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为快速、灵敏、准确检测猫传染性腹膜炎病毒(feline infectious peritonitis virus,FIPV),以FIPV N基因为靶序列设计合成特异性引物及TaqMan探针,建立了一种FIPV实时荧光定量RT-PCR检测方法,并对该方法的特异性、灵敏度和重复性进行了试验。结果表明:该方法灵敏度高,最低检测限为3.4 copies/μL;特异性强,与狂犬病毒、猫疱疹病毒、猫杯状病毒、猫细小病毒、犬流感病毒、犬瘟热病毒等均无交叉反应;重复性好,批内变异系数为0.99%~4.13%,批间变异系数为1.29%~4.64%。以上结果说明,本试验建立的实时荧光定量RT-PCR检测方法特异、敏感、重复性好,适用于FIPV的快速检测。 相似文献
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[目的] 建立快速检测黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)的方法。[方法] 将吖啶酯(acridinium ester,AE)与AFB1单克隆抗体进行体外化学合成,分别合成了吖啶酯∶AFB1单克隆抗体摩尔比为5∶1、10∶1、15∶1、20∶1、25∶1的吖啶酯标记AFB1单克隆抗体(AFB1-AE),分析了不同摩尔比的检测效果,选择吖啶酯∶AFB1单克隆抗体为25∶1的AFB1-AE偶联物建立化学发光免疫分析法(chemiluminescence immunoassay,CLIA)。[结果] 获得对应的标准曲线回归方程为:y=-0.245Ln(x)+ 1.578 1,R2=0.985 7,IC50=81.48 pg/mL;对样品进行加标回收实验,加标回收率88.4%~106.0%,变异系数0.92%~2.10%。[结论] 将吖啶酯与AFB1单克隆抗体体外交联,可建立新的化学发光免疫分析方法。 相似文献
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以广西莪术(Curcuma kwangsiensis S.G.Lee et C.F.Liang)嫩叶为材料,采用单因素和正交试验设计建立和优化SSR-PCR反应体系和反应程序,对最适宜退火温度(Tm)进行筛选优化,对17对已公布的姜黄属通用性引物进行扩增试验,筛选出多态性好、条带清晰的引物。结果表明,建立了适合广西莪术SSR分析的反应体系和扩增程序,即在15μL体系中,DNA模板为30 ng/μL,3μL,Mix(包含DNTP、Mg2+、1×buffer、Taq酶)为5μL,dd H2O为6μL,引物为各0.5μL时,分析效果较好,扩增程序为94℃预变性5min;94℃变性30 s,根据不同引物的退火温度复性30 s,72℃延伸1.5 min,共35个循环;最后72℃延伸5 min;反应结束后,4℃保存。同时筛选出在试验材料中能产生较清晰主带的引物共12对,初步验证了应用SSR分子标记分析在广西莪术遗传多样性的可行性。 相似文献
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首次报道贵州4个新纪录种和1个新纪录变种,蝶形花科(Papilionaceae)山豆根属(Euchresta)山豆根(Euchresta japonica Hook.f.ex Regel)、毛茛科(Ranunculaceae)毛果扬子铁线莲(Clematis ganpiniana var.tenuisepala(Maxim)C.T.Ting)和厚叶铁线莲(Clematis crassifolia Benth.)、芸香科(Rutaceae)茵芋属(Skimmia)的黑果茵芋(Skimmia melanocarpa Rehd.et Wils.)、爵床科(Acanthaceae)马蓝属(Pteracanthus Bremek)弯花马蓝(Pteracanthus cyphanthus(Diels)C.Y.Wu et C.C.Hu)。其中,三豆根为国家二级重点保护植物,首次发现在贵州有分布。 相似文献
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近几年,随着各地体验旅游的不断深入发展,旅游者对于"休闲"回归自然的农业旅游的重视,体验旅游下的休闲农业旅游开发研究越来越受到重视。首先对陕西休闲农业旅游发展现状进行阐述,然后对陕西农业休闲体验式旅游进行ASEB分析。通过对体验旅游概念的分析,最后提出的陕西休闲农业体验旅游旅游开发策略。 相似文献
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