双须骨舌鱼抗缪勒氏管激素基因amh的克隆、组织表达分析和原核表达

为探究双须骨舌鱼抗缪勒氏管激素基因amh的作用和表达模式,本研究通过RACE技术克隆了双须骨舌鱼amh基因全长c DNA序列,发现存在amh1、amh2两个亚型(Gen Bank登录号KU378662、KU378663)。序列分析结果显示,双须骨舌鱼amh1基因的c DNA全长2277 bp,编码623个氨基酸,amh2基因c DNA全长2181 bp,编码355个氨基酸。同源性分析显示,amh基因保守性较低,双须骨舌鱼与同科的美丽硬仆骨舌鱼相似度最高,为85.64%,与不同科鱼类的相似度均低于42%。系统进化分析显示,该基因与骨舌鱼目聚为一支,与鲱形目、鲤形目等较低等的硬骨鱼类亲缘关系较近,与双须骨舌鱼进化地位相符。用荧光定量PCR检测的结果显示,amh基因在双须骨舌鱼不同组织中均有表达,其中amh1亚型在精巢中表达量最高,且明显高于卵巢和其他组织;amh2亚型也在精巢中表达量最高,且明显高于其他组织,但远远低于amh1在精巢中的表达。构建了原核表达载体p ColdⅠ-amh1和p ColdⅠ-amh2并在大肠杆菌中成功诱导出大小分别为68和48 ku的融合蛋白,为进一步研究amh在双须骨舌鱼体内的生物功能奠定了基础。     

基于线粒体细胞色素b基因序列的骨舌鱼科鱼类分子系统发育的研究

为阐明骨舌鱼科鱼类的遗传结构和进化关系,测定了美丽硬仆骨舌鱼Scleropages formosus的3个品种金龙(Gold arowana)、红龙(Red arowana)、青龙(Green arowana)细胞色素b(cyt b)基因全序列(1 141 bp),结合来自GenBank中珍珠龙Scleropages leichardti、星点珍珠龙S.jardini、非洲龙Heterotis niloticus、黑龙Osteoglossum ferrerirai、银龙O.bicirrhosum、海象Arapaima gigas的全序列,用邻接法(NJ)和最大简约法(MP)构建分子系统树,初步分析了骨舌鱼科鱼类的系统发育关系.NJ树和MP树均一致表明,骨舌鱼类为单系类群,分为4支,支持骨舌鱼科下设4个属(坚体鱼属Scleropages、异耳鱼属Heterotis、骨舌鱼属Osteoglossum、巨骨舌鱼属Arapaima)阶元的分类系统,4个属的系统关系与其形态、生态特征表型进化和地理分布较为一致.而金龙、红龙和青龙的mtDNA Cytb的碱基差异小于1%,说明这3个龙鱼品种还在同一种的水平上.     

重组虹鳟生长激素酵母对罗非鱼的促生长作用研究

采用表达重组虹鳟生长激素的酵母工程菌Y33作为饲料添加剂投喂奥尼罗非鱼鱼种。结果表明，酵母胞内表达的虹鳟生长激素具有生物活性，能够经口服被鱼体肠道吸收，对罗非鱼具有明显的促生长作用。     

珍珠魟人工繁殖及生长特性的初步研究

以60 尾珍珠魟（Potamotrygon motoro）为研究对象,进行人工繁育和生长试验。在2011要2013 年间成功 繁育珍珠魟500 尾,成活率达90%。同时对人工养殖条件下珍珠魟生长特性进行研究,结果表明,珍珠魟的体重（W） 与日龄（t）呈线性关系院W= 3.7641t-75.704,R2=0.9623;体盘长（L）与日龄呈线性关系院L=0.0536t+10.952,R2=0.9834;体 重与体盘长呈幂函数关系院W=0.0411L3.094,R2=0.9924,指数b 为3.094,说明人工养殖条件下珍珠魟属于等比生长类 型,体重与体盘长生长基本同步。     

