Expression of Porcine Interleukin-2 and Porcine Interleukin-6 and Their Adjuvant Effects on Gene Deleted Vaccine of Pseudorabies Virus (TK-/gG-/LacZ+)

Porcine interleukin-2 and porcine interleukin-6 cDNA sequences were cloned into the expressing vectors pET-28a and pGEX-KG respectively. They were expressed in E.coli BL21 (DE3) with high-level production. The gene deleted vaccine of pseudorabies virus Ea strain (TK-/gG-/LacZ+) was mixed with the two different purified recombinant proteins each, or both, with the doses of 2, 5 or 10 μg ml-1. Ten groups of pseudorabies negative antibody swines were immuned twice with tested vaccines with different doses, or control vaccine, respectively. The antibody titers of the test groups were detected by neutralization test, and the daily weight gains of swines were calculated and analyzed statistically. In the study, all the neutralizing antibody titers in test groups were higher than the control group, and the recombinant proteins appeared a dose dependent adjuvant effect. The tested vaccines with 2 μg ml-1 pIL-2 and with 10 μg ml-1 pIL-2/pIL-6 got significant and extremely significant differences, compared with the vaccines without pILs. The difference of the daily weight gain indicated the potential positive influence of pIL-2 and pIL-6 on immune protection.     

雏鸡经马立克氏病疫苗免疫后IL－2及IL－2R的变化

雏鸡经马立克氏病（ＭＤ）三价疫苗免疫后，脾脏和胸腺Ｔ淋巴细胞白细胞介素２（ＩＬ－２）诱导活性比未免疫健康对照雏鸡和火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）疫苗免疫雏鸡显著升高（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０１和Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５），白细胞介素２受体（ＩＬ－２Ｒ）诱导表达显著增加（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０１和Ｐ＜０．０１Ｐ＜０．０１）；雏鸡经ＨＶＴ疫苗免疫后，脾脏Ｔ淋巴细胞ＩＬ－２Ｒ诱导表达比未免疫健康对照雏鸡显著增加（Ｐ＜０．０５），脾脏和胸腺Ｔ淋巴细胞ＩＬ－２诱导活性和胸腺丁淋巴细胞ＩＬ－２Ｒ诱导表达虽见升高和增加，但无统计学显著性差异（Ｐ＞０．０５）。     

兔出血症病毒单克隆抗体的抗原识别位点分析

通过ＥＬＩＳＡ迭加试验对５株抗兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的抗原表位进行了分析。抗体反应增值结果表明，６株单抗分别针对３类不同的抗原决定簇。ＣＧ４－１、ＣＨ３－１和ＡＡ８－１针对病毒结构多肽上的同一决定簇，ＣＦ２－１和ＲＭ－１７针对另一决定族，而ＲＭ－１４针对第３种决定簇；其识别表位可能与ＡＡ８－１非常接近。单抗的识别表位与其生物学活性密切相关。     

K88菌毛基因的克隆及ST表位序列在菌毛基因上的融合

[目的]为了建立用于细胞表面展示的载体系统。[方法]利用PCR技术,以大肠杆菌质粒为模板扩增K88菌毛操纵子的结构基因faeC~faeH,并克隆到pBR322质粒载体中。合成一段替换序列,在菌毛抗原基因的超变区引入酶切位点ApaI和NcoI,合成耐热肠度素STII表位编码序列,并引入菌毛抗原基因的超变区。[结果]经PCR鉴定和限制性内切酶酶切证明,重组质粒pBR-fae插入片断大小为6.6kb,与预期相符。核苷酸序列分析证明,所得faeC~faeH序列正确。PCR筛选和测序验证证明,构建了K88菌毛-耐热肠度素STII的融合基因。[结论]试验成功获得了重组质粒pBR-fae-ST。     

草鱼对CFRV疫苗免疫应答的研究

本文研究了草鱼对ＣＦＲＶ疫苗的免疫应答水平，规律性，免疫效应期及免疫持久性。用该疫苗免疫后的草鱼能产生很强的应答反应，免疫保护力可达８０％以上，血清中和抗体效价非常明显地高于对照组。它的免疫效应期在５天以内，第１０天血清中和抗体达到较高水平，第２０天处于峰值，并可维持２０余天，以后在第１０天的水平上波动。草鱼对ＣＦＲＶ疫苗的免疫持久性在１３个月以上。     

鸡新城疫、禽流感（H9亚型）二联灭活疫苗的安全性和免疫效力试验

将鸡新城疫、禽流感(H9亚型,SY株)二联灭活疫苗分别以肌肉注射和皮下注射的方式单剂量、单剂量重复、超剂量分别接种28日龄SPF鸡和6月龄产蛋鸡进行安全性试验.同时,将不同剂量疫苗分别接种30日龄SPF鸡,接种后定期采血,分离血清测定HI抗体水平,并于免疫后1、2周从每组试验鸡中抽取10只攻击AIV SY株病毒.结果显示,疫苗以不同剂量接种试验鸡后未见任何不良反应,对产蛋鸡的生产性能基本无影响;试验鸡在免疫后2周即可产生较高水平的HI抗体,其中ND HI抗体几何平均值不低于1∶128,AI HI抗体几何平均值不低于1∶74,攻击AIV SY株病毒后病毒分离率为0,在免疫后20周其HI抗体仍在保护水平以上.表明鸡新城疫、禽流感(H9亚型,SY株)二联灭活疫苗安全性良好,免疫效果确实.     

鹅新城疫新型疫苗研究进展

结合新城疫病毒的保护性抗原,就近年鹅新城疫的DNA疫苗、基因工程亚单位疫苗、重组活载体疫苗、减毒活疫苗等新型疫苗的研究现状进行了综述,为鹅新城疫疫苗研制提供参考.     

结核疫苗研究进展

综述了近年来结核疫苗研发过程中宿主抗结核感染免疫机制的研究进展,介绍了结核疫苗研发策略及已进入临床前期的结核疫苗,同时列举了新的结核疫苗评价标准,以期为结核疫苗的进一步研究提供参考.     

新城疫病毒分子生物学研究进展

新城疫(Newcastle Disease,ND)是由新城疫病毒(NDV)引起的一种急性、高度接触性禽类传染病,被世界动物卫生组织(OIE)定为法定必报传染病,我国也将其列为一类动物疫病,本文从新城疫病毒的形态及分子结构、致病力的分子基础、分子流行病学特征和基因工程疫苗等分子生物学相关研究进展进行了综述。     

猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)种毒特性研究

猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)可导致仔猪严重腹泻,死亡率极高,是危害养猪业的重要病毒。免疫接种是预防TGEV感染有效手段,TGEV疫苗开发对防治TGEV感染具有重要价值。制备纯净种毒是疫苗株基础。本试验通过细胞培养、病毒培养、间接免疫荧光、RT-PCR、理化试验、中和试验、纯净度检测等试验技术对TGEV自主致弱毒株HR/DN1进行系统特性,结果表明,该病毒理化特性和分子生物学特性均与TGEV相符,且该病毒具有繁殖滴度高、传代稳定、病毒纯净等特点,符合种毒制备基本条件,为开发TGEV疫苗提供基础。