枯草芽胞杆菌对斑节对虾饲养池水净化作用的初步研究

将枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)制剂施放于斑节对虾(Pcnaeus monodon)饲养池，利用血清学鉴定和TCBS培养基平板计数，分别监测养殖池水中B.subtilis和弧菌(Vibrio)的消长情况，并定期测定养殖水体的pH值、总碱度、COD值和亚硝酸盐、H2S浓度等水化学指标，研究了B.subtilis制剂对斑节对虾饲养池水水质的净化作用。结果表明，在饲养池中添加B.subtilis制剂后，池水的COD值、亚硝酸盐、H2S浓度比对照池有显著降低，而总碱度显著上升，pH值维持在8．02—8．60之间，表明B.subtilis制剂对净化斑节对虾饲养池水水质和调节养殖水体微生态结构稳定具有明显的作用。     

多杀菌素生产菌株发酵配方及条件的优化

以多杀菌素产生菌C121菌株为试验菌株进行发酵培养基的研究,探索不同碳源、氮源对多杀菌素生物合成的影响。经L18(37)正交筛选试验,最终筛选到一个发酵培养基的最佳配方。用菌株C121进行摇瓶发酵条件试验的结果表明:当500 mL三角瓶中装料40 mL,消前pH 7.0,转速为210 r/min,温度为30℃时是最佳发酵条件,其发酵效价达到586μg/mL。     

快生型大豆根瘤菌血清学特性的研究

以自新疆、黑龙江、辽宁、吉林、湖北、天津和北京等地分离的16株快生型大豆根瘤菌为供试菌,用交叉凝集反应比较研究了它们与目前国内外已报道的9株快生型大豆根瘤菌标准血清型菌株之间的血清学关系,研究结果表明：（1）菌株J711,NJ16、NJ111和A212均属O#-1（2048）血清型。（2）菌株RT15、Two-7和93F41与供试标准血清型菌株的菌体抗原均不相同,命名为O#-9、O#-10和O#-（11）3种新的血清型。菌株6-1为自凝菌株,其血清型为O#-0。（3）交叉抗原吸收试验结果表明,菌株92X10、C333、RT10和2056同属O#-5血清型,并可进一步区分为O#-（5ab）、O#-（5bcd）、O#-（5def）和O#-（5fg）4个血清亚型。菌株HA10-1-3、HA12-1-12和2120分属O#-6血清型的O#-（6ab）、O#-（6bcd）和O#-（6de）3个血清亚型。（4）将2048等6个标准菌株重新命名为O#-1,O#-2,O#-3,O#-4,O#-7和O#-8血清型。     

改变pH值、培养温度及凝集反应温度鉴定苏云金杆菌自凝菌株H-血清型

选取16株苏云金杆菌自凝菌株对其H血清型进行鉴定. 研究结果表明,在摇瓶培养基的pH值为9.0(消前)、培养温度为40 ℃时,可延缓自凝现象的出现;在试管凝集反应中,水浴温度为40 ℃,可延缓自凝现象的出现.在以上选择条件下,能明显地将凝集反应和自凝现象区分开,从而将16株自凝菌株的H-血清型分别鉴定为H3(7株)、H8(3株)、H14(3株)、H33(2株)和H40(1株).     

多杀菌素生产菌株的选育

对多杀菌素产生菌n-23-107的孢子采用逐步诱变的方式,先进行超声波处理,再用紫外线、氮离子注入、Co-Y射线等进行物理诱变,分别以不同诱变处理的正变菌株作出发菌株,获得了高产菌株C121,其发酵效价达到 460 ug加L,是出发菌株效价的171%。     

用血清学方法测定苏云金芽孢杆菌晶体蛋白含量

用苏云金芽孢杆菌ＨＤ－１、７２１６和ＣＴ－４３菌株晶体蛋白的碱溶和胰蛋白酶酶解产物作抗原，制备相应的抗血清。用环状沉淀反应、双相单扩散反应和火箭免疫电泳等技术测定了苏云金杆菌几个菌株和制剂的晶体蛋白的含量。用环状沉淀反应测定晶体蛋白的最低量为０．２２μｇ／ｍＬ，火箭免疫电泳为１５μｇ／ｍＬ，双相单扩散反应为６２μｇ／ｍＬ。生物测定的结果与几种血清学方法测定的结果有一定的相关性，菌株ＨＤ－１、７２１６和ＣＴ－４３的伴胞晶体经碱溶和胰蛋白酶处理后对小菜蛾幼虫的ＬＣ５０值分别为０．１４８、０．２４７和０．０９７μｇ／ｍＬ；经碱溶而未经胰蛋白酶处理的晶体蛋白对小菜蛾幼虫的ＬＣ５０值分别为１．８６７、３．１４７和１．０２２μｇ／ｍＬ，两种处理方法对晶体蛋白毒力影响很大。环状沉淀反应测定苏云金芽孢杆菌晶体蛋白含量灵敏度比火箭免疫电泳高，操作简便而快速；双相单扩散法灵敏度与火箭免疫电泳接近，但操作更简便     

多杀菌素高产菌株的选育

采用原生质体紫外诱变、等离子束辐射、^60Co-γ射线等诱变处理，对多杀菌素产生菌出发菌株C121进行诱变，通过菌块一薄层层析法初筛、摇瓶发酵复筛和终筛，最终获得产素水平比出发菌株提高174％的高产菌株Co329。经HPLC测定其发酵效价达1260μg／ml。     

观察放线菌形态的“玻璃纸”法的改进

玻玻纸洋菜平板透析培养法是观察放线菌形态的较好方法。但在实际操作中不易获得所要求的分散菌落,而必需用不同稀释倍数的孢子悬液分别涂抹培养皿,才可进行显微观察或显微照相。通过不断实践后,我们对这一方法作了以下的改进,较原法更省时省料,特介绍于下。1、将三张12×50mm大小的玻璃纸平行放在一张80×80mm大小的废报纸上,再盖上一张同样大小的废报纸,在此废报纸上再平行放三张玻璃纸,……如此一层废报纸,一层玻