鲤生长激素酵母工程菌的分泌表达和产物纯化

取本室构建的鲤生长激素毕赤酵母工程菌GS115 (pPICZαA -GH) ,甲醇诱导 ,SDS -PAGE检测 ,证明重组鲤生长激素 (RecombinantCarpGrowthHormone ,rcGH)在酵母中得到分泌表达。重组酵母菌生长曲线显示 ,细胞从培养第 8小时进入对数生长期 ,至 32hOD660 升至峰值 11.5 ,此后OD660 缓慢下降。在以 10 0 %甲醛按 0 .5 %添加量诱导至 72h、pH为 6 .0时 ,rcGH表达量最高。凝胶扫描分析 ,分泌表达的rcGH占上清总蛋白的 36 .4 1% ,表达量为 30 0～ 4 0 0mg/L发酵液。经离子交换层析法纯化表达产物 ,纯度可达 95 %。纯化的rcGH注射奥尼罗非鱼 ,结果表明具有明显的促生长作用     

中国大陆海水观赏鱼渔业

海水观赏鱼在全世界今天的水族市场中所占的比例还是很小，在观赏鱼行业和消费市场刚刚形成的中国大陆来说，其比例就更小得多。但是如果要讲述中国海水观赏鱼，那仍然是个非常笼统而庞大的题目。以下分几个方面作简要分析，以期抛砖引玉，让大家共同来关心中国海水观赏鱼渔业的健康发展。     

牙鲆干扰素调节因子核心区序列的克隆及初步表达

采用逆转录－聚合酶链式反应（RT－PCR）方法，从牙鲆（Paralichthys loivaceus)肝脏总RNA中扩增出干扰素调节因子（fIRF)的核心区序列，定向插入质粒pUC18，克隆的牙鲆IRF cDNA序列分析表明，与Yabu报道的牙鲆IRF cDNA相比有1个碱基差异，但与推断的氨基酸序列完全一致，将牙鲆IRF的核心区序列 cDA定向插入原核表达载体pBV220，构建成牙鲆IRF表达载体pBVfIRF22，SDS－PAGE分析表明，经42度诱导，含pBVfIRF22质粒的大肠杆菌可表达一分子量约12000的特异蛋白。     

鲮鱼、麦瑞加拉鲮鱼和露斯塔野鲮的染色体组型比较

近年来,人们对维科染色体的研究报道甚多,认为其染色体的基本二倍数为2N=50和2N=48,变异范围在2N=44～200之间。Gold等认为北美洲已见核型报道的绝大多数鱼类为2N=50。但欧亚大陆大多数为2N=48～50。Arai对欧亚大陆已研究过核型的141种鲤科鱼进行了分析,提出2N=50是鲤科鱼最原始的核型。周暾等对中国鲤科核型的研究也做了大量的工作并得出与Arai一致的结论。     

金鱼线粒体DNA Cyt b基因序列分析及与鲫鱼亲缘关系探讨

通过对金鱼(Carassius auratus var.)的5个代表品种草金(grass goldfish)、红龙睛(red dragoneye goldfish)、鹤顶红(red-head wen goldfish)、水泡(blisters-eyegoldfish)、黑寿(white-head oval goldfish)线粒体DNA细胞色素b基因全序列进行测定,结果发现金鱼Cytb基因全序列1141bp,其中T、C、A、G4种碱基含量分别为29.1%,27.8%,28.4%,14.5%,A T的含量(57.8%)高于C G的含量(42.2%)。草金、红龙睛、鹤顶红、水泡、黑寿Cytb基因全序列一样。结果表明,细胞色素b基因在金鱼种内是相当保守的,草金、红龙睛、鹤顶红、水泡、黑寿起源于同一祖先。将鲫鱼和金鱼线粒体Cytb基因序列比较分析,同源性达97.9%,应该还在同一种的水平上。