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禽流感病毒非结构蛋白(AIV-NS1)抗体检测可作为禽流感病毒感染的诊断标签。在禽流感NS1抗体鉴别诊断试纸条研制成功的基础上,本试验采用人工感染的方法,探讨了H9亚型禽流感病毒感染肉鸡体内NS1特异性抗体的消长规律。结果表明,肉鸡感染后3d开始检测出NS1抗体,至11d阳性率达89%,然后快速下降,21d检出率下降至10%,26d后完全消失,NS1抗体阳性率高低与感染鸡发病及死亡率高低明显一致。而对照组和疫苗免疫组在整个试验过程中NS1抗体检测均呈阴性。感染组血凝抑制抗体出现早于疫苗免疫组,但二者效价持续上升的结果类似。通过肉鸡人工感染试验,揭示了禽流感病毒感染后肉鸡体内NS1抗体消长情况,同时也证实本研究室研制的AIV-NS1抗体检测试纸条,不仅可以从患有呼吸道感染的病鸡中快速诊断出禽流感病毒感染,而且也可以鉴别禽流感疫苗免疫与病毒感染的鸡群。 相似文献
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禽流感病毒感染与疫苗免疫鉴别诊断试纸条的研制及应用 总被引：1，自引：0，他引：1
【目的】结合胶体金免疫层析技术建立一种适合养鸡业基层生产人员使用的便捷的快速诊断禽流感病毒感染鸡群的方法。【方法】将含禽流感病毒非结构基因ns1的表达载体KG-NS1转化入BL21（DE3）感受态细胞,筛选阳性克隆进行诱导表达,表达产物用GST亲和层析柱进行纯化和Western-blot分析;以NS1重组蛋白为诊断抗原,抗鸡IgFc的单抗标记的胶体金为示踪物,结合免疫层析技术,组装禽流感病毒NS1抗体的免疫胶体金鉴别诊断试纸条,评价其灵敏度和特异性,并对试验感染和临床采集的血样进行检测。【结果】NS1重组蛋白分子量约为52 kD,具有免疫学活性。在25 min内用肉眼观察到禽流感病毒感染鸡血清和NS1蛋白免疫鸡血清在试纸条的检测线处出现明显的棕红色,呈明显的阳性反应,而其它病原的血清在试纸条的检测线处不出现任何颜色,呈阴性反应。而且感染鸡群的NS1抗体在感染后3 d即可检测到,感染后1～2周为高峰期,维持时间约1周,检测阳性率为80%左右。临床样品的阳性率为9.1%。【结论】试纸条使用方便,操作简单,25 min内可以用肉眼判断结果,可区分禽流感疫苗免疫和野毒感染家禽,具有很大的推广应用价值。 相似文献
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2013年夏季山东地区某刺参育苗场处于保苗期的刺参苗种暴发 腐皮综合征疾病,表现为附着力下降、棘刺顶端溃烂、排脏、表皮溃疡和自溶等症状。自患病个体病灶组织分离优势细菌,并利用形态学观察、生理生化测定、回接感染、16S rDNA基因序列分析等方法完成致病原的鉴定。此外,通过对发病前后养殖系统中优势菌丰度的变化,追踪确定了所分离病原菌的致病阈值。结果显示,从患病参苗体表病灶处分离的一株优势菌HP130917A-1,经回接感染证实,该菌株具有较强的致病力,其对刺参苗种的半致死浓度为1.2×106 CFU/ml。生理生化结合分子鉴定表明,该菌株为溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)。此外,完成了患病池保苗期间池水和附着基表面微生物菌群结构动态分析,共分离得到了6种主要优势菌,分别为溶藻弧菌、需钠弧菌(Vibrio natriegens)、副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)和马胃葡萄球菌(Staphylococcus equorum)。溶藻弧菌一直是养殖系统中优势度最高的种类,且随着附着基在保苗池中时间的延长,其在附着基表面沉积物中的浓度越来越高。到第50天时,浓度达到8.97×106 CFU/cm2。而此时系统中参苗开始暴发腐皮综合征疾病,可将此浓度视为该病原的致病阈值。因此,在夏季保苗过程中应加强养殖系统中弧菌总数的监测,制定适宜的附着基更换频率,建立和优化刺参保苗工艺,以期为刺参苗期疾病防控和优化健康养殖管理提供理论依据和参考。 相似文献
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以青花菜中青9号品种为试材,从灭酶处理、干燥处理和提取条件3个方面对青花菜花球中总硫代葡萄糖苷提取工艺进行优化。运用氯化钯分光光度法,比较分析经过不同处理后的青花菜花球总硫代葡萄糖苷含量,以期筛选出总硫苷提取的最佳工艺。结果表明,不同处理对青花菜花球中总硫代葡萄糖苷含量的影响有一定差异。加入100℃蒸馏水后80℃热处理15 min的灭酶处理,70℃鼓风干燥,乙醇浓度90%、料液比1∶9、提取温度60℃、提取时间30 min的提取条件下测得青花菜花球中总硫苷含量(b)最高,为414.98μmol·g-1,此处理为青花菜花球中总硫苷提取最佳工艺。 相似文献