长牡蛎糖原磷酸化酶基因SNPs与生长性状和糖原含量的相关性分析

为研究糖原磷酸化酶基因多态性与长牡蛎(Crassostrea gigas)生长和糖原含量的相关性,本研究对长牡蛎糖原磷酸化酶基因(Cg-GPH)编码区单核苷酸多态性(SNPs)与来自5个家系322个长牡蛎个体的生长性状(包括壳高、壳长、壳宽、总体质量以及软体部质量)和糖原含量进行了关联分析.结果表明,在1940 bp的长牡蛎糖原磷酸化酶基因中共检测到82个SNPs位点,其中63个SNPs位点位于外显子区域,1个SNPs位点位于5′-UTR区,18个SNPs位点位于3′-UTR区,编码区SNPs平均密度为1/25 bp;5个SNPs位点与生长性状存在显著相关(P<0.05),未检测到与糖原含量相关SNPs.根据以上5个SNPs位点共构建得到6个SNP单倍型,其中,Cg-GPH基因的H6(CTGAT)单倍型在总体质量性状方面均显著高于其他5种单倍型(P<0.05),表明H6单倍型可能是对长牡蛎体质量增加最有利的单倍型.研究结果为今后长牡蛎生长性状的遗传改良提供了基础资料.     

三苯基锡对鲫稚鱼肌肉组织学的影响

三苯基锡(triphenyltin,TPT)和三丁基锡(tributyltin,TBT)在环境中经常同时存在.以淡水常见经济鱼类鲫(Carassius auratus)稚鱼为试验对象,研究不同水平TPT(10、100、1 000 ng/L)对其肌肉组织学的影响.结果表明,TPT暴露16d后引起鲫稚鱼肌肉组织损伤,主要表现为肌纤维间隙变宽、肌丝断裂与紊乱以及糖原代谢变化;100 ng/L TPT暴露组中,鲫的肌肉损伤最为严重,肌纤维直径较对照组显著降低,肌糖原出现显著累积现象;而1 000 ng/L TPT暴露组中,鲫的肌纤维直径较对照组则显著增加,糖原水平显著降低.     

野生一粒小麦糖原合成酶激酶基因TbGSK1的克隆与分析

根据普通小麦糖原合成酶激酶基因序列设计引物,以野生一粒小麦cDNA为模板,利用RT-PCR技术,扩增出野生一粒小麦糖原合成酶激酶基因的cDNA序列,克隆到T载体上并进行测序。结果显示,该基因全长1543bp,开放阅读框1068bp,编码一个由355个氨基酸组成的蛋白。Southern blot分析显示,其在野生一粒小麦基因组中为单拷贝基因。该基因与普通小麦、玉米、烟草、苜蓿、拟南芥等植物的糖原合成酶激酶基因序列同源性分别达到94.1%、91.3%、83.2%、81.5%、72.8%。     

花生黄曲霉抗性与糖原合成酶激酶-3的关系

前期研究证明糖原合成酶激酶(GSK3β)在花生黄曲霉敏感品种中上调表达.本研究对花生黄曲霉抗性品种和易感品种发育种子表达的GSK3进行了生物信息学和定量PCR的分析验证.结果表明,在抗性品系中,GSK3β基因在小果时期上调表达.由于GSK3β是油菜类甾醇信号传导的负调控因子,在细胞延长中起着抑制作用.因此推测GSK3β...     

高钒对雏鸡肝脏的影响

为探讨高钒对雏鸡肝脏生长、结构和几个重要酶活性的影响,选用1日龄AA肉鸡健雏420只,随机分为6组,每组70只,分别饲以对照日粮(钒0.073 mg/kg)和高钒日粮(钒5 mg/kg,高钒Ⅰ组;钒15 mg/kg,高钒Ⅱ组;钒30mg/kg,高钒Ⅲ组;钒45mg/kg,高钒Ⅳ组;钒60mg/kg,高钒Ⅴ组)共计6周,以实验病理学和生化试剂盒检测的方法观察研究雏鸡肝脏变化。结果显示,与对照组比较,高钒Ⅱ组肝脏质量在试验第2,3和4周显著降低,高钒Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组肝脏质量在整个试验期间显著降低,同时高钒Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组肝细胞出现颗粒变性和空泡变性;高钒Ⅳ、Ⅴ组ATP酶活性显著降低,而血清ALT、AST酶活性显著升高;高钒Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组血液葡萄糖和肝脏糖原含量减少。上述结果表明,日粮钒含量超过30mg/kg时可使雏鸡肝脏受损,肝功能降低。     

抗疲劳功能性食品复方添加剂作用机理研究

本实验对自行设计的抗疲劳功能性食品复方添加剂的作用机理进行了初步研究。结果表明 ,该添加剂可显著提高小鼠运动后糖原含量 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,增强血清LDH、全血SOD和GSH -PX 活性 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,降低血清MDA、BUN和血乳酸含量 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,提高小鼠胸腺指数和脾脏指数 (P <0 .0 5或P<0 .0 1)。据此分析认为 ,该添加剂可通过增强机体抗氧化能力 ,减少运动中糖原消耗、体蛋白动员和代谢产物积累发挥抗疲劳作用 ,还可能通过增强机体免疫机能起作用     

