应用抑制性消减杂交技术从枳中筛选根特异表达基因

为筛选分离植物根组织特异表达基因,以枳根RNA为试验组,叶RNA为驱动组,构建了枳根消减文库。从该消减文库中共获得有效序列1 177个,其片段长度主要分布在200 ~ 500 bp;序列拼接后得到455个非重复序列,其中245个与已知基因匹配,具有结合功能、催化活性和转运活性等生物学功能,可参与植物的代谢、细胞生长、个体发育、应激反应等生物学过程。实时定量PCR检测结果显示这些基因中的主要乳液蛋白、早期结瘤素样蛋白和贝壳杉烯酸氧化酶等基因在根中高表达。     

一种快速微量提取柑橘早期胚基因组DNA的方法（英文）

[目的]建立一种快速微量提取柑橘基因组DNA的方法。[方法]采用优化的CTAB微量提取法,以20.0,10.0,5.0,2.5mg的早期杂种胚为材料进行基因组DNA的提取,并对其DNA进行质量检测和SSR验证。[结果]该方法简单易行,所需材料少,提取的DNA纯度较高,OD260nm/OD280nm在1.800～2.000,可满足SSR等以PCR扩增为基础的试验需要。[结论]建立的方法可以用于快速微量提取柑橘基因组DNA。     

中国农业科学院柑桔研究所柑桔生物技术研究进展

<正>植物生物技术是一门新兴的跨学科的应用技术学科,主要包括基因工程、细胞工程、酶工程、微生物工程和生物化学工程等五个方面,其中,基因工程和细胞工程为生物工程的核心内容。中国农业科学院柑桔研究所(以下简称柑桔所)1970年组建     

74-1矮化枳的离体快速繁殖

矮化密植集约化栽培,可以充分利田地力并促进果园早期丰产,而大量采用矮化砧木又是达到矮化密植的主要途径之一。枳是优良砧木,但不一定都表现矮化。我所品种资源室选出的74-1矮化枳,种子小,只有普通枳的1/3。为了提高发芽率,扩大繁殖系数、满足对良种矮化枳砧的需要,我们进行了本试验,旨在探讨74-1矮化枳的离体快速繁殖方法。     

柳橙胚愈伤组织耐盐性研究

柳橙(Cirtus sinensis Osbeck)胚细胞无性系(L76-Ⅰ细胞系)的生长量随培养基中NaCl浓度的升高而降低。0.5％NaCl时,生长量约为对照的50％。耐盐临界浓度为2％。巨型细胞数量与NaCl浓度呈负相关。L76—Ⅰ细胞系外渗液电导率与NaCl浓度呈显著负相关。NaCl造成细胞内Na~+积累,K~+、Ca~(2+)、Mg~(2+)、Mn~(2+)、Zn~(2+)含量减少,并对过氧化物酶同工酶酶谱产生明显的影响;过氧化物酶活性受到抑制,且随NaCl浓度升高,活性相应下降。蛋白质氨基酸分析表明,NaCl对其种类几乎没有影响,8种主要蛋白质氨基酸含量与NaCl浓度呈负相关。过氧化物酶活性和几种主要的蛋白质氨基酸含量可作为抗盐细胞系筛选和评价的生理生化指标。试验所得L86—Ⅱ细胞系的耐盐性比L76—Ⅰ细胞系高。     

居民地分布与地理气候因子的相关性定量化研究——Poisson对数线性模型

研究居民地分布和地理气候条件的关系是一个比较有意义的课题,已经有很多文章对居民地分布和地理气候因子之间的关系做过研究.本文以全国地理因子库和居民地图斑数据库为基础,利用Poisson对数线性模型方法对地理因子与点状居民地进行了建模分析,得到了地理因子对图斑居民地数目影响的定量化结果,所得结果与定性分析结果一致.     

柳橙胚胚性愈伤组织辐照效应的研究

长期继代培养的胚性愈伤组织产生的体细胞胚与合子胚的起源一样,来源于单细胞,所分化的植株是没有嵌合性的。另外能提供遗传性一致且容易处理的较大群体数,不受季节和植物发育阶段的限制,任何时候都可以进行试验,给研究工作提供了很多方便。这是突变育种所需要的一种理想试材。然而要利用这一胚性细胞无性系进行辐射诱变,首先必须研究其辐射敏感性问题,找出致死和半致死剂量,为辐射诱变提供依据。     

转抗菌肽基因的柑桔遗传转化研究

柑桔是我国最重要的果树树种之一,绝大部分产区流行的柑桔溃疡病给柑桔业带来巨大的损失。柞蚕抗菌肽具有广谱杀菌能力,我们的预备试验表明,它对柑桔溃疡病病原菌Xanthomonas campestris pv.Citri有很强的抑菌效应,本文报道以柞蚕抗菌肽基因转化柑桔的一些结果。     

抗菌肽Shiva A基因在转基因柑橘无性繁殖后代中的遗传与表达分析

为进一步明确外源基因在转基因柑橘无性繁殖后代中的遗传稳定性及目标性状表现,本研究以转双价抗菌肽基因(ShivaA-cecropinB)纽荷尔脐橙(Citrus Sinensis Osbeck)无性繁殖后代植株为材料,通过PCR扩增,Southern杂交和实时定量PCR检测,以及温室抗病性评价分析等,对抗菌肽ShivaA基因在转基因柑橘后代株系中的遗传稳定性进行了研究.结果表明,外源抗菌肽Shiva A基因在转基因及其无性后代中能够稳定整合与表达.Southern杂交分析表明,ShivaA基因在无性繁殖后代基因组中为1个拷贝,而在T0代中为2个拷贝,由此推测T0代植株为混合嵌合体.定量PCR分析表明,ShivaA基因在To代中的表达水平低于其无性繁殖后代.本研究中外源基因的表达与拷贝数的多少成负相关.研究结果为开展转基因柑橘安全性评价提供了有用的实验材料,积累了有效的实验数据.     

贵州部分柑橘地方品种遗传背景的SSR分析

利用SSR分子标记技术对5个贵州柑橘地方品种的遗传背景进行分析.结果表明,24对SSR引物在5个地方品种和参与DNA指纹比对的14个栽培品种中共检测到92个等位基因,每个位点的等位基因数变幅为2~7个,平均为3.8个;多态性信息含量(PIC)变化范围在0.36~0.78之间,平均为0.49.经过DNA指纹比对,发现其中5对引物扩增的8条特征谱带可作为地方品种鉴别的参考性标记.利用NTSYS软件进行相似性系数计算,采用UPGMA法聚类,结果显示,相似性系数为0.80,可将5个地方品种划分在不同的亚组中;地方品种米柑和牛肉红金橘均单独成组,其遗传背景独特;土柑与皱皮柑的亲缘关系较近;大果型冰糖橙与冰糖橙的遗传背景相同;红香柚与强德勒柚的遗传背景基本一致.