猪MiR-148a对肝脏发育调控的初步研究

mi R-148a是mi R-148/152家族中的一员,对细胞增殖、细胞分化、癌症发生等生物过程有重要的调控作用。本研究采用Real-time quantitative PCR(q RT-PCR)方法,定量检测mi R-148a在金华猪(Sus scrofa)不同发育时期肝脏中的表达变化,结果显示,mi R-148a在胚胎期的肝脏中表达量最高;出生后,随着日龄的增加表达量逐渐降低;为了了解mi R-148a的生物学功能和过程,对其进行GO(gene ontology)功能注释和KEGG(kyoto encyclopedia of genes and genomes)通路分析。结果显示,mi R-148a参与肝脏的生长发育调控过程。为了验证mi R-148a的靶基因,利用胎鼠(Mus musculus)肝细胞构建mi R-148a过表达和抑制表达的细胞模型,以此来探究mi R-148a的表达变化对靶基因在m RNA水平的影响。结果发现,在小鼠胎肝细胞中过表达mi R-148a可以显著降低CCAAT增强子结合蛋白α基因(CCAAT-enhancer binding protein-alpha,Cebpa)的表达量(P<0.05)。进一步检测发现,在金华猪肝脏生长过程中Cebpa与mi R-148a的表达呈负相关。根据这些结果推测,mi R-148a可能在肝脏发育过程中通过降低Cebpa的表达来调控细胞增殖和分化效应之间的平衡。