基于鸡卵清蛋白启动子的纳豆激酶慢病毒表达载体表达特性的研究

纳豆激酶(nattokinase,NK)是一种有效的抗血栓药物。基于已构建的纳豆激酶慢病毒表达载体,旨在比较其在鸡输卵管上皮细胞和鸡胚成纤维细胞中特异性表达的有效性。提取含卵清蛋白启动子(ovalbumin promoter,OV2)和雌激素反应元件(estrogen response element,ERE)的pLV-OV2-ERE-NK-2A-EGFP重组质粒。通过PCR和双酶切进行初步鉴定,经生物公司测序、包装和滴定得转染传代培养的鸡输卵管上皮细胞和鸡胚成纤维细胞,并采用荧光显微镜和qPCR法检测细胞表达产物。结果表明,载体pLV-OV2-ERE-NK-2A-EGFP构建成功;且荧光显微镜下,鸡输卵管上皮细胞的绿色荧光多于成纤维细胞;qPCR检测发现NK正常表达。提示成功构建纳豆激酶慢病毒表达载体且在鸡输卵管上皮细胞中正常表达。     

中熟优质荔枝品种红蜜荔引种研究

以茂名主栽荔枝品种黑叶、白蜡、白糖罂、妃子笑、水东黑叶作为砧木高接开展了红蜜荔在茂名的引种研究。经过5年的观察发现,以白蜡、白糖罂作为砧木高接红蜜荔,是非常少见的中熟优质品种,可替代茂名白蜡荔枝,促进荔枝产业品种升级。     

猪MiR-148a对肝脏发育调控的初步研究

mi R-148a是mi R-148/152家族中的一员,对细胞增殖、细胞分化、癌症发生等生物过程有重要的调控作用。本研究采用Real-time quantitative PCR(q RT-PCR)方法,定量检测mi R-148a在金华猪(Sus scrofa)不同发育时期肝脏中的表达变化,结果显示,mi R-148a在胚胎期的肝脏中表达量最高;出生后,随着日龄的增加表达量逐渐降低;为了了解mi R-148a的生物学功能和过程,对其进行GO(gene ontology)功能注释和KEGG(kyoto encyclopedia of genes and genomes)通路分析。结果显示,mi R-148a参与肝脏的生长发育调控过程。为了验证mi R-148a的靶基因,利用胎鼠(Mus musculus)肝细胞构建mi R-148a过表达和抑制表达的细胞模型,以此来探究mi R-148a的表达变化对靶基因在m RNA水平的影响。结果发现,在小鼠胎肝细胞中过表达mi R-148a可以显著降低CCAAT增强子结合蛋白α基因(CCAAT-enhancer binding protein-alpha,Cebpa)的表达量(P<0.05)。进一步检测发现,在金华猪肝脏生长过程中Cebpa与mi R-148a的表达呈负相关。根据这些结果推测,mi R-148a可能在肝脏发育过程中通过降低Cebpa的表达来调控细胞增殖和分化效应之间的平衡。     

荔枝EST资源的SSR信息分析及EST-SSR标记开发

 【目的】明确荔枝EST序列中SSR的总体特点,开发荔枝EST-SSR引物,为利用EST-SSR分子标记进行荔枝种质资源遗传多样性、连锁图谱构建及亲缘关系研究奠定基础。【方法】应用SSRIT软件,按照设定标准从自行构建的一个荔枝果皮发育关键期的cDNA文库中的1 331条Unigene（惟一序列）中搜索SSR位点。利用软件Primer primer5.0设计EST-SSR引物。选用16份表型差异较大的荔枝种质资源检测引物的有效性及多态性,利用聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)进行片段分离。【结果】荔枝的1 331条EST序列中共搜索出220个SSR位点,分布于189条EST中,出现频率是16.53%。这些EST-SSR的平均长度为18.43 bp,平均分布频率1/4.42 kb。在1—6 bp的重复基元中,二核苷酸和三核苷酸重复类型占主导地位,共占总SSR的69.09%,二者出现的频率分别为37.27%和31.82%。共观察到72种重复基元,出现频率最高的是GA/TC（16.82%）;其次是AG/CT、A/T、AT/TA及GAA/TTC,频率分别为14.55%、11.82%、5.00%和3.64%。不同核苷酸数目的重复基元的重复次数差异很大。设计、合成150对EST-SSR引物,122对（81.33%）引物在荔枝中获得有效扩增,100对引物具有多态性。【结论】荔枝EST资源中含有高频率的SSR位点,且EST-SSR 标记开发效率较高。本研究为利用EST-SSR标记开展荔枝遗传研究提供了100 对EST-SSR引物,并为进一步开发荔枝EST-SSR标记提供了含SSR位点的候选序列。     

台湾省荔枝育种概况与新品种选育进展

台湾省是较早系统开展荔枝育种的地区,通过20多年来的杂交育种工作,已培育新品种台农1号(翠玉)、台农2号(旺荔)和台农5号(红宝石)等;台湾地区在荔枝新品种选育方面成绩突出,其产业结构已成功从数量规模效益转化为质量品质效益。为此,探讨了台湾荔枝育种的思路、技术路线与实践过程,以加深对台湾省荔枝产业发展进程的了解和认识,为相关研究提供借鉴。     

应用绿僵菌防治鳞翅目蔬菜害虫及壮苗试验

1997～1998年在山西太原田间应用绿僵菌防治甘蓝上小菜蛾、菜青虫和番茄上棉铃虫试验 ,结果表明 ,绿僵菌对小菜蛾的杀虫率为74.48% ,菜青虫为77.73% ,番茄上棉铃虫为 53.98% ,高于对照药剂双效Bt悬乳剂300倍液。经浸种的辣椒苗和茄子苗颜色深绿 ,苗齐苗壮 ,长势好。     

米蛾饲养及利用技术的研究

利用赤眼蜂防治农林害虫,已受到了国内外的普遍重视。根据山西省的情况,繁殖赤眼蜂的关键问题是中间寄主卵不足。为解决这一问题,我们认为应当采用大小卵相结合的途径,并以机械化工厂化进行繁蜂。为此,由山西省农科院植保所主持,山西省农业局植保站、太原市农业局植保站,太原市南郊区生防站、沁水县生防站以及太原市花塔大队组成山西省米蛾Corcyra cephalonica(stainton)饲养利用及其机械化生产研     

茂名市荔枝高接换种技术规范

广东省是我国重要的荔枝产区,2016年底荔枝栽培面积27.41万hm~2,产量124.63万t。黑叶、白蜡、怀枝等低值品种面积太大,导致了产期集中,销售压力大,荔枝产业亟须品种结构调整和升级。本文总结了适合广东地区荔枝高接换种技术,可行性好,可操作性强。     

26份红桂木种质经济性状的初步评价

为开发利用红桂木Artocarpus nitidus subsp.Lingnanensis,在广东省茂名市化州市、高州市、电白区、茂南区等地收集野生红桂木种质资源,对表现较好的26份优良单株的主要经济性状进行初步评价。结果表明,红桂木遗传多样性丰富,适应性和抗逆性强,丰产性好,筛选出5个综合经济性状优良的单株,今后可重点进行开发。