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N-酰基高丝氨酸内酯降解酶的抗体制备与鉴定
引用本文:杨雪,谷春艳,牛毅,李婷,胡白石,钱国良,刘凤权,范加勤.N-酰基高丝氨酸内酯降解酶的抗体制备与鉴定[J].江苏农业学报,2011,27(2).
作者姓名:杨雪  谷春艳  牛毅  李婷  胡白石  钱国良  刘凤权  范加勤
作者单位:南京农业大学植物保护学院,农作物生物灾害综合治理教育部重点实验室,江苏,南京,210095
基金项目:江苏省自然科学基金项目,江苏高校优势学科建设工程资助项目
摘    要:根据已报道的aiiA基因及attM基因序列设计引物,分别从蜡质芽孢杆菌(Bacillus cereus)和土壤根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)中PCR扩增获得aiiA基因及attM基因,构建蛋白表达载体pET30a-aiiA及pET30a-attM,在大肠杆菌BL21中诱导表达.利用AiiA解酯酶蛋白和AttM解酯酶蛋白在SDS-PAGE中对应的产物直接成兔免疫,提取血清进行ELISA和Western Blot检测.SDS-PAGE检测发现aiiA基因及attM基因能高效表达AiiA解酯酶蛋白和AttM解酯酶蛋白.ELISA检测结果表明,抗体含量高,稀释106倍依然为有效值.Western Blot 检测结果表明抗体可特异性结合目的蛋白.应用检测结果表明抗体血清能检测到N-酰基高丝氨酸内酯降解酶相关基因的产物,在验证群体感应和群体淬灭等方面将具有应用价值.

关 键 词:AHLs解酯酶  蛋白表达  蛋白免疫

Prepration and identification of antibodies against N-acyl homoserine lactones degrading enzyme
YANG Xue,GU Chun-yan,NIU Yi,LI Ting,HU Bai-shi,QIAN Guo-liang,LIU Feng-quan,FANG Jia-qin.Prepration and identification of antibodies against N-acyl homoserine lactones degrading enzyme[J].Jiangsu Journal of Agricultural Sciences,2011,27(2).
Authors:YANG Xue  GU Chun-yan  NIU Yi  LI Ting  HU Bai-shi  QIAN Guo-liang  LIU Feng-quan  FANG Jia-qin
Abstract:
Keywords:aiiA  attM
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