应用CRISPR/Cas9敲除HeLa细胞DDX21基因对新城疫病毒复制的影响

解旋酶家族是一类对所有生物都至关重要的酶,主要功能是基因解旋,DEAD/H-box家族RNA解旋酶是一类重要的解旋酶。DEAD-box RNA解旋酶DDX21被证实可能调控宿主细胞先天性免疫。新城疫病毒(NDV)是一种对养禽业危害严重的病原,NDV能够通过多种手段调控宿主先天性免疫,为了探讨DDX21如何调控NDV复制,本研究应用CRISPR/Cas9系统建立DDX21基因敲除的HeLa细胞系,并验证其对NDV复制的影响。针对DDX21基因共设计6条sgRNA,构建敲除载体并电转染细胞,通过药物筛选、亚克隆筛选后,以PCR和Western blot进行敲除效率的双重鉴定,并比较野生型和DDX21敲除细胞中NDV的复制效率。结果显示,由于DDX21对细胞生长至关重要,因此仅获得一株DDX21杂合子敲除细胞,Western blot结果显示DDX21表达量被显著抑制,NDV对在敲除细胞上的复制滴度明显低于野生型细胞,说明DDX21发挥正调控NDV复制的作用,本试验为DDX21调控抗病毒先天性免疫研究奠定了基础。     

蚯蚓体内微量元素存在的形式及含量研究

蚯蚓对金属元素具有富集作用.为探究微量元素在蚯蚓体内存在形式和含量,利用火焰原子吸收光谱法测定蚯蚓体内铁、铜、锰、锌四种微量元素的总含量和氨基酸螯合态含量.结果表明,蚯蚓体内铁、铜、锰和锌四种元素以氨基酸螯合态形式存在比例达到65%以上,其中氨基酸螯合铁含量为400.45 mg/kg,占铁总含量的86.54%;氨基酸螯合铜含量为13.49mg/kg,占铜总含量的67.50%;氨基酸螯合锰含量为18.65 mg/kg,占锰总含量的65.79%;氨基酸螯合锌含量为358.19 mg/kg,占锌总含量的93.97%.     

蚯蚓体内微量元素存在的形式及含量研究

蚯蚓对金属元素具有富集作用。为探究微量元素在蚯蚓体内存在形式和含量,利用火焰原子吸收光谱法测定蚯蚓体内铁、铜、锰、锌四种微量元素的总含量和氨基酸螯合态含量。结果表明,蚯蚓体内铁、铜、锰和锌四种元素以氨基酸螯合态形式存在比例达到65%以上,其中氨基酸螯合铁含量为400.45 mg/kg,占铁总含量的86.54%;氨基酸螯合铜含量为13.49mg/kg,占铜总含量的67.50%;氨基酸螯合锰含量为18.65 mg/kg,占锰总含量的65.79%;氨基酸螯合锌含量为358.19 mg/kg,占锌总含量的93.97%。     

DDX3 RNA解旋酶在基因调控、肿瘤和病毒感染中的功能

DEAD-box RNA解旋酶DDX3是一种多功能的蛋白,其参与RNA代谢的多个过程,包括转录、剪接、mRNA核输出、翻译、RNA降解和核糖体生物合成。此外,DDX3还参与了细胞周期调控、细胞凋亡、Wnt-β-catenin信号和肿瘤发生等。最近研究表明,DDX3参与天然免疫信号通路并且促进抗病毒分子(如:干扰素调控因子3和Ⅰ型干扰素)的产生,DDX3也是一些病毒的主要靶点,因此,DDX3可作为研发抗病毒药物的新靶点。本文简单介绍了DDX3的结构和功能,总结了其在基因表达调控、细胞周期调控和细胞凋亡过程中发挥的作用,最后阐述了病毒如何通过与DDX3的互作调控宿主先天性免疫,以期为细胞的稳态调控和抗病毒先天性免疫调控提供新的思路。     

菊苣根超微粉对肉仔鸡生长性能、肠道菌群数量的影响

为了研究菊苣根超微粉对肉仔鸡生长性能、肠道菌群数量的影响,试验选择1日龄AA肉仔鸡240只,随机分成4组,每组3个重复,每个重复20只。对照组饲喂基础日粮,低剂量组、高剂量组和粗粉组分别在基础日粮中添加0.5%、1.0%菊苣根超微粉和1.0%菊苣根粗粉,预试期6 d,正试期21 d。结果表明:与对照组比较,高剂量组和粗粉组肉仔鸡的体重、平均日增重、平均日采食量均显著提高(P0.05),高剂量组、粗粉组肉仔鸡肠道大肠杆菌数量显著降低(P0.05),高剂量组肉仔鸡肠道双歧杆菌数量显著提高(P0.05)。说明在日粮中添加1.0%菊苣根超微粉可调节肉仔鸡肠道菌群平衡,进而提高生长性能,且效果优于粗粉。     

酵母培养物添加剂固态发酵培养基的研究

[目的]为研制一种新型奶牛饲料添加剂提供一定的参考。[方法]用一定比例的不同碳氮源配制成不同碳氮比的固态发酵培养基,以活化好的福邦饲用高活性干酵母稀释液为试材,通过发酵培养和测定酵母细胞数确定其最适碳、氮源及碳氮比。[结果]在6种不同碳氮比的固态发酵培养基中,以秸秆为碳源的发酵培养基中的酵母细胞数普遍高于以玉米淀粉为碳源的。以秸秆为碳源,花生粕为氮源,碳氮比为1∶1时,发酵培养基的每克干物质中含酵母细胞1.283×109个。秸秆、玉米淀粉(2∶1)混合作碳源时,固态发酵培养基的每克干物质中含酵母细胞1.315×109个。[结论]福邦饲用高活性干酵母固态发酵的最适碳源为秸秆、玉米淀粉(2∶1)的混合物,最适氮源为花生粕,最佳碳氮比为1∶1。