祁白术多酚酶法提取工艺优化及其抗氧化、抑制黑色素合成活性

为考察祁白术多酚(polyphenols from Atractylodes macrocephala Koidz grown in Qimen, AMP)的可利用性,采用响应面分析法优化酶法提取工艺,并研究AMP的抗氧化、抑制黑色素合成活性。结果表明,在料液比1:30 g·mL^-1、酶解时间20 min的条件下,当纤维素酶添加量为1.35%、酶解温度为44℃、pH值为4.7、搅拌转速为670 r·min^-1时,AMP提取量最高,为26.58±0.23 mg·g^-1。统计学分析显示,所选响应面模型拟合较好,优化后的提取工艺条件合理可行。AMP具有较好的抗氧化活性,其总还原力、对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除作用随其浓度的增加而增强。当AMP浓度为0~0.02 mg·mL^-1时,对B16细胞无毒性作用。与α-MSH模型组相比,AMP显著下调了细胞内酪氨酸酶活性(P<0.05),并呈浓度依赖性地抑制细胞内黑色素的合成(P<0.05);当AMP浓度为0.02 mg·mL^-1时,对细胞内酪氨酸酶活性及黑色素合成抑制率分别为30.11%、43.35%,阳性对照熊果苷(0.1 mg·mL^-1)对细胞内酪氨酸酶活性及黑色素合成的抑制率分别为22.03%、39.77%,表明AMP对黑色素生成的抑制效果强于熊果苷。本研究结果为祁白术多酚的综合开发利用提供了依据。     

辣木多糖酶促提取技术优化及不同部位含量研究

为研究辣木多糖的酶促提取工艺和辣木不同部位的多糖含量,在单因素试验的基础上,以多糖提取率为指标,选择纤维素酶用量、提取温度、提取时间、液料比为试验因素,采用二次回归正交旋转组合设计对纤维素酶辅助提取辣木多糖的工艺参数进行优化,并在此基础上研究辣木不同部位的多糖含量差异。4种因素对辣木多糖提取率的影响顺序依次为:纤维素酶用量>提取温度>液料比>提取时间。建立辣木多糖提取率(Y)与纤维素酶用量(X1)、提取温度(X2)、提取时间(X3)、液料比(X4)的二次正交回归模型:Y=18.6602+0.8134X1+0.7572X2–0.4312X3+0.6909X4–0.5181X12–0.4935X22–0.6277X42,该模型拟合度好,4个因素均对多糖提取率有显著影响(p<0.05)。通过回归模型获得优化的提取工艺为:纤维素酶用量1.60%,提取温度53℃,提取时间68 min,液料比52∶1,在此条件下辣木多糖提取率为19.83%,实际值与预测值一致。辣木不同部位的多糖含量结果表明,辣木根、花、嫩叶、茎中均含有丰富的多糖,其中根中含量最高且极显著高于其他部位(p<0.01),可进一步开发利用。采用二次回归正交旋转组合设计优化得到的辣木多糖酶促提取工艺条件准确可靠,可有效提高辣木多糖提取率并可在生产中推广应用。     

干白葡萄酒增香酿造工艺参数优化

试验以一种酿酒葡萄为原料,利用顶空固相微萃取/气相色谱-质谱联用技术(HS-SPME/GC-MS)检测了不同可同化氮含量(200、300、400 mg/L)、酵母多糖(150、250、350 mg/L)、发酵温度(14、18、22℃)、初始pH值(3.3、3.5、3.7)和SO2添加量(40、70、100 mg/L)处理发酵酒样中的挥发性香气化合物,探讨了复合酿造因子对贵人香干白葡萄酒主要香气物质含量的影响关系。结果表明,300 mg/L的可同化氮有利于高级醇、酯类、单萜化合物的积累;酵母多糖添加量为250 mg/L时,单萜化合物质量分数达到最大值(198.54μg/L);发酵温度从14℃升高到22℃时,高级醇含量显著升高,酯类和单萜含量显著降低;提高葡萄汁初始pH有利于单萜化合物的积累,不利于高级醇、酯类的生成;添加70 mg/L的SO2时,单萜化合物质量分数最高(181.73μg/L)。正交试验极差分析表明,发酵温度和SO2添加量对高级醇含量影响较大;发酵温度与可同化氮对酯类香气物质含量的影响较大,酵母多糖和pH值对单萜类香气物质含量影响较大。各处理组间的聚类分析可知,可同化氮和酵母多糖对主要香气化合物的影响关联度较高、葡萄汁初始pH值和SO2添加量关联度较高。较低的发酵温度有利于酒样中香叶醇、异戊醇、苯乙醇、辛酸乙酯的生成,添加中等浓度的可同化氮和酵母多糖可促进乙酸异戊酯、乙酸己酯和己酸乙酯的合成,较高的初始pH值有利于芳樟醇、香茅醇和香叶醇的积累。综合分析,发酵温度18℃、初始pH值3.5、70 mg/L SO2、300 mg/L可同化氮、250 mg/L酵母多糖酿造贵人香干白葡萄酒,可有效促进酒样中主要香气化合物的合成释放。     

