产酶溶杆菌OH11双精氨酸转运系统关键基因tatC的功能分析

本研究采用同源重组的方法对产酶溶杆菌Lysobacterenzymogenes OH11中双精氨酸转运系统关键基因tatC进行缺失突变,通过对突变体表型及表型相关基因表达分析来研究该基因在菌株OH11中的功能,重点分析该基因与产酶溶杆菌中热稳定抗真菌因子HSAF生物合成的关系。研究结果表明,基因tatC的突变显著提高了HSAF生物合成的产量,以及HSAF生物合成的关键基因pks／nrps转录水平;改变了菌株OHll的细胞形态,使细胞从棍棒状变为椭圆状;并降低了菌株OH11生物膜的形成和滑动能力以及在营养缺陷型（10％TSB）培养基中的生长速率,但不改变其在营养丰富培养基（100％TSB）中的生长速率。此外,与野生型OH11相比,基因tatC突变株不改变其蛋白酶、纤维素酶、β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶的产生水平以及其对瓜果腐霉Pythiumapanidermamm、立枯丝核菌Rhizoctoniasolani和禾谷镰刀菌Fusariumgraminearum的拮抗能力。     

水稻白叶枯病菌tatB基因的克隆及功能分析

根据水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)PXO99的tatB基因序列设计引物,采用PCR方法从PXO99中克隆了tatB基因,命名为tatBXoo。通过同源重组的方法,构建了tatBXoo的插入突变株TBM,在含有X-gluc的抗性平板上筛选,并经Southern blot杂交验证确认。表型测定结果表明:与野生型相比,tatB突变株在水稻(寄主)上的致病性减弱,但在烟草(非寄主)上仍具有引起过敏反应的能力;tatB突变导致Xoo致病相关的重要表型如胞外多糖减少,游动性及趋化性减弱。但是,tatB突变不影响Xoo在基本培养基(MMX)中正常生长、胞外纤维素酶产生和生物膜形成。     

强化企业执行力构筑安全生产基石

执行力是指企业内部员工贯彻企业战略决策、发展目标、工作思路的操作能力和实践能力。企业运营管理战略的决定因素不是战略本身而是其执行程度，因为再好的战略也无法自动实施。执行力对企业来说，意味着生命力，对供电企业的安全生产来说，意味着安全生产管理的实效。落实各级人员安全生产责任，提高安全生产管理水平，保证安全生产工作有序进行，最重要的是必须提高安全生产的执行力。     

苏北杨树新造林地溃疡病防治技术初探

采用多菌灵、咪鲜胺、十三吗啉、戊唑酮、百菌清等5种药剂对杨树新造林地溃疡病的病原菌——杜仲生拟茎点霉菌进行室内药效测定,结果咪鲜胺锰盐和多菌灵对病菌菌丝都有较好的抑制效果,同一种药剂对病原菌的抑制作用随供试药剂配比度增大而增强。在野外田间防治试验中,采用退菌特、咪鲜胺、福美双、多菌灵等4种药剂进行防治试验,结果表明,咪鲜胺、福美双、多菌灵对杜仲生拟茎点霉菌均有较好的防效,其防治效果分别为94．1％,94．1％,88．2％,退菌特防治效果较差,为58．8％。     

N-酰基高丝氨酸内酯降解酶的抗体制备与鉴定

根据已报道的aiiA基因及attM基因序列设计引物,分别从蜡质芽孢杆菌(Bacillus cereus)和土壤根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)中PCR扩增获得aiiA基因及attM基因,构建蛋白表达载体pET30a-aiiA及pET30a-attM,在大肠杆菌BL21中诱导表达.利用AiiA解酯酶蛋白和AttM解酯酶蛋白在SDS-PAGE中对应的产物直接成兔免疫,提取血清进行ELISA和Western Blot检测.SDS-PAGE检测发现aiiA基因及attM基因能高效表达AiiA解酯酶蛋白和AttM解酯酶蛋白.ELISA检测结果表明,抗体含量高,稀释106倍依然为有效值.Western Blot 检测结果表明抗体可特异性结合目的蛋白.应用检测结果表明抗体血清能检测到N-酰基高丝氨酸内酯降解酶相关基因的产物,在验证群体感应和群体淬灭等方面将具有应用价值.     

