猪瘟病毒Erns基因的克隆与序列分析

为了解山东地区猪瘟病毒的变异情况,将6份经RT-PCR方法鉴定为猪瘟病毒(CSFV)阳性的山东地区患病猪的病料接种PK-15细胞,分离得到6株猪瘟病毒.对该6株猪瘟病毒的Erns基因主要抗原编码区序列进行了RT-PCR扩增、克隆、测序,并经DNA Star软件对测序结果与HCLV疫苗株、Shimei株及Alfort株E...     

烟台部分地区奶牛隐孢子虫病调查

为了解奶牛隐孢子虫在烟台地区的流行情况,从烟台市的海阳、莱阳、牟平和招远4个地区6个奶牛场采集粪便样品565份,采用实时荧光定量聚合酶链反应法进行检测,分析奶牛隐孢子虫感染与腹泻、季节、年龄等方面的相关性.结果表明,隐孢子虫总感染率为10.44%(59/565),其中发生腹泻的奶牛隐孢子虫感染率为20.13(32/15...     

动物疫病风险分析的产生、演变和发展

动物疫病风险分析是研究动物疫病风险的产生、发展,对人与畜牧业危害,以及如何有效控制的一门新型学科,其主要作用是使动物卫生管理工作中的决策更具有科学性、透明性和客观性。本文对动物疫病风险分析的概念、演变过程及其在国际上的发展及应用情况进行综述,以期为我国动物疫病工作从应急治疗式管理向风险预警式管理转变提供借鉴。     

活性氧技术在畜禽养殖业中使用效果的研究进展

活性氧作为一种强氧化剂,具有广谱、高效、快速、安全、无二次污染的的消毒灭菌作用和特有的除臭、清洁空气的功效,国内外已逐步应用于工农业、医疗卫生的各个领域.活性氧技术及其在畜牧兽医领域的空气消毒、物品消毒、饮水消毒、饲料处理、污水和有害气体净化处理、种蛋消毒、冷藏库脱臭保鲜及畜禽舍中的应用进行综述,通过活性氧在畜牧业中的使用以及较高安全性评价旨在推广活性氧技术在畜牧兽医领域更好地应用,以促进畜禽的无公害养殖.     

水貂犬瘟热流行病学调查

为了调查山东省水貂犬瘟热的流行病学情况,对2010年8月－2012年8月期间由诸城、文登等地养貂场送诊的996份水貂病例进行了临床诊断和病原学检查。结果显示,共检出犬瘟热病毒阳性病料223份,阳性率为22.39%。其中,犬瘟热病毒与其他病原混合感染136例,占阳性病例的60.99%;阳性样本中未免疫病例116个;诸城检出阳性病例数最多,为147例;3月龄水貂发病率最高,占阳性病例的43.0%;水貂感染犬瘟热病毒主要症状为眼、鼻黏液性分泌物增多、脚垫增厚、呼吸困难;主要病理变化为肠、脑部出血。结果表明,犬瘟热依然是危害水貂养殖的重要疫病,且犬瘟热病毒易与其他病原混合感染;免疫接种能有效预防水貂犬瘟热,且宜在3月龄以前进行。     

HeLa细胞Ⅰ型干扰素效应因子实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用

本试验旨在建立一种用SYBR GreenⅠ荧光染料检测HeLa细胞Ⅰ型干扰素效应因子ISG15、ISG56、Mx1、OAS和PKR mRNA表达水平的实时荧光定量RT-PCR检测方法,并在口蹄疫病毒(FMDV)L蛋白抑制Ⅰ型IFN发挥效应的信号通路中进行初步应用。利用TRIzol法提取总RNA,经Oligo d(T)15进行反转录,利用PCR扩增各段目的基因,并克隆至pMD18-T载体,转化大肠杆菌DH5α,经鉴定为阳性的重组质粒作为标准品模板建立SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR标准曲线和熔解曲线,并进行灵敏性、特异性和重复性试验。根据建立的实时荧光定量RT-PCR方法,检测FMDV L蛋白对Ⅰ型IFN效应因子的抑制效果。HeLa细胞在转染FMDV L蛋白真核表达质粒,并受到Ⅰ型IFN刺激后ISG15、ISG56、Mx1、OAS和PKR的相对表达量较转染空载体或表达GST的真核表达质粒明显降低。本试验建立了HeLa细胞Ⅰ型IFN效应因子的实时荧光定量RT-PCR检测方法,为在mRNA水平上对HeLa细胞Ⅰ型IFN效应因子的定量分析奠定了基础,并成功地初步应用于FMDV L蛋白抑制Ⅰ型IFN发挥效应的信号通路的研究中。     

鸭瘟的病理组织学观察分析

鸭瘟( duck plague,DP)又名鸭病毒性肠炎(duck viralenteritis,DVE),是由鸭瘟病毒(duck plague virus,DPV)引起的鸭、鹅等水禽的一种急性、热性、败血性传染病.在我国有些地方俗称“大头瘟”.本病最早由Baudet (1923)报道在荷兰家鸭中暴发,随后1930年、1 942年、1952年和1959年多次暴发,但初期一些研究者误认为与鸡瘟有关,直到1942年Bos等通过进一步观察研究确证为一种新的独特的鸭病毒病,第一次提出鸭瘟的名称[1].     

副猪嗜血杆菌对小鼠的致病性探究及感染模型的建立

为研究副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)对昆明系(KM)小鼠的致病性,同时探索建立HPS的KM小鼠感染模型,应用血清4型(SD-05、ZC-7、ND-21)、5型(BD-1、HB-08、PZ-26)菌株对KM小鼠进行毒力测定,然后以2种血清型最适菌株的最适剂量,腹腔注射KM小鼠开展攻毒试验,观察临床症状及剖检变化,并对死亡小鼠进行细菌分离以及PCR鉴定。结果显示:血清4型SD-05株、血清5型HB-08株毒力较强,对KM小鼠最适接种剂量分别为1.2×10~9及1.175×10~9 CFU;攻毒后小鼠出现颤抖、萎靡厌食等临床症状,剖检可见肺脏出血、胸腔积液等病理变化,并在小鼠组织器官中成功分离出HPS菌株。结果表明,HPS血清4型、5型菌株对KM小鼠存在较强致病性,且初步认定KM小鼠可作为HPS感染动物模型。本研究为HPS致病性研究及小鼠感染模型建立奠定了应用基础。     

三株鸡源H4亚型禽流感病毒分离株HA基因的序列分析

RT-PCR扩增出3株鸡源H4亚型禽流感病毒(AIV)分离株(A/chicken/Anhui/AB22/2010；A/chicken/Anhui/AB29/2010；A/chicken/ Anhui/ AB30/2010)的血凝素(HA)基因,进行了分子克隆与测序,对测得的HA序列用DNA Star软件分析,并同NCB...     

PRRSV和PCV-2二重PCR检测方法的建立及初步应用

参考GenBank上已发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2基因序列和猪圆环病毒2型ORF1基因序列,分别设计并合成了可用于检测猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型的2对引物,扩增目的片段大小分别为421 bp和714 bp。在建立了用于检测猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型的单项PCR检测方法并优化单项PCR条件的基础上,建立了针对两种病毒的二重PCR检测方法。通过检测143份临床病料对二重PCR方法和单项PCR/RT-PCR方法进行了对比验证。结果显示,两者的总符合率在92.6%以上,表明该二重PCR检测方法可以用于临床病料的检测。