小麦TaPHR1基因表达载体的构建

本研究以植物表达载体pROK2-Ubi为基础,设计带有酶切位点KpnⅠ和BamHⅠ的一对引物,从载体pAC25上扩增到目的基因TaPHR1。酶切回收后与同样双酶切的表达载体pROK2-Ubi连接,获得新的表达载体pTaPHR1,并将所构建的载体导入根瘤农杆菌LB4404菌株。另外以小麦品种济麦22为受体,利用农杆菌介导小麦成熟胚愈伤组织的遗传转化体系和构建的表达载体进行了初步的遗传转化。实验结果表明选择抗生素选择压Kan50mg/L,接种菌液浓度为OD600=0.6,侵染时间为60min时,抗性愈伤的获得率最高,达到4.08%,抗性愈伤组织的分化率达到3.28%。本研究为农杆菌介导缺磷响应基因TaPHR1的小麦遗传转化和小麦磷高效遗传改良研究提供了研究数据。     

基于SVM的多光谱影像与SAR图像融合地物分类研究

多光谱遥感图像反映了不同地物的光谱信息,而SAR图像则反映了地表不同地物的后向散射强度信息。通过二者结合,可以实现优势信息互补,提高遥感影像分类的精度。多光谱影像与单波段单极化SAR图像融合分类有2种策略：一种是将SAR图像作为一个波段加入多光谱影像中进行分类;另一种先把多光谱影像与SAR图像融合,然后对融合后的图像进行分类。以成都市使用支持向量机分类方法对2种分类策略下的分类精度进行验证。结果表明,后者分类精度要高于前者,同时2种分类方法的分类精度都明显高于单独使用多光谱影像的分类精度。     

嵌入式仿真在坦克射击训练系统中的应用研究

通过从上海期货交易所获取数据,使用向量自回归检验了两种类型投资者的行为和价格波动性之间的关系。实证检验结果表明：（1）不同期货品种市场上的投机行为都会加剧价格波动性,而不同价格波动率度量方法下,套期保值行为对价格波动所产生的Granger显著影响只出现在某些期货品种市场上;（2）市场价格波动对套期保值行为没有显著的影响,而市场价格波动对投机者行为的影响则随着波动率的度量方法不同而不同。研究结论对于指导我国期货市场改善投资者结构、促进期货市场发展具有积极的意义。     

马铃薯Y病毒CP基因RNAi载体构建与干涉效果测定

RNA沉默（RNAi）介导的植物抗病毒研究是近年来引起广泛关注的一项植物抗病毒基因工程策略。马铃薯Y病毒（PVY）在世界范围内引起马铃薯、烟草等重要经济作物的病害,并且造成严重的经济损失。本文以PVY的外壳蛋白（CP）基因为模板扩增300bp和354bp两个片段,正向和反向分别插入植物表达载体pROKⅡ的35S启动子下游,从而构建了以PVY的CP基因为靶标的RNAi植物表达载体pROKY300,转入农杆菌EHA105中,以农杆菌渗入法在本氏烟中瞬时表达与wyCP同源的hairpin RNA。结果表明,瞬时表达的hairpin RNA有效干涉了PVY侵染。     

基于支持向量机的云烟87烟叶成熟度高光谱遥感识别

利用烟叶光谱反射率数据研究烟叶的成熟度是将高光谱遥感探测技术应用于烟叶成熟采收的前提.对生理成熟期内云烟87的中部叶成熟度进行了研究,研究是从提取和分析烟叶高光谱信息的角度上进行的.基于提取到的反映烟叶成熟度的光谱特征和支持向量机这一基于数据的小样本学习方法,建立了识别烟叶成熟度的数学模型,这个数学模型是由支持向量机生成的2个最优决策超平面,一个将初熟类烟叶和适熟类烟叶分开,另一个将适熟类烟叶和过熟类烟叶分开,且分类精度均在90％以上.     

