正交设计优化中药类植物提取物组方

为制备可替代饲用抗生素的中药类复合植物提取物,首先以抑菌率、抗炎率和抗氧化IC₅₀值为评价指标,从19种中药类植物中遴选出石榴皮、桂枝、厚朴、青蒿和鸡血藤5种原料作为复合提取物组分;然后采用L₁₆(4⁵)正交试验设计优化组分不同配比,对试验结果进行极差分析,获得分别具有最佳抑菌(F_ab)、抗炎(F_ai)和抗氧化(F_ao)功能的3个组方,其组分中厚朴、鸡血藤、青蒿、桂枝和石榴皮的比例依次为7∶13∶6∶9∶1、7∶13∶4∶1∶1和3∶13∶4∶1∶7。验证试验结果显示:F_ab最小抑菌浓度为125 mg·mL^-1,F_ai抗炎IC₅₀值为0.144 mg·mL^-1,F_ao抗氧化IC₅₀值为0.222 mg·mL^-1。通过以上研究,获得兼具抑菌、抗炎和抗氧化功能的复合植物提取物最优组方3个。     

复合植物提取物替代饲用抗生素对断奶仔猪生长性能和血清指标的影响

本试验旨在研究饲粮中添加复合植物(含石榴皮、艾叶、南五味子和吴茱萸)提取物替代饲用抗生素对断奶仔猪生长性能和血清指标的影响。试验1:选取8 kg、30日龄左右的断奶仔猪160头,随机分为4组,各组分别在基础饲粮中添加金霉素107 mg/kg+黄霉素40 mg/kg(对照)及0.05%、0.10%和0.20%的复合植物提取物,每组4个重复,每个重复10头仔猪,试验期28 d。试验2:选取11 kg、40日龄左右的断奶仔猪120头,随机分为3组,无抗组采用基础饲粮,另外2组分别在基础饲粮中添加金霉素67 mg/kg+黄霉素20 mg/kg(抗生素组)和0.10%的复合植物提取物组,试验期35 d。试验1结果显示:与对照组相比,各复合植物提取物组仔猪平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)均无显著变化(P0.05),且0.10%的添加量具有较好的ADG,比对照组提高2.44%。试验2结果显示:与无抗组相比,0.10%的复合植物提取物可使仔猪ADG显著提高21.39%(P0.05),使血清中白蛋白(ALB)、胆固醇(CHOL)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和一氧化氮(NO)含量均显著降低(P0.05),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力显著升高(P0.05),铜蓝蛋白(CER)活力显著降低(P0.05);与抗生素组相比,0.10%的复合植物提取物可使仔猪ADG显著提高15.07%(P0.05),使血清中尿素氮(UN)、LDL-C和NO含量均显著降低(P0.05)。综上所述,0.10%的复合植物提取物可替代饲用抗生素(金霉素+黄霉素),提高仔猪的生长性能,具有抗应激和抗氧化功能。     

自然四倍体泥鳅雄核发育二倍体染色体组构成研究

为探究鱼类雄核发育新途径及自然四倍体泥鳅所产生的配子染色体组构成,采用自然四倍体泥鳅(4n=100)为父本、二倍体泥鳅(2n=50)为母本进行杂交,受精后5 min将受精卵放入3℃水中处理60 min诱导雄核发育二倍体泥鳅,并对其后代的血红细胞核体积、染色体核型、Ag-NORs带型及荧光原位杂交(FISH)信号等进行了研究。结果表明:对照组杂交三倍体泥鳅血红细胞核体积为(38.29±3.14)μm³,处理组雄核发育二倍体泥鳅血红细胞核体积为(27.92±3.58)μm³,二者血红细胞核体积之比为1.37∶1;杂交三倍体泥鳅胚胎染色体数目3n=75,核型公式为15m+6sm+54t,NF=96,雄核发育二倍体泥鳅胚胎染色体数目2n=50,核型公式为10m+4sm+36t,NF=64;杂交三倍体泥鳅胚胎染色体中,在3个染色体短臂的端部检测到3个FISH杂交信号,雄核发育二倍体泥鳅胚胎染色体中,在2个染色体短臂的端部检测到2个FISH杂交信号;杂交三倍体泥鳅染色体和间期核中,呈现出Ag-NORs数目为1~3个,雄核发育二倍体泥鳅胚胎染色体和间期核中,呈现出Ag-NORs数目为1~2个。研究表明,雄核发育二倍体泥鳅的染色体组构成为2套染色体组,表明自然四倍体雄性泥鳅能产生二倍体(2n)配子,该结果为自然四倍体雄性泥鳅是具有4套染色体组的遗传四倍体提供了重要的遗传学证据。     

