典型草原退化群落恢复演替过程中双齿葱组织变化研究

本文将显微照相和地理信息系统的理论与方法相结合,应用于组织解剖学中。通过对内蒙古锡林郭勒盟典型草原不同退化研究样地双齿葱(A llium bidentatum)营养器官叶组织细胞变化的研究,揭示出草原植物小型化的内在机制。随着群落恢复演替的进程,3个群落样地中的双齿葱植株叶的解剖结构呈现出的变化趋势:(1)恢复时间越长,其组成器官的细胞数目越多;(2)从叶片的解剖结构来看,叶组织数目的减少导致了小型化。     

低氧胁迫对鲢线粒体ATP酶活性及F1-δ基因表达的影响

为研究线粒体ATP酶F₁-δ基因在鲢(Hypophthalmichthys molitrix)中的作用, 采用RACE-PCR技术克隆出该基因全长, 应用半定量RT-PCR法检测该基因在不同组织的表达, 应用实时荧光定量PCR法检测急性低氧胁迫过程中不同溶氧浓度下该基因的组织表达变化。结果显示, 鲢线粒体ATP酶F₁-δ基因全长762 bp, 开放阅读框480 bp, 编码159个氨基酸残基, 5′端非编码区114 bp, 3′端非编码区168 bp。鲢与斑马鱼(Danio rerio)线粒体F₁-δ编码氨基酸序列的相似性最高, 达到89%; 与大西洋鲑(Salmo salar)、罗非鱼(Oreochromis niloticus)、樱花钩吻鲑(Oncorhynchus masou formosanus)、红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)的相似性分别为76%、75%、74%、69%; 半定量RT-PCR结果显示, 该基因在鲢心脏、脑、肝、脾和肌肉中均有表达, 且心脏中最高, 肌肉次之; 实时荧光定量PCR结果表明, 水中溶解氧(DO)分别为5.6(对照组)、4.38、3.37、2.11、1.12和0.54 mg/L时, 随着溶解氧浓度的下降该基因在心脏中的表达逐渐下降且均显著低于对照组(P<0.05); 而在脑、肝、脾和肌肉中的表达则先升高后降低。寡霉素抑制法测得低氧胁迫过程中, 鲢心脏等组织中F₁F₀-ATP酶活性均先升高后降低。这表明鲢线粒体ATP酶F₁-δ基因在低氧胁迫中起到一定的作用, 并对ATP酶的合成产生影响。

     

神农香菊丛生芽的诱导及植株再生

以神农香菊茎段为外植体,研究植物生长调节剂及活性炭(AC)对神农香菊丛生芽诱导的影响,以建立神农香菊丛生芽诱导及植株再生的高频再生体系。结果表明,丛生芽诱导的最适培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA,最适增殖培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA+0.05 g/L AC,增殖系数为45.3,添加AC可有效促进玻璃化苗恢复;生根诱导的最适培养基为不添加任何生长调节剂的1/2MS,生根率高达100%;将生长良好的再生植株进行移栽,存活率可达100%。     

彭泽鲫Pcc-hira基因克隆、序列分析及时序表达（英文）

对雌核发育彭泽鲫(Carassius auratus var.Pengze,Pengze crucian carp,Pcc)中的Pcc-hira进行了克隆,序列分析,并对雌鱼9种组织和11个发育阶段中的表达进行了研究。结果显示,Pcc-hira CDS全长3028 bp,编码1009个氨基酸残基,具有7个典型WD40结构域,Pcc-HIRA与鲫HIRA具有99%的同源性,跟其他鲫属鱼具有较高的亲缘关系。Pcc-hira分别在孵化后36和44 d达到最高值和最低值,且在雌鱼脑中的含量极显著高于其他8种组织。     

黄颡鱼肌细胞生成素基因cDNA克隆及其在雌雄个体中的差异表达

为了探究黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)肌细胞生成素(Myogenin,MyoG)基因的组成结构、功能特性以及在雌雄个体组织中的表达差异,本研究利用RT-PCR和RACE技术克隆获得黄颡鱼MyoG基因1346 bp全长cDNA序列,其中序列包括63 bp的5′非翻译区、521 bp的3′非翻译区和762 bp的开放阅读框(ORF),ORF编码253个氨基酸。氨基酸序列包含MRFs基因家族的Basic结构域和螺旋–环–螺旋(HLH)结构域,不含信号肽,没有跨膜结构,定位于细胞核内。氨基酸序列与蓝鲇(Ictalurus furcatus)同源性高达94.1%,基于氨基酸序列构建的NJ进化树显示黄颡鱼MyoG基因与同属鲇科鱼类关系最近,表明MyoG基因在物种间比较保守。实时荧光定量PCR检测显示,MyoG基因在雌雄个体心脏、肌肉等8种组织中均有表达,但在肌肉中的表达量显著高于其他组织(P0.05),且在雄性中的表达量显著高于雌性(P0.05);Western blot检测MyoG蛋白在雄性肌肉中的表达量高于雌性,推测其可能是造成黄颡鱼雌雄生长差异的因素之一。本研究不仅为黄颡鱼雌雄生长差异和肌肉发育调控提供了研究基础,也为黄颡鱼快速生长新品种(系)选育提供理论参考。     

