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CRISPR/Cas9系统是一种广泛应用于细菌、酵母、动物和植物中的基因组定点编辑技术,但该编辑系统的使用范围受PAM (proto-spacer-motif)位点NGG的限制。本研究通过突变Streptococcus pyogenes Cas9 (SpCas9)编码氨基酸(1135位的天冬氨酸D突变成缬氨酸V, 1335位的精氨酸R突变为谷胱氨酸Q, 1337位的苏氨酸T突变为精氨酸R,命名该突变子为Cas9-VQR)改造其识别PAM为NGA的位点以扩大其使用范围。并使用玉米Ubi启动子启动Cas9-VQR基因、优化SpCas9的密码子、加入保守的核定位信号序列、增加单子叶植物中保守的3′UTR序列和使用水稻U6启动子启动gRNA来修饰该编辑系统。结果表明Cas9-VQR系统能够识别PAM为NGA的位点,并进行有效的切割。体外酶切活性检测结果表明Cas9-VQR的切割效率为5%~70%。水稻转化检测结果表明Cas9-VQR的切割效率约为27.5%~70.5%,平均切割效率为46.23%。本研究拓宽了CRISPR/Cas9系统在作物中的使用范围,特别是NGA PAM位点较高的作物。 相似文献
14.
利用国外种质资源创造的20 份高世代马铃薯无性系为试材,以尤金为感病对照,克新18 号为抗病对照,采用自然
病圃和人工接种的鉴定方式进行疮痂病抗性评价,利用SSR 分子标记分析试材之间的亲缘关系,并对比SSR 遗传相似性系
数聚类结果和试材抗病性分类结果,探究利用SSR 分子标记辅助筛选疮痂病抗病资源的可行性。从试验地土壤和感病块茎
共分离纯化具有链霉菌特征的菌株278 份,其中240 份来自于块茎,38 份来自于土壤。具有致病力的菌株127 株,经鉴定
全部属于Streptomyces scabies 菌种。试材间的抗病性存在明显差异,可分为高抗、中抗、中感和高感4 个类型。人工接种与
自然病圃抗性鉴定结果存在极显著相关(R2=0.946 7)。抗病类型与感病类型通过SSR 遗传相似性系数聚类大致可以区分。 相似文献
15.
通过对50个香菇(Lentinula edodes)栽培菌株的β_1-微管蛋白部分基因进行测序、聚类和构建多态性图谱。结果表明:含有3条不同序列的菌株数为1,含有2条不同序列的菌株数为37,含有1条序列的菌株数为12;89条序列分为3个类型:Ⅰ型包括66条序列,Ⅱ型包括12条序列,Ⅲ型包括9条序列;根据对基因序列的分型,30个菌株属于Ⅰ型,11个菌株属于Ⅰ和Ⅱ型,5个菌株属于Ⅰ和Ⅲ型,1个菌株属于Ⅱ和Ⅲ型,1个菌株属于Ⅲ型;Cr02属于Ⅰ、Ⅲ和待定型,广香9号属于Ⅰ和待定型。 相似文献
16.
<正>从春季走到夏季,从旺季走到淡季,任肥料市场风云变化,未曾经历过大起大落的磷肥俨然保持着一副"忍者"姿态。以往磷肥在春季农用市场结束后,虽然国内需求会遇冷,但出口方面也会稍微助力一把,但从今年的市场表现来看,当前的出口市场也有些心有余而力不足的意思。短期内不温不火的磷肥市场在后市还将受哪些因素影响? 相似文献
17.
<正>化肥行业是我国石油和化学工业战略性基础产业之一。长远来看,化肥仍将是保障农业生产需求的主要手段,还需要多学科协同创新,多产业协调发展。化肥行业未来的主要工作将以绿色消费为导向,大力调整产业结构和产品结构,降低资源开发强度,减少各环节投入品的使用,减少污染物的产生,推进化肥产业向减量化、高效化、智能化与环境和谐共生的可持续发展方向迈进。 相似文献
18.
<正>上半年已经结束,各个肥种的答卷已经交出,没有辉煌过也没有惨败过的磷肥只能说是平淡收场。总体来看,磷肥市场整体销售较往年有所下滑,市场需求疲软,原材料价格频繁波动对磷肥成本影响较大,企业利润逐渐降低。而本以为能够打一个翻身仗的出口市场也屡遭滑铁卢。进入7月,前期一直备受期待的秋季备肥需求能够为磷肥市场带来转机吗? 相似文献
19.
20.
结合临床工作经验,设计头皮脑电图电极定位装置,探讨头皮脑电图确定电极位置的更优方法。该装置确定电极位置用时短,方法简单,步骤精炼,定位准确,被医务人员和受检者普遍接受。 相似文献