荧光假单胞菌7-14flhA基因的克隆与功能的初步分析

为了探索flhA基因在荧光假单胞菌7-14(Pf7-14)鞭毛合成的作用,以铜绿假单胞菌UCBPP-PA14的鞭毛蛋白FlhA(NC_008463.1)为诱饵,在荧光假单胞菌Pf-5(NC_004129)、Pf0-1(NC_007492)和SBW25(NC_012660)的伞基因组中进行BLASTP比对分析,结果在Pf-5、Pf0-1和SBW25的全基因组搜索到flhA的同系物,分别命名为flhAPf-5、flhAPf0-1,和flhASBW25.根据三者的核酸序列,设计简并引物flhA-F/flhA-R,以荧光假单胞菌7-14(Pf7-14)基凶组DNA为模板进行PCR扩增,并对得到的片段测序比对,发现该片段2 130 bp为一完整的开放阅读框,命名为flhAPf7-14.flhAPf7-14在氨基酸水平上与flhAPf-5和flhAPf0-1的同源性分别达到93%和94%.Southern杂交证明flhA 在Pf7-14基因组中为单一拷贝.通过同源重组单交换的方式构建了Pf7-14flhA基因插入失活突变株,结果表明flhA突变体缺失了鞭毛装置并丧失了游动性,而互补菌株则恢复了鞭毛合成能力和游动能力.本研究为今后进一步研究Pf7-14鞭毛合成、菌体游动性与该菌定殖能力及生防能力的关系奠定基础.     

苏北杨树新造林地溃疡病病原菌的鉴定

2001年以来,苏北地区每年春季杨树新造林发生大面积死亡,在死亡或濒临死亡的杨树枝干上,几乎都有溃疡病症状的病斑发生。本试验通过对杨树新造林地(I-72杨)溃疡病病组织的分离、纯化培养获得10余株菌株,经接种、发病后再分离,获得6株拟茎点霉菌株;进一步克隆并分析供试菌株核糖体DNA-ITS区域的序列,结果是分离菌株与GenBank中Phomopsis eucommiicola的ITS序列有同源性,相似性达到99%。因此将该拟茎点霉菌确定为Phomopsis eucommiicolaC.Q.Chang,Z.D.JiangP.K.Chi,。该病原菌侵染杨树引起杨树新造林木溃疡病是首次报道。     

苏北杨树新造林地溃疡病发生规律观察

杨树新造林地溃疡病的发生时间为冬末初春,一般在2月底或3月初,4~5月为发病高峰期,秋季较少有病斑出现。杨树新造林地溃疡病的发生与气候条件、育苗技术、造林技术等密切相关。在春旱、夏旱、暖冬等气候异常年份、育苗密度过大、施氮肥过多过晚、造林技术不规范等情况下,杨树新造林地溃疡病发生严重,造林成活率低。     

转群体感应淬灭基因attM烟草抗青枯病的研究

自根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)克隆获得attM基因。采用叶盘转化法,农杆菌介导转化烟草,经过卡那霉素抗性筛选获得抗性愈伤组织,对其分化产生的植物株系进行PCR、PCR-Southern和荧光定量PCR及GUS染色检测分析。结果表明:attM基因被成功插入烟草基因组DNA中。在转基因株系中均能够表达,相对表达量最大可达125.8,最小为31.0。以野生型烟草和转pBI121空载体的烟草为对照,分别进行了离体及活体检测试验,结果表明:转attM基因烟草植株对茄科雷尔氏菌引起的青枯病抗性显著。1×107～1×108CFU.mL-1的青枯菌接种离体叶片,野生型烟草和转pBI121空载体的烟草的中毒面积与接种面积比值为15～25,转基因植株的比值低于3;青枯菌3×106CFU.mL-1伤根接种盆栽烟草植株14d,野生株和转空载体烟草均青枯死亡,病情指数为100,转基因植株病情指数为31.25。     

高水分晚粳稻降水控温安全度夏试验报告

在华东高温高湿生态区,应用“四合一”储粮新技术和空调控温新技术,实现高大平房仓高水分晚粳稻安全度夏,保持新鲜品质,为新形势下更好地服务“三农”,为粮食轮换掌握粮源提供了技术保障,也为今后高大平房仓高水分晚粳稻安全度夏提供了实践经验。