Seaweed polysaccharide mitigates intestinal barrier dysfunction induced by enterotoxigenic Escherichia coli through NF-κB pathway suppression in porcine intestinal epithelial cells

This study aimed to investigate the protective effects and underlying mechanism of seaweed polysaccharide (SWP) on intestinal epithelial barrier dysfunction induced by E. coli in an IPEC-J2 model. A preliminary study was done to screen optimum SWP concentrations by cell viability, cytotoxicity, apoptosis and proliferation evaluation. The regular study was conducted to evaluate the protective effects of SWP against E. coli challenge via the analysis of transepithelial electrical resistance (TEER), tight junction proteins, NF-κB signalling pathway, proinflammatory cytokines and the E. coli adhesion and invasion. Our results show that 4 h E. coli challenge down-regulated tight junction proteins expression, decreased TEER, activated NF-κB signalling pathway and increased proinflammatory response, which indicates that the E. coli infection model was well-established. Pre-treatment with 240 μg/ml SWP for 24 h alleviated the 4 h E. coli -induced intestinal epithelial barrier dysfunction, as evidenced by the up-regulated expression of Occludin, Claudin-1 and ZO-1 at both mRNA and protein level and the increased TEER of IPEC-J2 cells. Pre-incubation with 240 μg/ml SWP for 24 h inhibited the activation of the NF-κB signalling pathway by 4 h E. coli challenge, including the decreased mRNA expression of TLR-4, MyD88, IκBα, p-65, as well as the reduced ratio of protein expression of p-p65/p65. Also, pre-treatment with 240 μg/ml SWP for 24 h decreased proinflammatory response (IL-6 and TNF-α) induced by 4 h E. coli challenge and decreased the E. coli adhesion and invasion. In conclusion, SWP mitigated intestinal barrier dysfunction caused by E. coli through NF-κB pathway in IPEC-J2 cells and 240 μg/ml SWP exhibited better effect. Our results also provide a fundamental basis for SWP in reducing post-weaning diarrhoea of weaned piglets, especially under E. coli -infected or in-feed antibiotic-free conditions.     

黄芪多糖和丁酸梭菌对蛋雏鸭生长性能、血清生化指标的影响

本试验旨在研究日粮中添加黄芪多糖和丁酸梭菌及其复合剂对蛋雏鸭生长性能和血清生化指标的影响。选取1日龄健康绍兴公鸭600只，随机分为5组，每组6个重复，每个重复20只。Ⅰ组饲喂基础日粮（对照组），Ⅱ~Ⅴ组分别在基础日粮中添加40 mg/kg的杆菌肽锌（抗生素组）、800 mg/kg的黄芪多糖、250 mg/kg丁酸梭菌、800 mg/kg黄芪多糖+250 mg/kg丁酸梭菌复合剂，试验期为28 d。结果显示：①1~14日龄时，各组平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）差异均不显著（P>0.05）。15~21日龄时，与Ⅰ、Ⅱ组相比，Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组ADG显著提高（P<0.05）、F/G显著降低（P<0.05）；22~28日龄时，Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组ADG显著高于Ⅰ组（P<0.05）；Ⅴ组ADFI显著高于其他组（P<0.05），Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组F/G显著低于Ⅰ、Ⅱ组（P<0.05）。1~28日龄时，与Ⅰ、Ⅱ组相比，Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组ADG显著提高（P<0.05）、F/G显著降低（P<0.05）。②试验第28天时，与Ⅰ组相比，Ⅴ组三碘甲状腺原氨酸（T3）含量显著提高（P<0.05）；Ⅲ、Ⅴ组甲状腺素（T4）、生长激素（GH）含量显著提高（P<0.05）；各组间血清皮质醇（CORT）含量无显著差异（P>0.05）；Ⅳ、Ⅴ组白细胞介素-2（IL-2）显著高于Ⅰ、Ⅱ组（P<0.05）。Ⅲ、Ⅴ组干扰素-γ（IFN-γ）显著高于其他组（P<0.05）。综上所述，日粮中添加黄芪多糖和丁酸梭菌可一定程度上提高蛋雏公鸭生长性能，改善血清生化指标，黄芪多糖和丁酸梭菌复合添加效果优于单独添加。     