湖北省碎米荠属一新记录种——壶瓶碎米荠

<正>壶瓶碎米荠(Cardamine hupingshanensis K.M.Liu,L.B.Chen,H.F.Bai L.H.Liu)是白宏锋等人2008年发表的新种,特产于湖南省壶瓶山地区,湖北省没有记载。该植物最早于2000年5月被吴永尧等人发现于湖北省恩施州,并定名为恩施碎     

白花丹参的组织培养和植株再生

[目的]通过植物组织培养技术快速大量繁殖白花丹参优良品系,深度开发利用这一药用植物资源。[方法]以白花丹参的幼嫩叶片和叶柄作为外植体,接种至器官发生分化培养基上诱导丛生芽,然后作壮苗培养,继而生根培养,建立一套快速再生体系。[结果]在Ms＋6-BA2．0mg／L＋NAA1．0mg／L和MS＋6-BA2．0mg／L＋NAA0．5mg／L培养基上均能诱导分化大量丛生芽,然后转接至Ms＋KT1．5mg／L＋NAA0．2mg／L继代培养基上做继代、壮苗培养,消除玻璃化现象。选取健壮芽苗转接至1／2MS4-IBA0．2mg／I~培养基上生根培养．待试管苗上长出数条2cm长的健壮根系时即可炼苗移栽,成活率在90％以上。[结论]建立了一套完整的白花丹参组培再生体系。     

黑花生再生体系和遗传转化的初步研究

以黑花生品种黑霸920成熟种胚、幼叶和胚轴为外植体，对黑花生植株再生和遗传转化进行了研究。通过设置一系列不同浓度激素配比的培养基来优化各阶段培养条件，初步建立了高效的黑花生再生体系，即花生种子经75％乙醇表面消毒15min，MS＋6-BA2．0mg／L为最优化的种子萌发培养基，MS＋2，4-D2．0mg／L为最佳诱导愈伤培养基，幼叶为最佳诱导愈伤组织的外植体，MS＋6-BA8mg／L＋NAA0．5mg／L＋AgNO3 1mg／L为最佳分化培养基，MS＋NAA2．0mg／L＋6-BA0．2mg／L＋活性炭200mg／L为最佳生根培养基。同时确定了愈伤组织和幼苗的卡那霉素筛选压分别为30mg／L和300mg／L。利用农杆菌介导法将含有GUS基因和NPTⅡ基因的植物表达栽体pBI121导入花生组织，在对愈伤组织、幼叶和胚轴的GUS表达检测中均有蓝色斑块出现，证明GUS基因已成功转入到花生细胞中。     

湖北宜都斑点叉尾鮰微卫星遗传多样性分析

以湖北省宜都市的斑点叉尾鮰为研究对象,利用8个微卫星位点IpCG0033、IpCG0035、IpCG0040、IpCG0041、IpCG0043、IpCG0051、IpCG0054、IpCG0057的引物进行了遗传分析,统计分析了等位基因数、杂合度、平均多态信息含量等遗传参数,并检测了群体符合Hardy-Weinberg平衡的状况。结果显示:8个微卫星标记位点在群体中共检测到47个等位基因,观测等位基因数在3~8个,平均有效等位基因数为4.254 8个,群体观测杂合度为0.787 3,期望杂合度为0.728 2,平均多态信息含量(PIC)为0.692 0,达到高度多态(PIC>0.5),8个位点中有4个(IpCG0033、IpCG0041、IpCG0054、IpCG0057)处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05),另外4个处于不平衡状态(P<0.05)。结果表明我国湖北省宜都市养殖的斑点叉尾鮰目前仍具有较高的遗传多样性,遗传信息丰富,遗传变异大,可以作为良好的育种材料。     

神农架4个珙桐居群遗传多样性的RAPD分析

用随机扩增多态DNA（RAPD）技术对神农架地区4个居群28个珙桐（Davidia involucrate Baill.）个体进行了遗传多样性分析.16个10 bp寡核苷酸引物共检测到87个位点,多态位点49个,多态百分率56.3％,而居群平均多态位点百分率为30.2％.用POPGENE对数据进行了分析,结果显示:居群的平均Nei’s基因多样性为0.111 8,Shannon’s遗传多样性信息指数为0.165 1,总的居群基因多样性为0.169 2,基因分化系数为0.339 2.这表明神农架地区珙桐的遗传多样性较低,其遗传变异以居群内遗传变异为主.