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【目的】制备拟南芥PRL1蛋白的多克隆抗体,并检测PRL1在拟南芥真叶中的积累情况。【方法】扩增拟南芥PRL1基因的CDS序列,将其克隆至原核表达载体pET-28a中,转化到BL21(DE3)表达菌,经IPTG诱导后,对诱导产生的PRL1重组蛋白进行镍柱亲和纯化。将制备的PRL1重组蛋白通过皮下注射免疫家兔,从抗血清中分离、纯化PRL1抗体。扩增拟南芥PRL1基因的启动子序列及其基因组DNA序列,将其克隆至植物表达载体pBI111L中,再转化到农杆菌GV3101中,利用农杆菌侵染法构建prl1回复株系。利用纯化的抗体检测PRL1在野生型、prl1点突变体、PRL1T-DNA插入突变体和prl1转基因回复系中蛋白积累量的差异。【结果】克隆了PRL1基因的CDS序列,成功构建了pET-28a-PRL1原核表达载体,实现了PRL1重组蛋白在大肠杆菌中的表达(包涵体)。克隆了PRL1基因的启动子序列及其基因组DNA序列,成功构建了pBI111L-PPRL1-Strep-gPRL1植物表达载体及prl1回复株系。制备获得了PRL1重组蛋白的多克隆抗体,用该抗体能够有效地在拟南芥样品中检测出一条分子质量约为54ku的蛋白,该蛋白在prl1点突变体中表达量下降,在PRL1T-DNA插入突变体中缺失,而在prl1回复株系中表达量升高,并且在分裂旺盛的幼嫩组织中PRL1积累量较高。【结论】成功制备了PRL1蛋白的多克隆抗体,可用于拟南芥中PRL1蛋白含量的检测。 相似文献
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试验旨在为西畴乌骨鸡和文山土鸡的种质保护及认定、人工养殖、饲养管理及疾病防治等提供数据资料。选择成年健康笼养西畴乌骨鸡、笼养文山土鸡各20只(均为公、母各半),测定15项血液生理、生化指标。结果显示:雄性文山土鸡与西畴乌骨鸡的红细胞参数[包括红细胞数(RBC)、血红蛋白(HGB)、血细胞比容(HCT)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)]、白细胞参数[包括白细胞数(WBC)、单核细胞数(Mon)、中性粒细胞数(Gran)]、尿酸(UA)含量均极显著高于雌性(P<0.01),雌性文山土鸡与西畴乌骨鸡血液白蛋白(ALB)含量均显著高于雄性(P<0.05)。西畴乌骨鸡WBC极显著高于文山土鸡(P<0.01),雌性西畴乌骨鸡血液葡萄糖(GLU)含量显著高于文山土鸡雌性(P<0.05)。研究表明,根据西畴乌骨鸡与文山土鸡在同品种不同性别以及不同品种间存在的数据差异,应进一步建立基因水平上的差异分析,加强对西畴乌骨鸡与文山土鸡优良性状的筛选及畜禽资源的保护。 相似文献
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以德景天为试验材料,采用水培方式进行盐胁迫,研究其在盐胁迫下及施加过氧化氢(H_2O_2)和苯甲酸钠(C_6H_5CO_2Na)处理盐胁迫下的超微弱发光(UWL)和活性氧的变化及二者之间的关系。结果表明:在盐胁迫及活性氧调控盐胁迫德景天过程中,NaCl处理和施加H_2O_2处理盐胁迫,使活性氧水平上升积累,分别高于对照和NaCl对照,施加苯甲酸钠处理盐胁迫,缓解了活性氧水平上升积累,使活性氧水平低于对照。UWL与MDA、O_2~·和相对电导率均呈显著负相关。以上结果表明,盐胁迫及活性氧调控盐胁迫下德景天的UWL并没有随着活性氧的积累而上升,反而呈下降趋势,有可能活性氧是UWL的来源之一。 相似文献
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用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)分析和比较不同产地扶芳藤挥发油的化学成分。结果表明,广西南宁宾阳县产扶芳藤分离出25个色谱峰,鉴定出13种化学成分,占挥发油总量的98.24%。广西柳州融安县产扶芳藤分离出29个色谱峰,鉴定出14种化学成分,占挥发油总量的89.96%。广西梧州蒙山县产老扶芳藤分离出32个色谱峰,鉴定出12种化学成分,占挥发油总量的92.16%,广西玉林容县产老扶芳藤分离出28个色谱峰,鉴定出11种化学成分,占挥发油总量的84.79%。4个产地扶芳藤挥发油化学成分中,有5种成分是它们的共有成分,分别是叶绿醇、棕榈酸、壬烷、异丙苯、六氢法尼基丙酮,可见不同产地挥发油的主要成分存在差异。该方法结果准确可靠,为合理利用扶芳藤植物资源及其深度研究开发提供了试验依据。 相似文献
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以吉林市大石门沟森林公园次生林为试验地点,采用SBE法,经过相关分析、回归模型的构建、分层清灌法(对林内景观分层次剪除林下灌木高于180、90、30~60cm以上部分的方法)处理样方。结果表明:清灌组的美景度随着林内的层次结构的加强而升高;随着灌木株高的升高而降低;清灌能明显提高次生林林内景观的美景度;随着纵向清灌强度的增大林内景观美景度提高;原有林内景观美景度均值为47.8,当灌木高于180cm以上部分被剪除后林内景观美景度均值提高到66.6;当灌木高于90cm以上部分被剪除后林内美景度均值达69.7;当灌木高于30~60cm以上部分被剪除以后美景度达到最高值为84.6。 相似文献
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总结归纳了自理老人的生理特征、心理特征、情感需求和消费模式,并对市场上适老家具的种类、材质、风格、色彩、功能进行调研分析。在需求层次理论基础上提出了自理老人需求理论,根据此理论框架给出适老家具设计方法,以匹配自理老人需求。最后针对市场上适老家具产品存在的问题提出改良方法。该研究较为全面地反映了适老家具设计需关注的问题,对适老家具行业具有参考意义。 相似文献