注射hCG后不同时间猪所排卵泡内COC的形态和卵母细胞减数分裂进程

研究了超排处理注射 h CG后不同时间猪卵丘卵母细胞复合体 (COC)的回收率和形态、卵母细胞减数分裂进程以及 COC形态与生发泡 (GV)染色质构型之间的关系。结果表明 :(1)注射 h CG后 4 h COC的回收率为 5 3.1% ,明显低于注射 h CG后 18、2 2、2 4 h(71.2 %、76 .5 %、70 .0 % ,P<0 .0 5 ) ;(2 )注射 h CG后 18、2 2、2 4 h收集的 COC分别有98.9%、98.0 %、91.4 %的卵丘已经发生扩展 ,而注射 h CG后 4 h收集的 COC则无一发生卵丘扩展 ;(3)注射 h CG后 4h,有少量卵母细胞开始恢复减数分裂 ,至 18h左右开始发生生发泡破裂 (GVBD) ,到 2 2～ 2 4 h有 5 8.4 %～ 6 0 .0 %的卵母细胞发生 GVBD;(4)外层卵丘扩展、放射冠轻微扩展的卵母细胞处于 GV- 1期的比例 (6 9.6 % )明显高于卵丘完全扩展的卵母细胞 (47.8% )和放射冠部分扩展、卵丘已经脱落的卵母细胞 (2 9.3% ) ,而后 2者发生 GVBD的比例(40 %、4 4 % )则略高于前者 (2 7% )。     

酵母培养物及其在养殖业中的应用

酵母培养物(YC)作为一种微生态制剂，近十年来在养殖业中得到广泛应用。大量试验表明，YC对猪、鸡特别是牛的生产性能有显的促进作用，在水产养殖中的试验也证明了YC有很好的效果。现就酵母培养物近些年来在动物生产中应用情况作一综述，同时，对其作用机制及存在的问题进行探讨。     

乳铁蛋白肽的功能及应用研究进展

传统抗生素在人畜预防和临床医学领域长期应用,尤其是饲料中预防性抗生素的全面使用在一定程度与范围几达滥用之嫌,由此带来的人和动物药残和病原菌耐药性形成与发展等问题日益尖锐,使得曾经几乎万能的抗生素的功过是非饱受争议。与此同时对诸如抗生素肽等新产品研发已经成为目     

鸭抗菌肽Dcath多克隆抗体的制备及鉴定

为制备效价高、特异性强的鸭抗菌肽Dcath多克隆抗体,并对制备的多克隆抗体进行鉴定和初步应用,采用Fmoc固相化学合成法合成鸭抗菌肽Dcath的成熟肽段,与血蓝蛋白偶联后,与弗氏完全佐剂乳化,按照免疫程序免疫接种大白兔,采集免疫兔血清,亲和层析纯化多抗,ELISA检测多抗效价,以制备的多抗为一抗,用Western blot检测鸭血外周异嗜性粒细胞中Dcath的表达,用免疫组化(IHC)检测鸭回肠、肾脏组织中Dcath的表达。结果显示,合成的鸭抗菌肽Dcath纯度达98.28%,经ELISA检测,纯化的兔多抗效价达到1∶128000,经Western blot检测,鸭血外周异嗜性粒细胞大量表达Dcath,经免疫组化检测,鸭Dcath在肾脏及回肠组织细胞中广泛表达。结果表明,成功制备了鸭抗菌肽Dcath多克隆抗体,效价高、特异性强,为深入研究鸭抗菌肽Dcath的生物学特性提供了技术支持。     