Effects of up-regulation of c-myc expression on U937 cell line

AIM:To establish a human monocytic　leukemia cell line U937 stably expressing c-myc gene and to investigate the biological characteristics of this cell line. METHODS:The recombinant plasmid MSCV-c-myc-IRES-GFP (MMIG) was constructed. MMIG and MSCV-IRES-GFP (MIG) were used to package the viruses for infecting U937 cells. Fluorescence-activated cell sorter (FACS) was used for sorting U937/GFP and U937/MYC cells. The GFP-positive cells were detected by fluorescence microscopy and FACS. The protein expression of c-Myc, survivin, X-linked inhibitor of apoptosis protein (XIAP) and Bcl-2 was detected by Western blotting. Cell proliferation was evaluated by MTT assay. Propidium iodide (PI) staining was used to determine the cell cycle distribution. Self-renewal ability was observed by colony- forming assay. RESULTS:The GFP expression in the cells infected with MIG or MMIG virus was observed under fluorescence microscope. The green fluorescent rate of the cells infected with MIG was 26.0%, while that of the cells infected with MMIG was 27.7%. The protein expression of c-Myc in MMIG-infected U937 cells was higher than that in MIG-infected cells. After sorting, the green fluorescent rates of U937/GFP and U937/MYC cells reached 98.7% and 93.7%, respectively. The protein expression of c-Myc in U937/MYC cells was higher than that in U937/GFP cells. In addition, survivin, a downstream protein of c-Myc, was up-regulated, while the protein expression of XIAP and Bcl-2 remained unchanged. Cell cycle analysis showed that the percentage of the cells in S phase increased in U937/MYC cells. Moreover, the proliferation and colony-forming ability of U937/MYC cells were also enhanced. CONCLUSION: U937/MYC cell line stably expressing c-myc gene was successfully established. c-Myc may increase cell viability via enhancing the expression of anti-apoptotic protein survivin, the cell cycle transition and the self-renewal ability.     

基于介电频谱的采后苹果可溶性固形物含量无损检测

根据10~4500MHz间采后21周贮藏期间无损富士苹果介电参数的频谱特性,建立了苹果可溶性固形物含量的支持向量回归（SVR）预测模型和BP网络预测模型;并综合比较了采用原始频谱（FF）、主成分分析（PCA）和连续投影算法（SPA）优选频率对模型预测效果的影响。研究结果表明,PCA—SVR建模效果最好,其预测相关系数为0.883,均方根误差为0.552,PCA—BP的建模效果较PCA—SVR稍差。并且发现经SPA处理后的数据建立的模型,均方根误差普遍较小;经PCA处理后的数据建立的模型,预测相关系数普遍较高。     

绒山羊成纤维细胞生长因子5基因(FGF5)毛囊特异性表达载体的构建及转染胎儿成纤维细胞

绒山羊的绒毛品质、产量与皮肤毛囊的生长发育密切相关。本研究旨在构建绒山羊(Capra hircus)成纤维细胞生长因子5基因(fibroblast growth factor 5,FGF5)的毛囊特异性表达载体,并证明其表达的有效性。分别以绒山羊基因组和c DNA为模板,利用PCR方法克隆角蛋白关联蛋白6-1(keratin associated protein 6-1,KAP6-1)基因的启动子和FGF5基因的编码区序列(coding sequence,CDS),并将这两个元件连接到去除CMV启动子的真核表达载体p EGFP-N1上,FGF5与增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因表达框之间以猪捷申病毒(Porcine teschovirus,PTV)2A(P2A)相连,构建毛囊特异性表达载体p EGFP-N1-KF。表达载体转染绒山羊胎儿成纤维细胞后,对细胞表达产物进行q RT-PCR和Western blot检测。酶切鉴定结果表明,载体p EGFP-N1-KF构建成功;q RT-PCR结果表明,FGF5正常表达;Western blot结果显示,P2A能够有效剪切FGF5和EGFP融合蛋白。表明成功得到了绒山羊FGF5基因的毛囊特异性表达载体并在绒山羊胎儿成纤维细胞中能正常表达。本实验为进一步研究绒山羊FGF5基因在毛囊发育和周期调控中的作用提供了技术支持。     

基于支持向量机的典型冻土区土壤制图研究

基于青藏高原大片连续多年冻土分布的东部边缘,青海省兴海县温泉地区的野外调查数据,通过对研究区遥感数据的分析,开展了土壤制图方法的探讨。以成土因素学说和土壤-景观模型理论为基础,筛选土壤分类潜在变量,在不同的变量组合下运用支持向量机(SVM)的方法建立土壤-景观模型,对整个研究区进行预测性分类。为了更好地检验该方法的有效性,采用五折交叉方式进行结果的验证。并通过对比不同变量组合的交叉验证结果和分布模拟结果图,确定了适合典型冻土区土壤分类的环境变量组合,以较少的样本知识较好地预测该区土壤类型的空间分布。     

牛卵泡抑素基因克隆及真核表达载体构建

[目的]克隆牛的卵泡抑素基因（Follistatin,FSTN）基因,构建真核表达载体。[方法]用Trizol法从牛的卵巢中提取总RNA,反转录成cDNA,用带有酶切位点牛FSTN的特异性引物扩增其完整编码区序列,连接到T载体、测序,序列无误后亚克隆入真核表达载体pIRES2-AcGFP1中,酶切及PCR鉴定载体。[结...