美国白蛾基因组DNA提取及RAPD反应条件优化

用改进的SDS法从无水乙醇浸泡美国白蛾幼虫标本中提取到高分子量的可用于RAPD扩增的基因组DNA。用正交试验对影响RAPD扩增的条件进行优化得到最佳反应体系：20 μL反应体系中,模板浓度1.25 ng/μL、引物浓度1.2 ng/μL、dNTP浓度 0.2 mmol/L、Mg2+浓度 3.0 mmol/L、TaqDNA聚合酶用量2.5 U。确定最佳退火温度为38 ℃。PCR反应条件：94 ℃ 30 s、38 ℃ 60 s、72 ℃ 60 s 35个循环后,72 ℃延伸5 min。为在分子水平上讨论美国白蛾种群的遗传分化提供基础。     

大豆乙醇酸氧化酶基因的克隆、表达和酶学活性分析

利用RT-PCR技术,从大豆叶片总RNA中扩增了乙醇酸氧化酶(GO)基因的cDNA序列,克隆到pMD19-T simple上,进行测序,然后将乙醇酸氧化酶的cDNA克隆至原核表达载体pRSET-A上,转化E.coli BL21,并对该基因在E.coli中的表达进行了研究。     

以培养专业应用型人才为宗旨的生物工程专业建设改革探索

以培养专业应用型人才为导向,培养具有科学研究能力和创新能力的专业人才,适应社会和行业要求,沈阳农业大学生物工程专业不断进行建设和调整,探索建立适合理论和实用并重的特色专业。     

绿色木霉β-葡萄糖苷酶的重组表达及进一步纯化

β-葡萄糖苷酶在食品风味物质形成和生物活性物质转化中发挥重要作用。以纤维素酶工业生产菌株绿色木霉Sn-9106的总RNA为模板,采用RT-PCR技术获得大小为2235bp的cDNA片段,该序列与GenBank中的U09580.1β-葡萄糖苷酶序列相比,氨基酸序列同源性达99%。经大肠杆菌原核表达,β-葡萄糖苷酶的活力达到20.3U/mg,为β-葡萄糖苷酶制剂大规模生产及在食品工业中的应用提供了理论依据。     

紫花地丁自然种群生物量生殖分配研究

从构件水平研究紫花地丁种群各构件数量特征和营养构件生物量分配格局之间相关性及生殖分配格局与营养构件之间的相关性。结果显示生殖分配与叶生物量分配呈明显的正相关,与地下部分生物量分配和植株总生物量呈明显的负相关。     

生防木霉菌对嘧霉胺抗药性变异及其相关蛋白诱导

选育对杀菌剂具有抗性的生防菌株是生物防治研究的重要内容之一.通过药剂选择培养基及紫外光诱导获得对嘧霉胺具抗性的突变体KTm-1、KTm-2.研究结果显示,与亲本菌株相比,抗性突变体的耐药性提高20倍以上.抗性菌株在无药培养基上连续转代8次,耐药性未见下降.活体拮抗测定表明,耐药菌株的抑菌能力略高于亲本菌株.PAGE显示抗性突变体KTm-1的可溶性蛋白谱带比其亲本菌株多4条,其中Rf=0.64的蛋白谱带是两个耐药菌株的特异性谱带,可视其为耐药相关蛋白.经Sephadex G-100柱层析纯化,SDS-PAGE测定耐药蛋白分子量为44.1KDa.     

抗生素在基因工程药物生产中的应用

基因工程药物在目前医药市场所占的比例越来越大。在基因工程药物生产的过程中,抗生素在某些环节起到了不可或缺的作用。本文就抗生素在基因工程药物生产中的应用进行总结。     

野大麦CIPK基因的亚细胞定位

为明确野大麦CIPK基因在植物亚细胞水平上的定位情况,以已知细胞质膜定位的拟南芥AtCBL1基因和液泡膜定位的AtCBL3基因作为参照,构建了这两个基因分别与红色荧光蛋白基因（RFP）融合的植物表达载体（参照载体）,以及野大麦CIPK基因与绿色荧光蛋白基因（GFP）融合的植物表达载体（目标载体）,利用基因枪转化法将参照载体和目标载体共转化洋葱上表皮细胞,瞬时表达后利用激光共聚焦显微镜进行共定位分析。结果表明,该基因主要定位于细胞膜和细胞核,为进一步深入分析该基因的功能提供了重要依据。     

藻胆蛋白提取方法研究进展

藻胆蛋白（Phycobiliprotein）是红藻和蓝藻特有的捕光色素蛋白，包括藻红蛋白、藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白3类。藻胆蛋白本身为亮丽的天蓝色，在蓝紫光激发下能发出强烈的荧光，它含有人体必需的氨基酸，因此，藻胆蛋白用途极为广泛，既可以作为天然色素应用于食品、化妆品、染料等工业，又可制成荧光试剂，用于临床医学诊断和免疫化学等研究领域中，同时还是一种重要的生理活性物质，可制成保健品及药品等。     

植物基因靶向整合技术研究进展

基因打靶作为反向遗传学的基础工具,可以对基因进行精确修饰或替换,从而改变生物的遗传特性。然而将基因打靶应用于高等植物方面的研究中却存在着打靶效率过低的问题。讨论了目前几种对植物基因打靶有效的试验方法包括转RAD54基因、锌指核酸酶(ZFN)以及正负筛选的方法。这些方法将使基因打靶应用在植物中成为可能。