猪圆环病毒2型和3型双重PCR检测方法的建立及应用

建立一种能够同时快速检测猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)的双重PCR方法,为猪圆环病毒病的快速诊断及流行病学的研究提供技术支持。根据Gen Bank中报道的PCV2和PCV3毒株全基因序列,在建立各病毒单项PCR检测方法的基础上,筛选双重PCR反应的最佳条件。扩增两种病毒的片段分别为1 154 bp和649 bp。建立的PCV2/3双重PCR检测方法的最佳退火温度为55℃,最佳引物终浓度为1. 0pmol/μL。应用建立的双重PCR方法和单项PCR方法分别对73份临床猪病料进行PCV2和PCV3检测,对结果进行对比分析,结果显示两者的符合率为100%。经初步临床应用,所建立的双重PCR检测方法可用于对PCV2和PCV3的同时鉴别检测。     

广西畜禽产品中沙门氏菌血清型、耐药性及耐药基因调查

试验旨在了解广西部分地区畜禽产品中沙门氏菌血清型分布和耐药状况,以及β-内酰胺酶blaTEM、blaCTX-M基因和氟喹诺酮类抗生素耐药基因qnrA、oqxA、oqxB、aac(6′)-Ⅰb-cr的流行情况。对沙门氏菌进行分离鉴定与血清型分型,采用K-B纸片法对其中随机挑选的80株分离株进行24种抗菌药物敏感性试验,并采用PCR方法进行耐药基因检测。结果显示,从零售生鲜畜禽肉中分离的176株沙门氏菌分属5个血清群,共26种血清型,主要优势血清群为B群60.23%(106/176)、E群18.75%(33/176)和C群15.91%(28/176),主要优势血清型为德尔卑沙门氏菌35.23%(62/176)、鼠伤寒沙门氏菌11.93%(21/176)和伦敦沙门氏菌9.66%(17/176)。80株分离株对24种抗菌药物均产生不同程度的耐药,其中对复方新诺明、林可霉素、利福平的耐药率最高,均高于90.00%,对青霉素、氨苄西林、阿莫西林、强力霉素、头孢拉啶、头孢氨苄、头孢曲松、头孢他啶、头孢噻肟、阿奇霉素的耐药率介于50.00%~90.00%之间,对环丙沙星、氧氟沙星、氟苯尼考的耐药率小于10.00%;所有分离株均为多重耐药株,其中最少为2重耐药,最多为17重耐药,多重耐药性主要集中在10~16重耐药,共占总数的78.75%(63/80)。PCR结果显示,80株分离株各基因的检出率分别为:blaTEM98.75%(79/80)、blaCTX-M26.25%(21/80)、oqxA26.25%(21/80)、oqxB21.25%(17/80)、qnrA16.25%(13/80)、aac(6′)-Ⅰb-cr 50.00%(40/80)。结果表明,广西畜禽产品源沙门氏菌血清型呈多样性分布,分离株的耐药情况严重,临床日益严重的耐药现象与耐药基因的普遍存在有很大的关系。     

氟苯尼考耐药基因floR LAMP检测方法的建立及应用

为建立快速、灵敏且可定量检测氟苯尼考耐药基因floR的环介导等温扩增方法(LAMP),根据GenBank登录的革兰阴性菌floR基因保守序列,利用PrimerExploerV4设计特异性LAMP引物,成功建立了快速检测氟苯尼考耐药floR基因的LAMP方法。该LAMP检测方法反应温度为63℃,反应时间为60min,具有可实时监测反应、定量检测出floR基因的拷贝数,以及操作简便的特点,灵敏度高,检测限为6.24×100拷贝,是普通PCR的100倍。用建立的方法检测对氟苯尼考不同敏感性的大肠埃希菌floR基因,结果显示,对氟苯尼考敏感、中介和耐药的菌株均检测到floR基因,其拷贝数与菌株MIC相关,提示floR基因不仅存在于氟苯尼考耐药菌中。所建立的floR基因LAMP检测方法可为floR基因的监测,以及氟苯尼考耐药性产生和传播机制的研究提供新的技术手段。     

副猪嗜血杆菌广西分离株耐药性分析

为了了解广西副猪嗜血杆菌(HPS)的耐药情况,试验应用纸片扩散法测定了2009年5月份至2011年3月份分离自广西壮族自治区南宁、桂林、玉林、钦州市65个猪场的31株副猪嗜血杆菌药物敏感性。结果表明:31株菌株对罗红霉素、多黏菌素B和链霉素的耐药率为58.1%、54.8%和51.6%;对头孢西丁、阿莫西林、氨苄西林、卡那霉素、阿米卡星、新霉素、环丙沙星、恩诺沙星的耐药率为16.1%～41.9%;对庆大霉素、氟苯尼考和头孢噻肟的耐药率只有6.5%、9.7%和9.7%。在31株HPS广西分离株中,只有1株菌株对14种抗菌药敏感,仅占3.2%;4株菌株只对1种抗菌药产生耐药性,占12.9%;其余26株菌株对2种以上抗菌药产生耐药性,占83.6%。     

