利用类病毒脂质体抗原检测H5N1亚型禽流感病毒抗体ELISA方法的建立

利用昆虫杆状病毒表达系统制备了H5N1亚型禽流感病毒(AIV)HA蛋白、类病毒脂质体和病毒样颗粒,分别作为包被抗原,建立了相应的检测H5N1亚型禽流感病毒抗体的ELISA方法。特异性试验、敏感性试验、重复性试验和稳定性试验结果表明,利用3种抗原包被所建立的ELISA方法均具有良好的重复性和稳定性,批间和批内变异系数均小于10%,但单独表达的HA蛋白和类病毒脂质体特异性更好,而且类病毒脂质体有更高的免疫反应性,与灭活全病毒相比安全性更高,故在H5N1亚型AIV抗体水平检测方面更具有应用前景。     

脂质体介导RNA干扰质粒转染鸡成骨细胞条件的优化

本试验的目的是优化转染条件,提高在阳离子脂质体LipofectamineTM 2000介导下鸡TRPV6基因RNA干扰(RNAi)质粒转染入成骨细胞的效率。将携带绿色荧光蛋白基因的真核表达载体pSIREN-retroQ-shTRPV6在LipofectamineTM2000介导下转染至鸡成骨细胞,对转染前细胞融合度、质粒质量与脂质体体积比及转染时间进行优化,在荧光倒置显微镜下观察并计算转染效率,MTT法检测在不同质粒质量与脂质体体积比条件下成骨细胞的活性。结果表明,在转染前细胞融合达到90%以上,质粒DNA与脂质体比例为1∶2.5时转染效率最高,并且在转染后48 h转染效果最好,对细胞的毒性作用较小。本试验优化了脂质体介导转染鸡成骨细胞的条件,提高了转染效率,为用RNA干扰技术研究鸡TRPV6基因功能奠定了基础。     

阿霉素脂质体制备工艺优化及节拍式给药细胞探讨

目的:优化阿霉素脂质体处方和制备工艺,利用节拍式低剂量给药化疗方式探讨阿霉素脂质体对HO-8910 人卵巢癌细胞的体外杀伤作用.方法:采用硫酸铵梯度法制备脂质体,正交设计优选制备处方;葡聚糖凝胶柱层析 法分离含药脂质体与游离药物并测定包封率;考察其体外释放度.以常规给药24h和节拍式低剂量给药144h的 形式分别考察阿霉素脂质体、阿霉素体外细胞的毒性作用.结果:所得优化处方为:磷脂与胆固醇的质量比为 3∶1,硫酸铵浓度为155mmol/L,药物与磷脂的质量比为1∶10,孵育温度为60℃.以优化处方制得的脂质体平 均包封率达92.86%;脂质体具有一定的缓释作用.脂质体的细胞毒性实验结果显示,游离阿霉素与阿霉素脂质体 IC50值24h分别为0.62μg/mL和0.46μg/mL,144h分别为0.06μg/mL和0.01μg/mL.结论:优化得到的阿霉 素脂质体处方工艺简便,包封率高;无论是游离的阿霉素或是阿霉素脂质体,运用节拍式低剂量给药的方式在H0- 8910细胞中抑制率都明显优于MTD化疗方式给药,其中脂质体药物节拍式低剂量给药方式对H0-8910细胞的抑 制率明显优于游离药物.     

采用微粒运送系统诱导动物黏膜免疫

传染病现在仍是导致动物死亡,使畜牧业遭受损失的主要原因,疫苗免疫可以减少动物发病和死亡,对畜牧业生产的经济意义重大。但现在采用传统方法制备的疫苗在毒力、安全性和效力等方面不是最佳,因此需要开发新型疫苗以及替代免疫途径来     

半胱胺脂质体对肉鸡增重及饲料利用率的影响

将48只28日龄（平均体重1.29kg）艾维菌肉鸡按体重随机分成4组，对照组饲喂玉米豆饼日粮，试验1组鸡一次性喂给80mg/kg.bw游离半胱胺，2组鸡喂给与1线等量的半胱胺脂质体，3组鸡喂给40mg/kg.bw的半胱胺脂质体。3周后，3个试验组鸡的增重比对照组分别提高6．17％，16．4％，14．2％，饲料利用率分别提高7．1％，21．5％，16．4％。     

PST脂质体代谢动力学的研究

在猪体内m.i.PST脂质体，研究其在体内的药物代谢动力学和对肥育猪生产能力的影响，分析其血浆中生长激素浓度随时间的变化曲线，确定其释药模型为单室模型，求出各项动力学参数，结果为PST脂质体的缓释效果显著，缓释时间长达7d以上。     

猪生长激素(PST)脂质体代谢动力学的研究

在猪体内注射脂质体 ,研究其在体内的药物动力学 ,分析其血浆中生长激素浓度随时间的变化曲线 ,确定其释药模型为单室模型 ,求出各项动力学参数 ,结果为PST脂质体的缓释效果显著 ,缓释时间长达7天以上     

生长激素（PST）脂质体对育肥猪生产性能的影响

选择18头体重20kg左右的太湖二元杂交小公猪，分成A、B、C3组，每组6头。A组为对照组；B组颈部肌肉注射生长激素（PST）4ml/头；C组颈部肌肉注射PST脂质体28mg/头；结果表明PST与PST脂质体对育猪的生产性能影响较为接近，与对照组相比，均可显著提高育肥猪的日增重，饲料报酬，改善猪的胴体品质，说明PST脂质体可代替PST用于生产实践。     

诺贝脂质体注射液的临床应用研究

诺贝脂质体注射液系以泰乐菌素、硫酸双氢链霉素和糖皮质激素等 ,根据特殊工艺制成的脂质体长效注射液。经对猪肺疫、链球菌病、喘气病、仔猪白痢、羊肺炎球菌病等疾病的治疗效果观察 ,结果表明 :以 0 .0 5ml/kg体重肌肉注射 ,每两天用药 1次 ,可获得令人满意的治疗效果     

脂质体法介导山羊精子转染外源DNA最适条件的研究

研究了阳离子脂质体介导山羊精子转染外源DNA的方法、效果及其影响因素以确定其最适转染条件,为进一步用此方法生产转基因动物提供参考.结果显示:①脂质体介导法可用于山羊精子转染外源DNA;②脂质体介导转染1、2、3号公羊的精子消化后阳性率分别为25.2%,22.6%,27.5%,差异不显著(p＞0.05).③脂质体介导转染的精子消化前后阳性率在充分洗涤组为41.3%和25.5%,极显著高于原精液直接加入1:10:1转染液不洗涤处理组的25.6%和11.4%及原精液加入不含缓冲液的转染液处理组的17.2%和7.8%(p＜0.01).④离心洗涤后精液分别与在转染缓冲液中加入0、0.1%、0.3%、0.6% BSA(质量/体积)的转染液共同孵育后的消化前后阳性率分别为41.3%和25.5%、35%和21.4%、27.5%和15.3%及11.2%和8.2%;⑤用不同缓冲液配制的转染液进行脂质体介导山羊精子转染外源DNA的效率有差异,其中以mDM液转染精子的消化前、后阳性率最高(为41.3%和25.5%).研究表明:脂质体介导转染外源DNA的独特机制使供精个体间精子转染效率趋于一致;精子与脂质体-DNA复合物混合前将精子充分离心洗涤可显著提高脂质体介导精子转染外源DNA的效率;血清白蛋白能降低脂质体对精子介导的转染效率;脂质体法介导山羊转染外源DNA的最适转染条件为用mDM液充分洗涤精子后再与脂质体-DNA复合物混合转染.