传染性喉气管炎病毒河南株gB基因的克隆与序列分析

根据传染性喉气管炎病毒(ILTV)gB基因的核苷酸序列,设计、合成1对引物,应用PCR扩增鸡ILTV河南株(ILTV-CG)gB基因.将扩增片段克隆入pGEM-T Easy载体后,经蓝白斑筛选,菌液PCR和酶切鉴定为阳性的重组菌进行测序.结果表明克隆到ILTV-CG株gB基因,全长为2 629 bp,包含一个完整的开放阅读框,共编码873个氨基酸的多肽,推导氨基酸序列有8个潜在的N-糖基化位点,有12个与二硫键形成有关的半胱氨酸.序列分析表明,ILTV-CG株gB基因与GenBank中读取的澳大利亚SA2疫苗株、辽宁疫苗株、烟台株、美国632强毒株、英国Throne强毒株gB基因核苷酸序列同源性为99%以上,与ILTV-SA2株gB基因比较发现,ILTV-CG株gB基因核苷酸序列在第89位均缺失1个碱基G,而在第102位又插入1个碱基A,从而引起该毒株gB基因推导的氨基酸序列中第28～32位5个氨基酸的移码突变.     

猪圆环病毒病的PCR诊断与防制

根据GenBank发表的猪圆环病毒AF027217基因序列,设计、合成一对特异性引物,对疑似感染猪圆环病毒的患病猪的血液及病死仔猪内脏组织进行了PCR扩增,检测结果为阳性。并对猪场采取综合防制措施,取得较好效果。     

开产蛋鸡传染性喉气管炎的PCR诊断及防治

鸡传染性喉气管炎(infectious laryngotrache-itis,ILT)是由鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)引起的鸡的一种急性接触性呼吸道传染病。病鸡主要表现呼吸困难、咳嗽、喘气、甩头,严重者咳出血样粘液。病理剖检可见喉头及气管黏膜肿胀、弥漫性出血,表面附着带血的渗出物或黄色干酪样假     

复合益生菌发酵绞股蓝对蛋鸡生产性能、蛋品质及ND抗体水平的影响

为了研究复合益生菌发酵绞股蓝作为饲料添加剂对蛋鸡生产性能、蛋品质及ND抗体水平的影响,试验选择240日龄海兰褐蛋鸡200只,随机分成4组,对照组饲喂产蛋期基础日粮,Ⅰ组在基础日粮中添加0. 3%复合益生菌发酵绞股蓝,Ⅱ组在基础日粮中添加0. 5%发酵复合益生菌,Ⅲ组在基础日粮中添加0. 3%未发酵复合益生菌与绞股蓝混合物,预试期5 d,正试期为30 d,测定各组蛋鸡生产性能、蛋品质及ND抗体水平。结果表明:与对照组比较,11～20 dⅡ组、Ⅲ组产蛋率显著提高(P0. 05),Ⅰ组极显著提高(P 0. 01); 21～30 dⅠ组产蛋率维持在较高水平,Ⅱ组和Ⅲ组略有下降。11～30 d平均蛋重和只日产蛋重Ⅰ组明显升高且与其他组之间差异显著(P 0. 05),Ⅱ组、Ⅲ组呈下降趋势,与对照组之间差异不显著(P0. 05)。Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组蛋形指数、蛋黄系数和蛋黄相对重均呈上升趋势,且Ⅰ组哈氏单位显著高于其他各组(P0. 05),蛋黄含水量和蛋清含水量显著低于其他各组(P0. 05)。第1,2周时各试验组ND抗体水平均呈上升趋势,其中Ⅰ组上升趋势明显;第3,4周Ⅰ组显著高于对照组(P0. 05),Ⅱ组、Ⅲ组与对照组之间差异不显著(P0. 05)。说明复合益生菌发酵绞股蓝可提高蛋鸡生产性能,改善蛋品质和提高ND抗体水平。     

固始鸡α干扰素基因克隆与序列分析

参照GenBank上登陆的鸡α干扰素基因序列设计一对引物,应用PCR技术直接从固始鸡肝组织基因组DNA中扩增鸡α干扰素基因.将特异性片段克隆入pGEM-T Easy载体中,转化JM109感受态细胞,经质粒PCR鉴定及酶切鉴定筛选阳性菌株送往大连宝生物公司测序.测序结果表明,固始鸡α干扰素基因为582 bp.用DNAStar软件对克隆的固始鸡α干扰素基因与GenBank发表的其它品种鸡α干扰素基因序列进行同源性分析,核苷酸同源性在97.9%以上,氨基酸同源性在96.9%以上.     

淮南猪IL-2全基因的克隆与遗传进化分析

参照GenBank发表的猪IL-2cDNA基因序列,设计l对引物,将河南地方品种淮南猪脾淋巴细胞在伴刀豆球蛋白A(Con A)的刺激下体外培养27 h后,提取激活淋巴细胞总RNA,进行反转录.聚合酶链反应(RT-PCR)扩增,克隆到pGEM-T Easy载体上并测序.测序结果显示,克隆的HuainanPIL-2 eDNA全长为516 bp,开放阅读框(ORF)包含465bp,编码154个氨基酸,分子量为17.4 kDa,等电点为5.27,疏水氨基酸38.3%,亲水氨基酸42.O%.碱件氨基酸11%,酸性氨基酸23%.此cDNA与已报道的猪IL-2同源性为100%,与猫、牛、鸡、狗、鸭、山羊、马、人、家鼠等的IL-2基因进行比较分析,核苷酸同源性分别为83.7%,82.6%,28.2%.80.6%,29.6%,83.4%,81.3%.82.O%,61.5%.     

一例鸡传染性喉气管炎的诊治

2006年9月,登封市某鸡场发生了一种以呼吸困难、咳出血性渗出物为特征的疾病,用针对鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)gX基因的特异引物,经PCR检测鸡传染性喉气管炎病毒阳性,结合病史和临床症状及病毒分离,诊断为鸡传染性喉气管炎。对该鸡场采取了综合防制措施,取得了较好的效果。     

猪圆环病毒PCR检测方法的建立

本研究建立了检测猪圆环病毒的PCR方法,并对该方法进行了标准化研究.该方法具有快速、敏感、特异性强等特点,从PCV2感染的细胞中町最低扩增到0.1 ng的DNA,且对其它病原微生物如PRV、PPV不能检出.可对病料、血清提取DNA进行检测,所有程序在5 h内得出结果.该方法可用于PCV2感染猪的快速诊断,引种检疫,分子流行病学调查.