黑叶观音莲组培快繁技术体系研究

[目的]建立黑叶观音莲组培快繁技术体系。[方法]以黑叶观音莲的顶芽作为外植体,通过对外植体的消毒时间、不定芽诱导、增殖继代和生根培养等环节技术探究,建立黑叶观音莲组培快繁技术体系。[结果]最佳的外植体消毒时间为19min,污染率为5.6%,褐变率为4.4%;培养基MS+6-BA 5.00 mg/L+NAA 0.20 mg/L最适合不定芽的诱导,诱导率62.2%;最佳的丛生芽增殖培养基为MS+6-BA 3.50 mg/L+NAA 0.30 mg/L,增殖倍数为4.3;最佳的生根培养基为1/2MS+NAA 0.20 mg/L+0.50 g/L活性炭,生根率达100%。[结论]该研究建立了黑叶观音莲组培快繁技术体系,为其工厂化生产提供了理论依据。     

响应面试验优化霍山石斛原球茎增殖培养基

为可持续开发霍山石斛资源，采用响应面法优化霍山石斛原球茎增殖培养基。在单因素试验基础上，根据Box Behnken试验设计原理，采用三因素三水平的响应面分析法，以增殖率为响应值进行回归分析。结果表明，萘乙酸（简称NAA）及6 苄氨基嘌呤（简称6 BA）浓度对增殖率影响最为显著，6 BA与马铃薯两者间交互作用显著，适宜的NAA、6 BA及马铃薯浓度分别为0.05 mg·L-1、0.70 mg·L-1和185 g·L-1，此时增殖率为2 989.82%±205.55%，与模型预测值基本符合。响应面法优化霍山石斛原球茎增殖培养基切实可行。     

靖海湾与五垒岛湾海蜇增殖放流效果比较与分析

根据2010-2015年在靖海湾与五垒岛湾进行的海蜇(Phopilema esculentum)放流前本底调查和放流后跟踪调查结果,对比分析靖海湾与五垒岛湾海蜇苗种的放流密度及成活率。结果表明,靖海湾与五垒岛湾海蜇自然群体资源量均较低,放流群体贡献率非常大。2010-2015年靖海湾海蜇苗种放流密度为(26.92~30.96)×10~4尾·km~(-2),平均为29.45×10~4尾·km~(-2),五垒岛湾海蜇苗种放流密度为(23.05~25.14)×10~4尾·km~(-2),平均为23.97×10~4尾·km~(-2),对比结果表明靖海湾年放流密度均高于五垒岛湾。近6年,靖海湾海蜇苗种成活率分别为0.25%~0.83%,平均为0.51%,五垒岛湾苗种成活率分别为0.31%~0.96%,平均为0.67%,五垒岛湾放流苗种成活率略高于靖海湾。通过靖海湾与五垒岛湾海蜇放流效果对比分析,海蜇苗种成活率与自然群体资源量、海蜇放流密度及海蜇苗种规格等因素有很大的关系。本研究可为山东半岛南部海蜇资源的修复和管理提供参考依据。     

西藏鱼类增殖放流初报

西藏土著鱼类生长缓慢、性成熟晚并对环境变化高度敏感。近年来,受过度捕捞、水利工程建设等人类活动的影响,西藏渔业资源面临越来越大的压力。开展增殖放流活动是恢复当地渔业资源和生态平衡的重要手段。本文介绍了西藏鱼类增殖放流概况、苗种来源、放流实施、效果评估情况,分析了目前存在的基础研究不足、苗种来源不稳定、缺乏技术规范、效果评估有待加强等问题。提出了加强增殖放流基础设施建设和基础理论研究、建立西藏鱼类增殖放流与效果评估技术规范、重视放流后的管理与评估工作、加强专业技术人才队伍建设的建议。     

