STAR基因与东湖杂交奶绵羊繁殖性状的关联分析

本实验旨在探究类固醇激素合成急性调节蛋白（Steroidogenic Acute Regulatory Protein,STAR）基因多态性与东湖杂一代奶绵羊发情鉴定评分、产羔数的相关性,鉴定出影响绵羊繁殖性能的关键性位点。本研究以339只东湖杂一代奶绵羊为研究对象,采用竞争性等位基因特异性PCR(KASP)技术对STAR基因的g.31959747T>C、g.31959875A>C2个位点进行基因分型,并利用GLM模型对SNP位点与发情鉴定评分和产羔数进行关联分析。结果表明,g.31959747T>C与奶绵羊发情鉴定评分呈极显著相关,TT型的发情表现更优,但与产羔数差异不显著;g.31959875A>C与发情评分和产羔数均无显著关系;聚合基因型与繁殖性状的关联分析结果表明,TCAC型个体在发情评分、平均产羔数方面均较低。综上,STAR基因g.31959747T>C位点是影响奶绵羊发情评分的关键性位点,可根据育种目标将g.31959747T>C位点作为提高奶绵羊同期发情效果的分子标记,同时将TCAC聚合基因型及时淘汰。本研究结果可为奶绵羊繁殖性状的选育...     

赛庚啶ELISA检测试剂盒的研制及其性能评价

基于直接竞争法原理酶联免疫技术研制了一种测定动物尿液中赛庚啶(CHP)残留量的检测试剂盒,并对试剂盒的检测限、特异性和稳定性等参数进行确定。通过在CHP分子上引入活性羧基,在EDC作用下分别偶联到KLH、BSA上形成CHP-KLH和CHP-BSA抗原,CHP-KLH抗原免疫BALB/C小鼠制得抗CHP单克隆抗体,经辣根过氧化物酶HRP标记抗CHP抗体,采用CHPBSA抗原包被酶标板,最终成功构建动物尿样中CHP残留量的竞争酶联免疫法检测体系,并进行性能测试评价。结果表明,吸光度百分比值与CHP质量浓度的对数在0.1~1.6μg/L呈线性关系,相关系数R~2为0.986,半数抑制浓度(IC_(50))为0.316μg/L,检测限为0.158μg/L,回收率在80%~110%,变异系数为2.0%~10.0%。方法具备良好的特异性,可用于动物尿样、血清及组织中CHP残留的快速检测。     

高效液相色谱法测定鸡蛋中的三聚氰胺

实验用高效液相色谱法测定鸡蛋中的三聚氰胺.鸡蛋样品经酸性缓冲液提取,混合阳离子固相萃取柱净化,提取物蒸发浓缩至干,流动相溶解,过滤用HPLC 进行分析.结果表明,此方法鸡蛋中三聚氰胺检测限为0.5 mg/kg,空白样品的加标回收率为92 %～103.5 %,能满足鸡蛋中三聚氰胺残留量检测的技术要求.     

QuEChERS-超高效液相色谱法-串联质谱法同时检测猪组织中赛庚啶及可乐定残留量

建立了Qu ECh ERS前处理结合超高效液相色谱-串联质谱同时检测猪组织中赛庚啶和可乐定残留量的方法。猪肉样品添加0.5 g C18粉,猪肝和猪肾样品添加3.0 g硫酸镁和2.0 g氯化钠,再分别加入10 m L 0.1%甲酸乙腈进行提取,提取液经浓缩后采用LC-MS/MS进行检测,内标法定量。该方法线性关系良好,猪肉、猪肝和猪肾中赛庚啶和可乐定在1~50μg/kg浓度范围内加标回收率分别为62%~112%和106%~121%,相对标准偏差均10%,方法检出限为0.5μg/kg。方法灵敏度高,选择性好,可作为猪组织中赛庚啶和可乐定残留量检测的确证方法。     