抗菌肽Lactoferricin B的原核表达及其纯化

牛乳铁蛋白活性多肽(Lactoferricin B,LfcinB)是一种阳离子型抗菌肽,因其具有多种生物学功能,现已被认为具有能够替代传统抗生素的发展前景。然而,由于传统的分离制备方法存在诸多弊端,所以基于基因工程的原核表达技术在制备高纯度和高效表达的该蛋白方面具有极其深远的意义。研究旨在摸索出一套完整的利用原核表达技术制备LfcinB的分子生物学方法。依据大肠杆菌密码子偏爱性的原则,设计了LfcinB的基因序列,通过人工合成的方法获得该基因的优化序列,借助Bam HI和Sal I双酶切、连接等手段将其构建到原核表达载体pGEX-4T-2上,获得重组表达载体pGEX-4T-2-LCB,将该载体转化E.coli Rosetta(DE3)。使用IPTG诱导,结果发现LfcinB在大肠杆菌中表达量超过20%。通过一系列蛋白纯化技术分离得到纯度达到95%以上的LfcinB融合蛋白。抑菌试验结果表明,重组抗菌肽LfcinB融合蛋白具有很好的抑菌活性。研究结果为人们使用基因工程技术制备抗菌肽LfcinB提供了具有重要参考价值的技术路线和理论依据。     

鸭抗菌肽Cathelicidin的衍生物设计及抑菌机制研究

鸭抗菌肽Cathelicidin分子[Cath(1-20)]富含疏水性氨基酸及正电荷,通过人工方法设计合成Cath(1-20)的截短肽衍生物,筛选新型安全Cath(1-20)衍生肽,探讨其作用机制。结果表明,与母肽Cath(1-20)相似,三种衍生肽Cath(5-20)、Cath(4-20)、Cath(3-20)均具有明显广谱抑菌活性,MIC值在1~8μmol·L~(-1)范围内,但仅Cath(5-20)溶血及细胞毒性明显降低,治疗指数达19.5,显著高于Cath(1-20)、Cath(4-20)及Cath(3-20)。Cath(1-20)及其衍生肽可破坏E.coli UB1005的内膜完整性,产生去极化作用,并存在时间和剂量依赖效应;透射电镜结果显示Cath(1-20)及Cath(5-20)可破坏细菌细胞膜。研究证实氨基端的色氨酸对鸭抗菌肽Cath(1-20)溶血及细胞毒性起关键作用,其作用靶点主要为细菌细胞膜。     

乳铁蛋白的生物学功能及其在畜牧中的应用

乳铁蛋白是一种多功能糖蛋白,具有多种生物学功能。文章就乳铁蛋白的分子结构、生物学功能、在动物生产中的应用及其前景进行了阐述。     

抗菌肽FAPs在毕赤酵母中的重组表达研究

将4种抗菌肽Fowlicidin-2、Cecropin B、Cecropin A(1-8)-Melittin(1-18)和Thanatin串联,并在每种抗菌肽N-末端加上Kex2蛋白酶裂解位点,根据毕赤酵母密码子偏爱性,化学合成四种抗菌肽(Fusion Antimicrobial Peptides,FAPs)编码基因,连接到pPICZαC载体中,构建分泌型重组表达载体并转化毕赤酵母。经甲醇诱导后,Tricine-SDS-PAGE分析获得与目蛋白大小一致特异表达蛋白条带,每升发酵液上清含量达到32 mg。初步鉴定FAPs对大肠杆菌(E.coli)ATCC25922、金黄色葡萄球菌(S.aureus)ATCC25923、鼠伤寒沙门氏菌(S.syphimurium)C77-31和绿脓杆菌(P.aeruginosa)ATCC27853均有抑菌活性,且对S.aureus ATCC25923活性最强,最小抑菌浓度MIC为8.0μg·mL-1。     

抗菌肽在畜牧生产中的应用

抗菌肽是一类带正电荷的两亲性小分子肽的总称。很多抗菌肽是宿主非特异性防御系统的重要组成部分。它们不仅对细菌、真菌有广谱的抗菌活性，对病毒、原虫及癌细胞也有作用。由于它们的抗菌作用机制独特，不易诱导耐药菌株的产生，在当前抗药性蔓延和筛选新的抗生素愈发困难的情况下，抗菌肽可能成为抗生素的新来源。     

牛乳铁蛋白素-马盖宁杂合抗菌肽的设计、合成及抑菌活性

根据抗菌肽牛乳铁蛋白素(Lfcin B)与马盖宁(Magainin)的核心功能序列,将Lfcin B(1-15)和Magainin(1-12)二者连接起来,设计一种新型杂合抗菌肽LFB15-MA12,采用固相化学合成法合成获得纯度大于95%的LFB15-MA12.微量肉汤稀释法测得LFB15-MA12对金黄色葡萄球菌A...