siRNA干扰Wnt11对鸭成肌细胞增殖的影响

为了探究Wnt11(无翅型MMTV整合位点家族成员11)对鸭骨骼肌成肌细胞增殖的影响以及可能与Wnt11相关的信号通路,采用体外分离培养鸭骨骼肌成肌细胞,脂质体介导siRNA(小干扰RNA)转染干扰基因的表达,qRT-PCR(实时荧光定量PCR)检测基因表达变化,Ed U(5-乙炔基-2'-脱氧尿苷)染色分析细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期变化及信号通路抑制剂处理。结果显示:干扰Wnt11的表达后,增殖相关基因CCND1(细胞周期蛋白D1)、CDK6(周期蛋白依赖性激酶6)和PCNA(增殖细胞核抗原)的表达量极显著降低(P0.01),Ed U阳性细胞数极显著降低(P0.01),处于S期的细胞数显著降低(P0.05);当用Akt(蛋白激酶B)抑制剂处理鸭成肌细胞后,Wnt11表达量显著降低(P0.05),而干扰Wnt11表达后,PI3K(磷脂酰肌醇-3-羟激酶)和Akt的表达量显著升高(P0.05)。提示:Wnt11在鸭成肌细胞增殖过程中有重要调控作用,Wnt11发挥调控作用需要PI3K/Akt信号通路参与,且二者间存在反馈作用。     

‘红国王’葡萄组织培养快速繁殖

为建立‘红国王’葡萄组培快繁体系,本试验研究了生长素、接种材料类型、培养条件对组培苗继代增殖与生根的影响。结果表明,0.5 mg/L IAA适合‘红国王’的继代增殖,繁殖系数为5.49,在培养基中附加0.3 mg/L NAA,愈伤组织少且根系粗壮;适合‘红国王’组培苗生长的蔗糖浓度为25~30 g/L,在该浓度下植株长势健壮,生根条数多;带半叶单芽茎段为‘红国王’适宜接种材料类型;接种后第1天至第10天暗培养,可促进‘红国王’根系发育;放置于LED灯复合光红∶蓝∶白=3∶1∶1下,可获得长势强、根系强壮的组培苗;继代间隔为40 d时,繁殖速度较快。     

α-亚麻酸对TM3细胞活性及相关基因表达的影响

α-亚麻酸(ALA)是哺乳动物必需脂肪酸的重要成员,在机体生长和发育过程中起着重要作用。在雄性动物生殖系统,ALA通过代谢生成二十二碳六烯酸(DHA)和二十碳五烯酸(EPA),进而对生殖系统发挥调控功能。采用WST-1、JC-1以及RT-PCR等方法研究ALA对体外培养的小鼠睾丸间质细胞TM3细胞的活力及相关基因表达的影响。结果表明:培养体系中添加10,50,100,200,400μmol/L的ALA,处理24 h可以显著提高TM3细胞活力(P0.05),并且呈剂量依赖性。与对照组相比,50μmol/L的ALA处理24 h可以促进TM3细胞增殖,提高线粒体膜电位,抑制凋亡相关基因Caspase-3表达(P0.05),促进类固醇代谢相关基因StAR表达(P0.05)。这说明在体外培养体系中添加ALA可以增加TM3细胞活性,促进细胞增殖和StAR基因表达,抑制Caspase-3基因表达。     

蝴蝶兰‘大辣椒’组培快繁技术体系的优化

探索优化蝴蝶兰组培快繁技术体系，以蝴蝶兰‘大辣椒’半木质化花梗为试验材料，研究消毒剂、基础培养基、植物生长调节剂配比及浓度对蝴蝶兰不定芽诱导、增殖和生根过程的影响。结果表明:1）先用2% H₂O₂溶液处理15 min，再用10% NaClO溶液处理10 min，消毒效果良好，花梗污染率低，为26.6%；2）不定芽诱导最适培养基为花宝1号+花宝2号+ 6-BA 3 mg/L+NAA 0.05 mg/L，出芽率为78.9%；3）不定芽增殖最适培养基为花宝1号+6-BA 5 mg/L+NAA 0.05 mg/L，增殖系数为3.60；4）幼苗生根最适培养基为1/2MS+NAA 0.2mg/L，生根率为73.7%。本研究旨在优化‘大辣椒’品种的组培快繁技术体系，为进一步建立蝴蝶兰再生体系和工厂化生产提供技术支持。