糖原贮积症Ⅴ型斑马鱼疾病模型的构建及其表型分析

建立肌型糖原磷酸化酶基因pygma和pygmb突变体斑马鱼疾病模型,对人类PYGM基因突变导致的糖原贮积症Ⅴ型(glycogen storage disease typeⅤ,GSDⅤ)的研究具有重要意义。利用CRISPR/Cas9技术成功敲除了斑马鱼pygma和pygmb基因,分别获得pygma^(-11bp-/-)和pygma^(+14bp-/-)两种纯合突变体,以及pygmb^(+1bp-/-)和pygmb^(-2bp-/-)两种纯合突变体。过碘酸希夫糖原染色(periodic acid Schiff stain)实验显示pygma^-/-和pygmb^-/-纯合突变体心脏和肌肉组织出现明显的糖原累积。对野生型斑马鱼15个早期发育时间点以及12个成鱼组织中pygma和pygmb基因表达分析显示,pygma和pygmb早期发育阶段表达模式相似,从24 hpf到125 hpf,两基因表达量总体呈上升趋势,且pygmb的上升幅度大于pygma的上升幅度。在检测的12个组织中,pygma和pygmb只在少数几个组织中有明显表达。pygma在肌肉组织中表达最高,其次为心脏和皮肤组织;pygmb在心脏、脑、眼睛3个组织中高表达,在肌肉组织中也有表达,但表达量相对较低。斑马鱼pygma^-/-和pygmb^-/-突变体具有GSDⅤ病肌肉糖原累积的典型特征,该疾病模型的建立为进一步研究糖原贮积症的发病进程、详细机制和药物筛选等治疗策略提供基础数据。     

不同储藏条件下杜洛克与长白猪肌肉pH、糖原、乳酸含量及TBA值比较

研究测定了杜洛克及长白猪屠宰后10 h、4℃冷藏6 d、-20℃冷冻5 d的肌肉p H、糖原、乳酸含量和TBA值（硫代巴比妥酸值）。结果表明,宰后10 h,宰后时间对杜洛克及长白猪肌肉p H、乳酸影响极显著,对糖原、TBA值影响不显著。猪种间比较,第3小时和第5小时的p H杜洛克分别比长白猪高4.37%（P〈0.01）和3.93%（P〈0.05）;第0.75小时、第2小时和第5~7小时的肌糖原含量杜洛克分别比长白猪高166.83%（P〈0.01）、120.59%（P〈0.01）、117.02%（P〈0.05）、154.31%（P〈0.01）、147.23%（P〈0.05）;宰后45 min、第2~4小时和第7~8小时的乳酸含量长白猪分别比相同时间点的杜洛克猪高37.99%（P〈0.05）、27.46%（P〈0.05）、68.90%（P〈0.01）、33.19%（P〈0.05）、52.97%（P〈0.01）和47.05%（P〈0.05）。4℃冷藏条件下,储存时间对杜洛克猪肌肉p H、糖原含量、乳酸含量和TBA值影响不显著,对滴水损失影响显著;对长白猪肌肉p H、糖原含量影响不显著,对滴水损失、乳酸含量和TBA值影响显著。4℃冷藏条件下储藏6 d,肌肉p H、糖原含量和TBA值品种间差异不显著;第48小时乳酸含量杜洛克比长白猪高25.10%（P〈0.05）;第24小时和第48小时滴水损失长白猪分别比杜洛克高160.96%（P〈0.05）和60.06%（P〈0.05）。-20℃冷冻条件下,储存时间对杜洛克猪肌肉p H影响显著,对解冻失水率、糖原、乳酸、TBA值影响不显著;对长白猪肌肉p H、解冻失水率、糖原及乳酸含量影响不显著,对TBA值影响显著。-20℃冷冻条件下储藏5 d,杜洛克和长白猪相同时间点的p H、糖原含量、TBA值差异不显著;第48小时乳酸含量杜洛克比长白猪高23.71%（P〈0.05）,第120小时乳酸含量长白猪比杜洛克高10.78%（P〈0.05）;第24小时和第72小时解冻失水率长白猪分别比杜洛克高186.85%（P〈0.05）和127.20%（P〈0.05）。     

毛地黄甙对钉螺生理生化的影响

本实验研究了毛地黄强心甙对钉螺糖原和总蛋白含量的影响:大于0.8g/L毛地黄强心甙能够显著降低钉螺体内的糖原含量,减少幅度从10.69%到74.94%;毛地黄强心甙也能够在一定程度上降低钉螺体内的蛋白质含量(从5.79%到14.22%),但减少量不及糖原显著;灭螺植物对钉螺的致死作用可能更多与钉螺组织细胞中的能量代谢有关.     

小麦糖原合成酶激酶(TaGSK1)的亚细胞定位及其功能鉴定

【目的】对小麦糖原合成酶激酶（TaGSK1）进行亚细胞水平定位以及功能鉴定。【方法】构建Tagsk1-gfp融合基因表达载体并转化拟南芥，以仅携带gfp基因的拟南芥作为对照，利用共聚焦显微镜观察绿色荧光蛋白在转基因植株根部细胞的分布；利用含不同浓度NaCl的MS培养基对携带有融合基因的拟南芥和Columbia型拟南芥进行耐盐性鉴定，观察主根生长量和侧根生长数目。【结果】发现TaGSK1存在于细胞质内，且该激酶在根尖分生组织和与侧根发生有关的中柱鞘细胞中分布较多；耐盐性鉴定结果表明，转Tagsk1-gfp融合基因的植株的平均主根生长量和侧根生长数目与Columbia型拟南芥植株的差异均达到极显著水平（P<0.01）。【结论】TaGSK1定位于细胞质内，该激酶具有促进细胞分裂及提高转基因拟南芥抗渗透、抗胁迫的能力。