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利用RT-PCR方法,从ConA诱导的鸡淋巴细胞中扩增出鸡α—干扰素基因,经同源性比较,发现家禽α—干扰素核苷酸序列之间同源性较高,而与哺乳动物的同源性较低,说明家禽α—干扰素的生物学功能与哺乳动物可能存在一定差异。 相似文献
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一步法RT-PCR快速检测鸡新城疫病毒强毒株 总被引:3,自引:0,他引:3
本文参照NDV融合蛋白(F)基因序列设计引物,通过一步法RT-PCR扩增到NDV强毒株的170bp大小的特异条带。试验中未检出NDV弱毒株、IBV、AIV、IBDV的RNA,能够检出NDV尿囊液毒的最低滴度为10^-5稀释度(相当于10^3.7EID50病毒量)。对山东省不同地区于1997至2003年所分离的21个NDV强毒株检测全为阳性,而6个NDV弱毒株全为阴性。整个实验操作从病毒核酸提取到判定结果,在5h内即可完成。实验结果表明,该方法特异、敏感,适用于NDV强毒感染鸡群的快速检测。 相似文献
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8.
表达新城疫病毒融合蛋白基因禽痘病毒重组体的构建 总被引:1,自引:0,他引:1
通过RT-PCR扩增新城疫病毒F基因,利用禽痘病毒复合启动子、SV40 PolyA终止信号序列构建F基因表达盒。将F基因表达盒与loxp-GFP-loxP序列串联插入禽痘病毒重组臂,构建了禽痘病毒转移质粒载体。在脂质体介导下转染CEF,获得了带有绿色荧光信号的重组病毒rFPVFGFP。通过二次转染,利用Cre-loxP位点特异性重组将重组病毒基因组的GFP自动去除,结果获得了只含新城疫病毒F基因表达盒的重组禽痘病毒rFPVF。试验结果表明,rFPVF复制稳定,表达的F蛋白具有免疫原性,能够刺激鸡只产生抗新城疫病毒的中和抗体。 相似文献
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