高职艺术设计类专业“工作室制”人才培养模式探索与实践

根据高职院校艺术设计类专业人才培养的特点,提出"工作室制"人才培养模式。深入探索"以工作过程为导向"的"工作室制"教育理念的人才培养模式,构思工作室的组建、运行、教学方式及现实意义,提出艺术设计类教学课程革新与发展新思路,创新高职艺术设计类教学工学结合与校企合作的新模式。     

应用PCR技术鉴定猪源隐秘杆菌的感染

隐秘杆菌(Arcanobacterium pyogenes,A.pyogenes),又名化脓放线杆菌,是一种多形态、无运动性的革兰阳性杆菌.Ramos[1]根据16S rRNA基因进行系统进化分析后将其分类到隐秘杆菌属.该菌常导致牛[2]、羊[3]和猪发病[4],表现为肺炎、关节炎[5-6]等.近年来,猪场发病的病因及病原致病机理呈复杂趋势,尤其断奶仔猪肺炎和腿部疾病也越来越明显,不但影响猪的生长性能,而且降低肉猪的商品价值.2011年7月～2012年3月,广西兽医研究所细菌研究室在开展副猪嗜血杆菌病流行病学调查时发现,广西南宁市、贵港市和玉林市分别有3个规模猪场断奶仔猪零星出现以体温升高、关节炎、少量淡黄色稀薄脓汁、心包炎,部分死亡小猪肺部有小坏死灶为主要特征的疾病,临床症状与副猪嗜血杆菌病、链球菌病相似.此外,南宁市和贵港市的两个猪场曾免疫过副猪嗜血杆菌商品苗,但免疫效果不佳.最后,经过PCR鉴定确诊3起病例均由猪源隐秘杆菌引起,报告如下.     

人工繁育白蜡吉丁肿腿蜂的最适温度条件

为明确温度对白蜡吉丁肿腿蜂Sclerodermus pupariae Yang et Yao寄生情况、子代生长发育和繁殖的影响，在室内21、24、27、30和33℃共5个恒温条件下，以麻竖毛天牛Thyestilla gebleri幼虫为寄主，测定了不同温度下白蜡吉丁肿腿蜂的寄生率、寄生成功率，产卵前期、卵、幼虫、茧蛹和整个幼期阶段的发育历期、发育速率、子代数量以及性比等生物学参数。结果显示，随着温度的升高，白蜡吉丁肿腿蜂对寄主幼虫的寄生率和寄生成功率有所提高，寄生率在30℃时达到最高，为100%，寄生成功率在27℃和30℃均达到最高，为93.33%；当温度超过30℃时，二者均分别下降至73.3%和60%。随着温度升高，子代数量从58头/窝（21℃）显著增多至91.14头/窝（30℃）；当温度高于30℃时，羽化数量开始大幅度下降至52.5/窝（33℃）。在21~33℃范围内，白蜡吉丁肿腿蜂的产卵前期随温度升高呈递减趋势；幼虫、茧蛹及整个幼期阶段的发育速率均随着温度的升高而加快，而卵的发育速率在27℃时最快。表明人工繁殖白蜡吉丁肿腿蜂的最适温度范围为27~30℃，研究结果为提高该蜂的人工繁育效率以及优化野外释放策略提供了重要依据。     

一起果林下圈养肉鸡感染小肠球虫并发大肠杆菌病的诊治

<正>广西是我国优质肉鸡的饲养大省,绝大多数养户都是采用户外地面放养的方式来保留优良肉质的品味,成千上万只鸡构成的鸡群在较为粗放的饲养条件下受周边各种环境因素的影响很大,给鸡群的疫病防控带来许多的困难。其中鸡球虫病、大肠杆菌病就是采用这种方式饲养的鸡群较为容易感染发生的疫病,在饲养管理不到位时易发病。1发病情况2014年南宁市良庆区某一荔枝树林下搭棚、围栏、露天地面放养的一群8 000只黄羽肉鸡约     

信息技术教学中创新能力培养探析

教学本身是传授知识的过程,而学生创新能力的培养又是信息教学的核心环节。信息技术是一门集技能性与知识性于一体的基础性学科,与其他学科相比有其自身的特点。通过介绍信息技术课程的教学目标,信息技术课程的特点,信息技术教学过程的特征,分析并研究信息技术对于学生创新能力培养的优势。     

职业教育软件服务外包人才校企合作培养机制与可行性研究

目前,为尽快培养出符合软外企业需求的人才,学校一直在探索与软外企业合作的多种模式,但存在的核心问题是企业对校企合作的主动性不够,学校比较被动,合作的层面较浅,其中的症结就是校企合作机制的问题,这是制约校企深入合作的核心问题.因此,降低企业和学校软件人才培养成本,实现软件产业与教育的无缝对接,校企双方自愿积极地拿出各自的优势资源实现互利双赢和发展,才是校企创新合作要达到的共同目标.