下二级结构含量变化不显著;αs1-酪蛋白构象的变化导致αs1-酪 蛋白的抗原性显著降低,间接竞争酶联免疫吸附测定显示,在70～100 ℃加热20 min条件下,αs1-酪蛋白的抗原残留 量均较高,而免疫印迹方法显示不同温度-时间条件下αs1-酪蛋白仍具有免疫反应特性,建议进一步通过动物实验揭 示热处理调控αs1-酪蛋白抗原性的机制。     

诱导母猪同期分娩的技术

在集约化猪场中,要求严格按工艺流程有节奏地进行养猪生产。为了避免夜间产仔和有效地提高商品猪的整体质量,常采用同期分娩解决这一难题。作为调控繁殖节律的技术之一,药物诱导母猪同期分娩已成为集约化养猪业的一个重要研究课题。本文对前列腺素F2α和氦前列烯醇在母猪同期分娩中的应用作一简单介绍。     

饲用α-半乳糖苷酶酶活稳定性的研究

在酶制剂生产加工和储存过程中,酶活稳定性是酶应用过程中最常遇到的实际问题。本文研究不同载体、高温高湿、金属离子、保存初始pH值、保护剂浓度和存储时间对体外α-半乳糖苷酶稳定性的影响。试验结果表明:①无机载体碳酸钙、元明粉和滑石粉对α-半乳糖苷酶活性影响很大,收率均为0%;有机载体中玉米皮粉效果最好,收率高达90.83%;其次是淀粉,收率为61.11%;稻壳粉收率最低,仅为44.72%。②湿度为17%,温度小于85℃,酶活损失率小于10%,说明该酶有较强的耐温能力,温度为90℃,酶活损失率达到16.2%,随着温度上升,酶活损失率开始增加,不利于酶活的保存。③Cu2+对该酶有抑制作用3,7℃恒温水浴4 h后酶活存留率仅为74%,Mn2+、Zn2+、Ca2+、Na+、K+和Mg2+对α-半乳糖苷酶有几近相同的保护作用,酶活存留率均大于92%。④该酶最适保存pH值为5.3;pH值为4.4时,酶活损失率达到30.1%,不利于酶的保存;pH值为5.6时,酶活损失率为3.77%,pH值在4.7~5.6之间,酶活损失率小于10%,有利于酶的保存。总之,过酸和过碱都不利于酶的保存。⑤1%NaCl、1%甘露醇、5%和7%的山梨醇都有杂菌产生,不利于酶的保存3;%~5%的NaCl酶活损失小于10%1,%和5%~7%的甘油酶活损失率小于5%,都有利于酶活保存。