中国原生之星——唐鱼

唐鱼最早是1930年，生物学家林书颜等在广州北郊的白云山黄婆洞旅游时，偶然发现的，并加以报道，后来人们称之为白云山金丝鱼，当地人则称它为红尾鱼。因其产自中国，在西方，人们尊称这种鱼为“唐鱼”，目前这一名称已被国际学术界广泛采用。唐鱼为我国特有的品种，仅分布于广东白云山、花县以及广州附近的山区溪流中，但日前已难于在自然界中找到其踪迹。由于唐鱼种群小，野外繁殖能力不强，加之人类的开发活动，造成它所分布区的山林毁坏，水土流失，山涧断流或改道，生态环境发生改变。     

唐鱼β-肌动蛋白基因启动子的分离及其驱动活性的检测

利用PCR技术克隆唐鱼（Tanichthys albonubes）β-actin基因。所克隆的β-aetin基因片段为1464bp，包含长为1374bp的启动调控区和90bp的部分开放阅读框。启动调控区包括105bp的β-actin基因上游调控序列、第一个外显子和第一个内含子。上游调控序列中含有对转录起重要作用的CAAT Box、TATA Box、CArG Box等元件。将唐鱼β-actin启动调控区克隆到红色荧光表达载体pDsRed2-1上，并显微注射到唐鱼受精卵中，荧光显微镜观察红色荧光蛋白（RFP）的表达。结果表明，RFP在转基因唐鱼中的表达阳性率较高，最高可达51．8％，且RFP的表达水平较高。PCR检测转基因唐鱼的部分器官组织，在被检组织器官中均能检测到外源RFP基因；而RT-PCR以及Southern blot验证显示RFP mRNA的表达有所不同；Southern blot检测肌肉组织基因组DNA，可见比阳性载体大的杂交条带。说明所检测的组织中已发生外源基因RFP的整合，但有些组织存在表达水平较低或者不表达的现象。本实验分离到的β-actin基因启动子序列具有有效的驱动功能，可启动外源基因在唐鱼体内的高效表达，从而为下一步进行功能基因的转化研究奠定基础。     

唐鱼的繁殖行为和胚胎发育研究

观察总结了唐鱼的几种繁殖行为,即占区行为、张鳍行为、对峙行为、撞击行为、攻击行为、求偶行为以及交配行为.同时,在控温条件下,用解剖镜和显微镜观察了不同温度条件下唐鱼的胚胎发育,将唐鱼的胚胎发育过程划分为29期.分析了水温变化对唐鱼胚胎发育速度的影响,唐鱼胚胎发育的最适温度范围为24～27℃.对唐鱼的保护提出了建议.     

红色荧光蛋白基因在转基因唐鱼中的表达

在成功构建斑马鱼肌球蛋白轻链2启动子转红色荧光蛋白基因唐鱼Tanichthys albonubes可遗传品系的基础上,作者采用荧光显微镜观察和用RT-PCR技术对外源基因在唐鱼体内的表达情况进行检测。结果表明:红色荧光蛋白基因在F3代唐鱼体内的表达最早出现在受精后19 d,多数个体的表达集中在25~30日龄,最晚的表达个体出现在35日龄;红色荧光蛋白的表达主要分布于肌肉、心脏、肝脏、脾、鳃、鳔、肠和性腺,在肌肉、肝脏、鳃组织中的相对表达量较其它组织高,而在表皮和鳍条中没有检测到外源基因的表达。虽然红色荧光蛋白在转基因唐鱼后代出现表达迟缓、表达特异性改变的现象,但在外源基因后代中的遗传和表达在总体上还是稳定的,有望培育出转红色荧光蛋白基因唐鱼品系。     

铜、镉、锌对唐鱼的急性毒性及安全浓度评价

采用静水法生物测试研究铜(Cu 2)、镉(Cd 2)和锌(Zn 2)对唐鱼的急性毒性及安全浓度评价。其目的在于评价水环境中Cu 2、Cd 2和Zn 2对鱼类的影响,为渔业部门制订水质标准提供理论参考数据。结果表明:Cu 2对唐鱼为剧毒物质,Cd 2为高毒物质,Zn 2为中毒物质。3种重金属毒性依次为Cu>Cd>Zn。Cu 2、Cd 2和Zn 2对唐鱼的24、48、729、6 h的LC50分别为0.166、0.079、0.051、0.039 mg/L,9.051、6.404、4.9064、.447 mg/L,35.43、26.53、20.66、16.30 mg/L,其安全质量浓度分别为0.004、0.4451、.630 mg/L。唐鱼对Cu 2敏感,是一种较理想的环境污染指示生物。     

唐鱼的生物学特征

唐鱼Taniehthys albonubes，隶属鲤形目，鲤科，俗称红尾鱼、金丝鱼、彩金线鱼、白云山鱼，亚热带小型淡水鱼，最早（1932年）发现于白云山和花县、广州附近的山溪，后来发现于清远县、深圳龙岗区和香港新界区的山涧，最近（2008年8月）又发现于陆河县山区的溪流，为我国华南地区的特有种。     

唐鱼的生物学特征

唐鱼Tanichthys albonubes,隶属鲤形目,鲤科,俗称红尾鱼、金丝鱼、彩金线鱼、白云山鱼,亚热带小型淡水鱼,最早(1932年)发现于白云山和花县、广州附近的山溪,后来发现于清远县、深圳龙岗区     

唐鱼全人工繁殖试验

唐鱼是国家Ⅱ级保护水生野生动物。通过模拟唐鱼生长繁殖的生态环境，实现其全人工繁殖，并对人工孵化、人工育苗、人工饲养及病害防治等环节进行研究。     

转红色荧光蛋白基因唐鱼的遗传分析和生物学研究

转红色荧光蛋白基因唐鱼(Tanichthys albonubes)测交获得实验鱼,以表达红色荧光蛋白为表型性状,采用点杂交和遗传学分析相结合的方法,研究外源基因的遗传传递规律,并对转基因唐鱼和非转基因唐鱼的生长和繁殖等方面进行了比较.结果显示:测交后代表型的分离规律基本符合经典的孟德尔单显性基因遗传模式,外源基因属于单位点整合,测交后代中没有发现沉默整合个体;实验鱼的生长和可量性状对比实验表明,转基因唐鱼和非转基因唐鱼在仔鱼期到性成熟之间,生长速度无显著差异,性成熟个体的外部形态除体色外也无差别,繁殖力方面基本无显著差异.本研究结果表明了培育转红色荧光蛋白基因唐鱼纯系的可行性;同时在生长、繁殖方面的研究结果为评价转基因唐鱼的生态安全奠定了基础.