转fat-1基因对绵羊胎儿组织脂肪酸组成的影响

n-3多不饱和脂肪酸具有多种重要生理功能,哺乳动物只能通过食物摄取n-3多不饱和脂肪酸,以满足机体的健康所需。脂肪酸去饱和酶-1基因(fatty acid desaturase-1,fat-1)以18~20碳的n-6多不饱和脂肪酸为底物进行脱氢反应,产生相应的n-3多不饱和脂肪酸,为了解转fat-1基因绵羊(Ovis aries)具体脂肪酸的组成,本研究利用fat-1表达质粒转染绵羊胎儿成纤维细胞,筛选获得阳性单克隆细胞系,通过体细胞核移植,得到转fat-1基因绵羊。通过脂肪酸质谱测定仪对5种组织脂肪酸含量进行测定,研究了fat-1基因对5种组织3类32种脂肪酸含量变化的影响。结果发现,在脑和臀肌中,饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸类别百分含量变化不显著;在肝脏、心脏和睾丸中,fat-1基因能够使饱和脂肪酸下降、使肝脏和睾丸的单不饱和酸量升高、使心脏中单不饱和脂肪酸含量降低;单不饱和脂肪酸中C18:1n-9c和饱和脂肪酸中C16:0、C18:0的含量变化决定了转基因绵羊组织单不饱和脂肪酸和饱和脂肪酸的变化趋势,在脑和臀肌中,这3种脂肪酸在转基因与对照组之间差异不显著;fat-1基因引起肝脏多不饱和脂肪酸降低,心脏和睾丸中多不饱和脂肪酸含量增高,主要由二十碳二烯酸C20:2(eicosadienoic acid,EDA)、二十碳三烯酸C20:3n-3(eicosatrienoic acid,ESA)、花生四烯酸C20:4n-6(arachidonic acid,ARA)、二十碳五烯酸C20:5n-3(eicosapentaenoic acid,EPA)和二十二碳六烯酸C22:6n-3(docosahexaenoic acid,DHA)的含量起主导作用;在5种组织中,转基因组EPA与DHA的含量均升高,尤其是EPA差异显著(P0.05)。fat-1基因降低了多不饱和脂肪酸中C20:3n-3和C20:4n-6的含量而增加了C20:5n-3和C22:6n-3的含量,从而提高了n-3/n-6的比值。本研究解析了转fat-1基因绵羊的脂肪酸组成和特点,对开发优质绵羊品种、改善人类膳食中脂肪酸结构及降低肥胖症风险提供了理论依据。     

海拉尔一次强雷暴天气的多普勒雷达图象分析

利用常规天气资料和多普勒雷达资料产品,分析了2008年7月21日海拉尔周遍地区的强雷暴天气。结果表明,强雷暴天气一般产生在低层要有切变线等触发机制的不稳定能量大气环境中。当多普勒雷达图象上出现窄带回波即出流边界时,在其后部易产生强雷暴天气。     

利用成年母兔耳部皮肤上皮细胞生产克隆胚胎的研究

本研究以成年母兔耳部皮肤上皮细胞为核供体，对兔体细胞核移植技术中融合、激活以及不同来源受体卵母细胞的选择等环节进行了研究，比较了不同电场强度对重构胚胎融合率、分裂率的影响。结果表明，细胞在培养10代后仍增殖旺盛，呈多角型，具典型的上皮细胞形态。     

猪胰腺干细胞分离与培养

【目的】探寻一种简单的胰腺干细胞的分离方法,以便为糖尿病的细胞治疗研究提供丰富的种子细胞。【方法】采用胰酶消化法分离获得细胞,利用仅含有5%的血清的RPMI 1640培养基培养细胞,低浓度的血清使得细胞大量死亡漂浮,只留下少数贴壁的小圆细胞。而后将血清浓度提高到15%以上继续培养;采用免疫组化方法对获得的细胞是否具有胰腺干细胞特征予以检测,并测定了细胞的生长曲线。【结果】在血清浓度提高后每个小圆细胞能快速增殖并形成一个克隆,经过这样增殖后的细胞可以连续传代,目前已传至60代。经免疫组化检测,细胞表达PDX-1、GLUT-2、vimentin等胰腺干细胞的标志;细胞也表达Glucagon、insulin、somatostatin、polypeptide等胰腺内分泌细胞的标志.【结论】通过本方法获得的细胞经检测确定为胰腺干细胞,在体外可自发分化形成胰胰内分泌部4种主要细胞。     

大口鲶的繁殖技术

本文就大口鲶繁殖的生物学基础，人工繁殖技术作以总结，以指导大口鲶的繁殖工作。     

猪呼吸道疾病综合征的病因及防治

猪呼吸道病综合征即是一类具有呼吸道症状疾病的统称,感染猪的病死率极高,对养殖效益影响极大。猪呼吸道疾病主要感染体质较羸弱的猪,或是刚经历过生产的母猪和出生天数较少的幼仔猪。原因是这类猪群食欲较差,运动也会受到限制,因而,其免疫力较差,患病概率高,猪群病死率增加,极大降低了猪养殖户的经济效益。广大生猪养殖户要关注猪群的异常状况,及时发现和找出猪群患病的病因,并制定相应的防治措施,对症下药,减少养殖户的损失。     

卵母细胞和供核细胞对体细胞克隆的影响

克隆胚胎发育率太低和后代缺陷率高是克隆不能广泛应用于畜牧生产和生物医药的最大障碍.影响克隆效率的因素很多,过去20多年主要集中于改进和完善核移植程序方面.     

原始生殖细胞的人类ES细胞的分离克隆

本研究收集47例4-13周龄人流产胎儿分离PGCs，采用与其生殖嵴/腺或类似物胎儿成纤维细胞共培养的方式，获得了具小鼠ES细胞或EG细胞特征的人类ES细胞，该类细胞在体外可自发分化为类胚体，成纤维细胞样细胞，神经胶质细胞样细胞及心脏跳动样细胞团等，同样方法自4例大于17周龄胎儿未观察到人类ES细胞，研究表明，采用共培养法可以从4-13周龄流产儿的PGCs分离克隆到人类ES细胞，最适宜胎龄为7-10周龄。     

小鼠胎儿和牛睾丸成纤维细胞的冷冻保存

研究了冷冻保护液、平衡时间、降温速度、解冻液以及解冻方式对冷冻小鼠胎儿成纤维细胞和牛睾丸成纤维细胞活力的影响。结果表明,对小鼠胎儿成纤维细胞和犊牛睾丸成纤维细胞进行冷冻,冷冻液Ⅱ（０．４％ＢＳＡ）＋１．５ｍｏｌ／Ｌ乙二醇＋０．１ｍｏｌ／Ｌ蔗糖的ＰＢＳ液）的冷冻效果优于冷冻液Ⅰ（１０％的ＮＢＳ＋１０％ＤＭＳＯ的ＤＭＥＭ液）。用冷冻液Ⅱ对小鼠胎儿成纤维细胞和犊牛睾丸成纤维细胞进行冷冻,平衡时间可从２．