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151.
为了建立用于肠道病毒71型(EV71)感染早期诊断的检测方法,将重组质粒pET-32a(+)-VP1转入大肠埃希菌BL21(DE3)中进行诱导表达,对表达产物进行镍柱亲和层析纯化和复性,并对复性的VP1蛋白进行辣根过氧化物酶标记,作为酶标抗原建立捕获ELISA检测方法.结果表明,该方法μ链抗体包被浓度为1∶3 000,酶标抗原工作浓度为1∶20 000,且酶标抗原稳定性良好;检测临床血清样品阳性符合率为96.1%(49/51),阴性符合率为100%(65/65). 相似文献
152.
153.
154.
油棕是重要的热带油料作物,可提供食用油,还可作工业原料或生产生物柴油。杀酵处理是油棕果提取
棕榈油的第一环节。研究分析了油棕果杀酵过程中杀酵温度、保压时间、果实存放时间、杀酵容量4 个因素对压榨出
油率的影响,结果表明,采摘后的油棕鲜果应尽快杀酵,杀酵罐内油棕鲜果的体积占杀酵罐体积的比例不应超过
0.8,在120益杀酵条件下杀酵60 min,油棕出油率最佳。 相似文献
155.
156.
猪瘟病毒荧光定量PCR检测方法的建立 总被引:4,自引:1,他引:3
通过RT-PCR方法克隆了猪瘟病毒(CSFV) 5′端非编码区(UTR)的一段靶序列,构建重组质粒作为标准阳性模板.同时根据GenBank中的靶序列设计了用于FQ-PCR的一对引物和一条TaqMan探针.通过条件优化,以定量的10倍系列稀释的质粒为标准品进行荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立了CSFV检测的荧光定量PCR方法.结果表明,该方法检测灵敏度可达1.0×100拷贝/μL,线性范围为 109~100,达10个数量级;对起始浓度为1.0×109、1.0×108、1.0×107拷贝/μL的标准品的最终实际测得值(Ct)分别为19.73、22.95和26.24;变异系数分别为0.61%、1.77%和1.18%,均小于5%,说明此方法具有良好的准确性和重现性.对阳性组织病料的检测表明,该方法的检测灵敏度高出常规PCR,与套式PCR具有相近的灵敏度. 相似文献
157.
伪狂犬病病毒gE基因的原核表达及间接ELISA方法的建立 总被引:3,自引:1,他引:2
以质粒pBV222/gE为模板,经PCR扩增出750 bp的伪狂犬病病毒(PRV)gE基因片段,克隆入pET-41b质粒中并转化大肠埃希菌TG1。经PCR、酶切鉴定,筛选出阳性重组质粒pET41b/gE后,转化表达菌Balgold,IPTG诱导,目的蛋白经镍柱亲和层析纯化,SDS-PAGE凝胶电泳和Western blot分析检测。以纯化后的目的蛋白作包被原,建立间接gE-ELISA检测方法。结果表明,目的基因在30℃,0.025mmol/LIPTG诱导条件下,可在Balgold中高效表达,目的蛋白大部分以可溶性形式存在,并能被PRV阳性血清所识别,方阵滴定法确定了间接ELISA方法的抗血清最佳稀释度(800倍)和包被抗原的最佳工作浓度(1 mg/L)。 相似文献
158.
针对目前机采棉加工工艺优化过程中缺乏从系统角度定量评估工艺配置效率的情况,把机采棉加工工艺系统看作一个具有输入输出的系统,以机采棉生产投入、工艺配置情况作为输入指标,以机采棉加工质量和皮棉产量等产出水平作为输出指标,建立了基于SE-SBM(Super Efficiency Slacks-based Measure)的工艺配置效率评价模型。以新疆某棉花加工企业的9条机采棉加工生产线为例,通过收集数据和利用DEA-Slover5.0软件计算,对其工艺配置效率进行了评估和比较,再根据所得结论确定了改进方向和额度,并提出了有针对性的建议。所构建的指标体系和评价方法可用于评估不同机采棉加工生产线的工艺配置效率,能为实施机采棉加工工艺设计和优化改进提供决策参考。 相似文献