微卫星DNA对外源基因遗传的影响

试验通过转绵羊金属硫蛋白启动子-猪生长激素(oMT-pGH)基因和转绵羊金属硫蛋白启动子-猪生长激素-微卫星DNA(oMT-pGH-microsatellite DNA)基因猪的连续传代.分析了后代中转基因阳性猪的比例,并比较了两种转基因猪的遗传效果.结果发现,外源基因的传代不稳定.世代中转基因个体的比例在逐代降低;Microsatellite DNA片段在转基因猪的传代中没能显现出提高整合率的作用.     

农业产业化经营评价指标体系的建立及实证分析

建立了农业产业化经营评价指标体系,通过对河南农业产业化经营的实证分析,初步确定了河南农业产业化经营发展阶段,并为其进一步发展提供政策指导。     

转绿色荧光蛋白标记基因猪整合检测的研究

[目的]为转基因猪生产的整合效率、外源目的基因表达水平、目的基因在猪体内组织特异性表达分布等相关领域的进一步研究奠定基础。[方法]用显微注射法将GFP标记的转基因猪表达载体PM1导入湖北白猪和通湖猪1-细胞、2-细胞胚胎中,胚胎移植妊娠后生产仔猪,取耳或尾组织样提取基因组总DNA,用PCR法检测PM1在猪基因组中的整合情况。[结果]在所有生产的78头仔猪中,有6头猪用PCR检测为转PM1基因阳性猪,这6头猪在3次PCR扩增反应中都得到650 bp目的扩增片段。其他样品没有得到目的扩增片段的为阴性猪。[结论]载体PM1可以用于携带外源基因进行转基因猪生产。     

人端粒酶基因(hTERT)对牛耳成纤维细胞凋亡的影响

为了提高体细胞核移植的效率,试验探讨了转染外源性hTERT基因对核移植供体细胞———牛耳成纤维细胞的影响。试验应用脂质体介导hTERT基因转染,用相差显微镜观察转染前后的细胞状态,用RT-PCR、W estern blot法检测hTERT基因是否整合并表达,用流式细胞仪检测转染前后细胞周期的变化和凋亡的情况,并进行核型分析。结果表明:转染48 h后能看到明显的荧光,经600μg/mLG418筛选后,获得阳性克隆,转染后的细胞形态上基本无变化,hTERT基因整合并表达;经流式细胞仪检测,转染前后生长周期无明显变化,凋亡率极显著降低(P<0.01),核型正常;转染hTERT基因后的牛耳成纤维细胞的凋亡率显著低于未转染的细胞,并且形态正常,表明转染hTERT后,使体外培养的牛耳成纤维细胞生命力得到延长,为核移植提供了数量更多的高质量的核供体细胞。     

基因沉默技术的研究动态及在畜牧业中的应用

从RNA干扰现象的发现、筛选及基因沉默的发生开始,概述了细胞水平基因沉默的效应,并由细胞水平上过渡到模型动物试验阶段,在此基础上,着手家畜基因沉默的研究,最后,涉及到基因沉默技术在畜牧业上的应用前景。     

猪孤雌胚胎体外序贯培养

试验旨在探索不同培养体系和不同序贯培养法对猪孤雌胚胎体外发育的影响。采用普通培养和序贯培养2种培养方法进行猪卵母细胞的体外培养。结果表明,孤雌激活卵母细胞在NCSU23+0.4%BSA中分裂效果较好,而mTCM199+0.1%PVA则更有利于孤雌胚胎突破4细胞阻滞达到桑葚胚。在4种序贯培养中,NCSU23(0.4%BSA)+mTCM199(0.1%PVA)一组更适合于猪孤雌胚胎的体外培养。     

区域科技综合实力评价指标体系及实证分析

建立了区域科技综合评价指标体系,为找出科技发展中的差距和存在问题,探讨科技,经济,社会协调发展的途径,应用综合指数评价模型对河南等１１个省的科技综合实力进行了实证分析。     

西安地区芹菜秋季露地栽培技术

笔者经过多年在西安地区阎良、高陵、周至、长安等区县开展的芹菜栽培等相关试验示范，总结形成了一套适合西安地区的芹菜秋季露地栽培技术，以期为西安乃至北方地区芹菜秋季露地栽培提供技术指导。