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101.
102.
旨在对山羊脂肪酸转运蛋白2(fatty acid transport protein 2,FATP2)基因进行克隆及生物信息学分析,检测FATP2基因在山羊不同组织中的表达差异,并进一步揭示干扰FATP2基因对山羊肌内前体脂肪细胞脂质代谢的影响。本试验以10月龄健康简州大耳羊(n=12)为试验动物。采用RT-PCR法扩增并克隆山羊FATP2基因,进行序列对比、系统发育树构建及生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR检测FATP2基因在山羊不同组织中及在山羊肌内前体脂肪细胞不同分化时期的相对表达水平,合成SI-RNA干扰序列并转染至山羊肌内前体脂肪细胞;使用RT-qPCR检测FATP2干扰效率及脂质代谢相关基因的表达情况;通过Bodipy染色法观察干扰FATP2对脂滴形成的影响,利用GPO-Trinder酶学反应检测甘油三酯含量。结果显示,获得山羊FATP2基因序列全长2 335 bp, CDS区1 863 bp, 5′UTR 188 bp, 3′UTR 284 bp;共编码621个氨基酸,山羊FATP2基因在肝脏表达量最高;RT-qPCR检测结果显示,FATP2表达在细胞中被显著干扰;B... 相似文献
103.
以表现顶枯症状的11个辣椒病株的dsRNA为模板,用蚕豆病毒属(Fabavirus)的兼并引物Fab5_R1F和Fab5~R1R进行PCR扩增,其中10个病株扩增到长约400bp的预期大小的片段.选取其中代表病株XJP1—1的PCR产物进行克隆、测序,得到389nts的序列片段。基因库检索表明,该片段为蚕豆萎蔫病毒2号(BBWV2)基因组RNA的片段。说明经PCR检测,具有400bp片段的10个田间病株均有BBWV2侵染.将基因库中已登陆的BBWV2的RNA,核苷酸序列进行序列比对,然后根据RNA,的序列保守区设计引物R2F-1F和R2F-1R,以病株的总RNA为模板.对分离物XJP1—1进行RNA,组分的克隆、测序,获得1302nts的RNA,序列,序列比较显示.该序列与新疆侵染加工番茄的分离物XJ14—1具有最高的序列同源性,为88.9%。 相似文献
104.
<正>猪呼吸繁殖障碍综合征(PRRS),又称蓝耳病,是影响养猪生产的主要问题。主要造成的临床表现包括繁殖障碍和呼吸道疾病,其中大部分经济损失来源于断奶后猪群(断奶仔猪消瘦综合征)。生长育肥猪的临床症状包括厌食、精神沉郁、喜卧扎堆、皮肤发红、呼吸困难、高热、眼病严重、顽固性腹泻、死亡率增加和日增重降低等等。其病原是猪呼吸繁殖障碍综合征病毒(PRRSV)。该病毒是具有囊膜的RNA病毒,属动脉炎病毒科。 相似文献
105.
<正>草鱼出血病是鱼种培育阶段一种流行地区广泛、流行季节长、发病率高、死亡率高、危害性大的病毒性鱼病。病原体是两种病毒颗粒,一种是呼肠孤病毒(双股RNA病毒),另一种是20~30nm大小的病毒(单股RNA病毒)。该病主要流行于长江流域和珠 相似文献
106.
剑麻不同组织RNA提取方法比较分析 总被引:6,自引:0,他引:6
本研究以剑麻茎尖、花和成熟叶片为材料,比较了SDSⅠ、SDSⅡ、CTABⅠ、CTABⅡ共4种提取缓冲液组成以及Promega公司RNA提取试剂盒、Qiagen植物RNA分离试剂盒、改良Trizol法、改良SDSⅠ法、改良CTABⅠ法以及优化后的改良CTABⅠ法等6种RNA提取方法提取RNA的效果,结果表明:不同缓冲液组成对实验结果影响很大,其中缓冲液CTABⅠ提取的RNA质量和产率均较理想。6种RNA提取方法提取的RNA差异明显,其中优化后的改良CTABⅠ法可同时适合于剑麻茎尖、花和成熟叶片RNA的提取,不仅产率高,而且RNA的质量也较好,无DNA污染,OD260/OD280分别为1.87、2.04和1.98,OD260/OD230分别为2.46、2.10和2.15,产率分别为84.7μg/gFW、65.8μg/gFW和4μg/gFW。用该方法提取的RNA可满足下一步文库构建及基因克隆等分子生物学研究。 相似文献
107.
108.
109.
RNA干扰技术在蜱研究中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
蜱是仅次于蚊子的第二大疾病传播媒介,分布广泛,对人和动物的健康危害严重。RNA干扰技术已经成功应用于新秀丽小杆线虫、黑腹果蝇、真菌及哺乳动物等方面的研究。本文就蜱体内RNA干扰的机理,RNA干扰方法以及在鉴定蜱基因功能、疫苗抗原筛选以及蜱与蜱传病原体的相互作用研究上的应用进行综述分析,探讨存在的问题和进一步应用前景。 相似文献
110.
<正>猪蓝耳病病毒(PRRSV)为单股正链RNA病毒,属套式病毒目、动脉炎病毒科、动脉炎病毒属。不凝集鸡、其他哺乳动物和人的O型红细胞。有严格的宿主专一性,对巨噬细胞有专嗜性。病毒的增殖具有抗体依赖性增强作用,且在中和抗体水平存在的情况下,在细胞上的复制能力反而得到增强。该病毒在外界环境中的抵抗力相对较弱,对高温敏感。 相似文献