可乐定ELISA检测试剂盒的研制及其性能评价

本研究通过制备可乐定完全抗原,免疫新西兰大白兔,得到特异性多克隆抗体,并和HRP标记的羊抗兔,构建间接ELISA检测法试剂盒,并进行性能测试评价。结果表明,吸光度百分比值与赛庚啶质量浓度的对数在0.1-8.1μg/L呈线性关系,相关系数R₂为0.977,半数抑制浓度(IC₅₀)为0.675μg/L,检测限为0.2μg/L,回收率为81% ～109%,具备良好的特异性,可用于动物尿样、血清和组织中的可乐定残留检测。     

兴安升麻试管苗培养研究

以兴安升麻嫩茎为材料,进行了愈伤组织诱导和分化培养、不定芽生根和茎段生根继代繁殖培养,以及试管苗移栽和定植试验。结果表明,1/2 MS+BA 0.5 mg/L+2,4-D 2.5 mg/L+蔗糖35 g/L是愈伤组织诱导培养和继代扩增培养的适宜培养基;1/2 MS+蔗糖40 g/L+ZT 0.4 mg/L+NAA 0.1 mg/L是愈伤组织分化培养的适宜培养基;采用下部切口在10 mg/L IAA溶液中处理5 min,再接种到1/2 MS培养基上进行生根培养的方法是不定芽生根培养和生根继代繁殖培养的理想方法;试管苗移栽成活率为95.1%,定植成活率为98.4%,定植的试管苗保持了兴安升麻的全部植物学性状。     

液质串联法测定饲料中16种β-受体激动剂

建立检测饲料中16种β-受体激动剂的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC/MS/MS)分析方法。样品经酸性甲醇提取,浓缩后用甲醇:0.1%甲酸(20:80)溶解进样,经超高效液相色谱-串联质谱在多反应检测(MRM)模式下测定。结果显示:16种β-受体激动剂基质添加标准曲线在50～1 000μg/kg质量浓度范围内线性良好。在50～1 000μg/kg添加水平下,16种β-受体激动剂的加标回收率在65%～105%,相对标准偏差(RSD)均小于10%(n=6);该方法对动物饲料16种β-受体激动剂的定量限为0.05 mg/kg(信噪比>10),检出限为0.01 mg/kg(信噪比>3)。     

超高效液相色谱串联质谱法检测猪毛中赛庚啶的方法研究

建立了猪毛中检测赛庚啶残留量的超高效液相色谱串联质谱法。猪毛样品经β-盐酸葡萄糖醛苷酶解/芳基硫酸酯酶酶解,经混合阳离子交换柱净化、浓缩,以盐酸双苯拉林为内标,采用液相色谱串联质谱检测定量。本方法在0.1~10ng/mL的浓度范围内线性关系良好,相关系数r=0.9992。方法检出限为0.25ng/g,定量限为0.5ng/g,在0.5~10ng/g范围内的添加回收率为86.87%~102.13%,相对标准偏差11.7%。     

五个桑树品种的田间比较试验

在勉县刘家山村蚕桑试验基地进行了5个桑树品种的比较试验。强桑1号、陕桑305、鲁插2号品种表现较好,产叶量高,抗病性强;湖桑32号产叶量低,抗病性差;鲁插3号表现中等。     

超高效液相色谱-质谱法测定血浆和尿样地西泮

采用超高效液相色谱串联质谱联用仪分析猪血浆和尿液中的地西泮.血浆和尿液先经过β-盐酸葡萄糖醛苷酶水解,然后用乙酸乙酯振荡提取酶解液,分离上层有机溶剂蒸干,用乙腈溶解残渣,取上清液过滤后用LC-MS/MS进行检测.通过对提取方式和液相色谱分离条件的优化,建立猪尿和血浆中地西泮的LC-MS/MS检测方法.该方法中空白样品的加标回收率为81.6 %～105.4 %,RSD为3.8 %～13.6 %,检出限为0.5 μg/L.