大豆黄酮对母仔猪生产性能和免疫功能的影响

研究妊娠后期和哺乳期日粮中添加大豆黄酮对母仔猪生产性能和免疫功能的影响.试验选取20头3～6胎、妊娠74 d的长×大母猪,随机分为2组.对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中添加15 mg·kg-1大豆黄酮至哺乳期第7d.结果表明,日粮中添加大豆黄酮母猪繁殖性能无显著影响.日粮中添加大豆黄酮极显著提高妊娠母猪98 d血清IgM浓度,显著提高母猪初乳中IgA、IgG的浓度和哺乳母猪14 d常乳中IgM的浓度.母猪日粮中添加大豆黄酮,显著提高仔猪7d和14 d血浆IgM浓度.试验结果显示,在妊娠后期和哺乳期日粮中添加大豆黄酮有助于增强母猪免疫功能,提高乳中免疫活性物质浓度.     

桑黄菌袋提取物对葡聚糖硫酸钠诱导小鼠结肠炎的防治作用

为了将人工栽培桑黄后的废弃物菌袋应用于动物疾病防控,研究桑黄菌袋提取物(SHM)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠结肠炎的防治效果及其作用机制。结果显示:与正常对照组相比,DSS组的小鼠体质量极显著降低(P<0.01),血浆中白细胞介素1β(IL-1β)和髓过氧化物酶(MPO)的含量极显著升高(P<0.01),结肠长度极显著变短(P<0.01),结肠组织增厚水肿,大量的炎性细胞浸润,结肠组织Toll样受体4(TLR4)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、泛素结合酶13(Ubc13)、细胞核因子κB p65(NFκB p65)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-1β、白细胞介素6(IL-6)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体热蛋白结构域亚家族成员3(NLRP3)和凋亡相关斑点样蛋白(ASC)的基因表达极显著升高(P<0.01);与DSS组相比,给予375 mg/(kg·d) SHM的小鼠体质量显著增加(P<0.05),血浆中IL-1β和MPO含量显著降低(P<0.05),结肠长度显著增加(P<0.05),结肠组织形态得到恢复,但给予125 mg/(kg·d) SHM的小鼠上述指标变化不显著(P>0.05);与DSS组相比,给予375 mg/(kg·d) SHM的小鼠结肠中IL-1β、IL-6和NLRP3基因的表达显著降低(P<0.05)。上述结果表明,SHM在一定剂量下对DSS诱导的小鼠结肠炎有良好的防治效果,其防治作用可能是通过降低TLR-4通路下游蛋白IL-1β和IL-6的基因表达,以及调控NLRP3的表达以降低IL-1β蛋白的活化来实现的。     

