杆状病毒在害虫控制中的应用策略

杆状病毒被视为安全和可供选择的生物杀虫剂,已经被广泛应用于防治多类害虫。限制杆状病毒使用的主要因素包括杀虫谱狭窄,杀虫速度缓慢,在试验商品生产中存在技术和经济困难,频繁监测其应用效果比较耗时,气候变化导致其田间药效变化不定等。科学家针对杆状病毒的缺点,尤其是其缓慢的作用速度,正在研究一系列策略,包括增加化学或生物物质的表达量及通过基因工程手段表达其毒素或荷尔蒙。此类策略能提高病毒的活动量和增加其作用速度,并且能够减少幼虫的进食量和进食速度。杆状病毒用于控制鳞翅目昆虫的功效正在接受检验。     

H3亚型猪流感病毒荧光定量PCR检测方法的建立

通过RT-PCR方法克隆了H3亚型猪流感病毒HA基因一段靶序列,构建重组质粒作为标准阳性模板.根据GenBank中的H3亚型猪流感病毒HA基因保守序列设计了用于FQ-PCR的1对引物和1条TaqMan探针.通过条件优化,以10倍系列稀释的质粒为标准品进行荧光定量PCR扩增,并制作标准曲线,建立了检测H3亚型猪流感的荧光定量PCR方法.结果表明,该方法检测灵敏度可达1.0×100拷贝/μL,线性范围为109～100,达10个数量级;对起始浓度为1.0×109、1.0×108、1.0×107拷贝/μL的标准品的最终实际测得值(Ct)分别为13.68,18.21和20.57;变异系数分别为0.31%、0.17%和0.12%,均小于5%,说明此方法具有良好的准确性和重现性.对阳性组织病料的检测表明,该方法的检测灵敏度高出常规PCR,与套式PCR具有相近的灵敏度.     

杆状病毒的生态学和流行病学研究进展

杆状病毒作为杀虫剂应用,已成为生物防治中不可缺少的环节,也是一类重要的生物防治因子,但杆状病毒相对低的毒力和较长的杀虫时间是制约其推广应用的原因之一.文中就杆状病毒与宿主的关系,杆状病毒在环境中的存活、滞留与扩散等方面的流行病学研究进展做一总结.     

开发建设项目新增水土流失的试验研究方法

针对开发建设项目的水土流失特点,以天然降雨、人工降雨、放水冲刷为主要试验手段,研究建立了分析预测新增水土流失量的方法,并将研究成果应用于典型区域开发建设项目新增水土流失量的分析之中,取得了较为满意的结果。文章介绍了具体研究方法。     

下垫面监测法的主要监测内容及关键时间节点控制

生产建设项目水土保持监测,因生产建设活动频繁而无法按照常规水土保持生态监测那样通过布设固定的监测小区来开展,目前普遍采用的间接类比小区监测代表性较差,很难准确反映生产建设项目水土流失变化规律。针对生产建设项目地面活动频繁,下垫面变化较快的特点,开展下垫面变化监测,首先要准确监测掌握下垫面的变化规律,再根据现有经验公式或间接类比小区观测数据计算水土流失的时空分布,实现监测的目的和意义,用真实的监测数据为生产建设项目水土保持工作的开展提供支撑。     

黄土高原地区淤地坝现状分析

淤地坝是黄土高原地区一种行之有效的水土保持工程措施，在拦泥保土、减少入黄泥沙、防洪减灾、淤地造田、巩固退耕还林(草)、保障生态安全、促进粮食生产和水资源合理利用及经济社会稳定发展等方面发挥了重要作用，是黄土高原水土流失综合治理的关键措施之一。近年来，黄土高原局部地区强降雨时有发生，极端天气有所增加，淤地坝安全运用问题，尤其是特殊条件下的个别工程损毁案例，引起了政府和社会各界的高度关注。结合实例，从管理、实践角度客观总结分析了淤地坝工程的积极作用和存在的风险隐患及量级，提出了加强淤地坝建设及运行管理的措施。     

抗猪红细胞膜抗原非凝集型单克隆抗体的研制及鉴定

以猪红细胞膜抗原免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤技术将免疫小鼠的脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,通过微孔板凝集试验及玻片凝集试验筛选可稳定分泌非凝集型mAb的杂交瘤细胞株,并用有限稀释法进行克隆.制备出一株可稳定分泌非凝集型抗体的杂交瘤细胞株1C2,其亚型为IgG1类,培养上清和腹水效价分别为1:1024和1:108,没有种属交叉血凝反应,为构建双特异性抗体奠定了基础.     

利用ISSR标记鉴别玉米品种的初步研究

采用CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)法从10个玉米品种种子胚中提取全基因组DNA,用正交实验法优化ISSR-PCR反应体系,筛选扩增条带清晰的引物,然后用所筛引物对10个玉米品种DNA扩增,分析其扩增带纹差异,找出能够鉴别10个玉米品种的合适引物。研究结果表明:①优化的ISSR-PCR反应参数为:1.5mmol/LMg2 、0.375mmol/LdNTP、0.5μmol/L引物、2.5UTaqDNA聚合酶;②从40条ISSR引物筛选出11条扩增条带清晰、多态性较高的引物,它们共扩增出101条条带;③利用引物UBC808能将10个供试玉米样品区分开。     

猪瘟病毒荧光定量PCR检测方法的建立

通过RT-PCR方法克隆了猪瘟病毒(CSFV) 5′端非编码区(UTR)的一段靶序列,构建重组质粒作为标准阳性模板.同时根据GenBank中的靶序列设计了用于FQ-PCR的一对引物和一条TaqMan探针.通过条件优化,以定量的10倍系列稀释的质粒为标准品进行荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立了CSFV检测的荧光定量PCR方法.结果表明,该方法检测灵敏度可达1.0×100拷贝/μL,线性范围为 109～100,达10个数量级;对起始浓度为1.0×109、1.0×108、1.0×107拷贝/μL的标准品的最终实际测得值(Ct)分别为19.73、22.95和26.24;变异系数分别为0.61%、1.77%和1.18%,均小于5%,说明此方法具有良好的准确性和重现性.对阳性组织病料的检测表明,该方法的检测灵敏度高出常规PCR,与套式PCR具有相近的灵敏度.     

利用Agilent 2100 Bioanalyzer检测食源致病性沙门氏菌

探讨Agilent 2100 Bioanalyzer芯片分析系统在检测食源致病性沙门氏菌的应用.根据致病性沙门氏菌的致病基因invA设计特异性引物扩增出致病性沙门氏菌特异性序列,然后分别用常规的琼脂糖电泳技术和Bioanalyzer对PCR产物进行检测,并比较两种检测方法的准确度、重复性和灵敏度.Bioanalyzer的准确度和重复性比琼脂糖凝胶电泳高,Bioanalyzer的准确度在95%以上,琼脂糖凝胶电泳仅为85%;Bioanalyzer的检测灵敏度也比琼脂糖凝胶电泳高.Bioanalyzer芯片分析系统结合PCR方法可对食源性致病菌进行特异、准确、稳定、灵敏的检测和鉴定,具有重要的推广价值.