单宁酶水解石榴皮多酚的工艺优化及酶解产物鉴定

从石榴皮中提取的多酚具有抗炎、抗氧化、抗癌等多种生物活性,但是其中的大分子的鞣花单宁如安石榴苷(PG)不能被动物胃肠道直接吸收,需要先水解成小分子物质如鞣花酸(EA)才能被吸收进入血液来发挥其生物功能。本试验利用单宁酶将石榴皮多酚中的大分子单宁(相对分子质量500)水解为小分子酚酸,旨在优化酶解工艺及产物纯化工艺,阐明酶解前后石榴皮多酚在成分上的变化,为石榴皮多酚作为促进动物健康的功能性饲料添加剂的开发利用提供基础数据。通过比较单宁酶水解前后石榴皮多酚的高效液相色谱指纹图谱,确定PG降解率和EA生成率为水解程度检测指标后,利用单因素试验和正交试验优化酶解条件。通过静态吸附和动态吸附试验确定大孔树脂纯化条件,并用液相色谱-质谱联用技术鉴定酶解前后石榴皮多酚在成分上的变化。结果显示:最佳酶解条件为pH 5.2、温度45℃、加酶量30 mL/g底物、底物浓度4 g/L,时间16 h。最佳酶解产物纯化条件为D101型大孔树脂,95%乙醇为洗脱剂,上样体积为300 mL,洗脱体积为120 mL。高效液相色谱检测显示原石榴皮多酚中含有43.64%的PG(相对分子质量1 084)、4.85%的EA(相对分子质量302),酶解产物中PG含量为0.00%、EA含量为45.73%。原石榴皮多酚中分析出7种主要多酚化合物,质荷比(m/z)分别为1 083、1 083、783、757、633、401、300,相对分子质量分布在302~1 084;酶解产物中分析出4个主要多酚化合物,m/z分别为600、300、291、247,相对分子质量分布在248~602。本试验利用单宁酶将含大量以PG为主的鞣花单宁的石榴皮多酚水解成富含小分子多酚EA的酶解产物,并优化建立了最佳酶解条件及酶解产物纯化条件,可为石榴皮多酚的开发及其在饲料生产中的应用提供基础数据。     

清燥合剂联合硝酸甘油软膏治疗血热肠燥型肛裂的疗效观察

目的 观察清燥合剂联合硝酸甘油软膏治疗血热肠燥型肛裂的临床疗效。方法 选取72例肛裂、中医辨证分型为血热肠燥型的患者,随机分为对照组和观察组,每组36例。对照组予硝酸甘油软膏局部外涂,观察组在对照组基础上予清燥合剂口服,两组均治疗7 d,比较两组疼痛评分、便秘程度评分、便血程度评分、裂口愈合时间。结果 观察组总有效率为80.56%,对照组总有效率为58.33%,两组有效率差异有统计学意义（P<0.05）;观察组疼痛评分、便秘程度评分、便血程度评分等方面效果均优于对照组（P<0.05）,观察组裂口愈合时间较对照组缩短（P<0.05）。结论 清燥合剂联合硝酸甘油软膏治疗血热肠燥型肛裂,能够显著缓解疼痛,改善便秘、便血症状,促进裂口愈合,值得临床推广。     

桑黄子实体中多酚含量测定的方法学研究

为优化桑黄子实体中多酚含量的测定方法,本研究采用单因素考察实验,分别考察了桑黄子实体的粉碎粒度、提取溶剂、提取方式、料液比、提取时间等因素对桑黄多酚提取率的影响,在确定最优提取条件后,进一步考察该提取条件下磷钼钨酸显色法测定桑黄多酚的精密度、重复性、回收率、中间精密度等参数,最后利用该提取测定方法测定10份浙江产区的不同生产批次的桑黄子实体的多酚含量。结果显示,粉碎粒度为过三号筛、料液比1:100(质量体积比)、50%乙醇70 ℃水浴回流3 h是桑黄多酚的最优提取条件。该提取条件下磷钼钨酸显色法测定同批次桑黄样品的精密度、重复性、回收率、中间精密度均良好,相对标准偏差均小于2%。用该方法测定的产自浙江省的10批桑黄样品多酚含量为3.98%~8.54%。以上研究结果为浙江产区桑黄的多酚含量测定提供方法学依据和参考。