辣木叶多糖对过氧化氢诱导奶牛乳腺上皮细胞氧化损伤的保护作用

奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)在奶牛泌乳期代谢旺盛,导致活性氧(ROS)大量产生,从而诱发氧化应激。辣木叶多糖(MLP)能有效清除ROS和自由基,但其是否具有缓解BMECs氧化损伤的潜力尚不清楚。因此,本文以MLP为添加剂,探究其对过氧化氢(H2O2)诱导BMECs氧化损伤的保护作用。本试验首先将分离的BMECs置于含有不同浓度H2O2的培养基中培养2 h建立氧化损伤模型,以确定H2O2的适宜浓度;随后在培养基中加入不同浓度MLP溶液培养BMECs 2 h,以确定MLP适宜浓度;最终选用浓度为500μmol/L的H2O2和4 mg/mL的MLP用于本试验。试验设置4个组,分别为对照组1(BMECs)、对照组2(BMECs+MLP)、损伤组(BMECs+H2O2)、保护组(BMECs+MLP+H2O2),每组3个重复。试验对BMECs中ROS数量、BMECs凋亡以及BMECs中过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量进行检测。结果表明:1)ROS检测结果显示,MLP抑制了细胞内ROS的生成。2)Hochest33258染色结果与透射电镜观察结果显示,MLP降低了BMECs的凋亡率,同时保持了细胞膜和细胞结构完整性。3)试剂盒检测结果显示,MLP提高了BMECs中CAT、GSH-Px和SOD活性,同时降低了MDA含量。综上所述,MLP可有效减缓BMECs凋亡,提高其抗氧化能力。     

刺五加多糖含量测定方法的建立

通过建立刺五加药用植物多糖含量的测定方法,为刺五加质量控制和资源开发提供科学依据。以葡萄糖为对照品,采用苯酚—硫酸法测定刺五加药用植物多糖的含量。结果表明,葡萄糖标准曲线为A=0.0133C-0.0025,R2=0.997 5,刺五加多糖含量为2.40%。该方法精密度良好,反应产物在2 h内吸光值稳定,平均回收率为99.1%。     

A Sulfated Polysaccharide from Saccharina japonica Suppresses LPS-Induced Inflammation Both in a Macrophage Cell Model via Blocking MAPK/NF-κB Signal Pathways In Vitro and a Zebrafish Model of Embryos and Larvae In Vivo

Inflammation is a complicated host-protective response to stimuli and toxic conditions, and is considered as a double-edged sword. A sulfated Saccharina japonica polysaccharide (LJPS) with a sulfate content of 9.07% showed significant inhibitory effects against lipopolysaccharide (LPS)-induced inflammation in RAW 264.7 macrophage cells and zebrafish. Its chemical and structural properties were investigated via HPLC, GC, FTIR, and NMR spectroscopy. In vitro experiments demonstrated that LJPS significantly inhibited the generation of nitric oxide (NO) and prostaglandin E₂ (PGE₂) via the downregulation of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2) expression and suppressed pro-inflammatory cytokines tumor necrosis factor (TNF)-α and interleukin (IL)-1β production via the nuclear factor-kappa B (NF-κB) and mitogen-activated protein kinase (MAPK) signal pathways in LPS-induced RAW 264.7 cells. Moreover, LJPS showed strong protective effects against LPS-induced inflammatory responses in zebrafish, increasing the survival rate, reducing the heart rate and yolk sac edema size, and inhibiting cell death and the production of intracellular reactive oxygen species (ROS) and NO. Its convenience for large-scale production and significant anti-inflammatory activity indicated the potential application of LJPS in functional foods, cosmetics, and pharmaceutical industries.     

硒多糖的来源、提取及其生物学功能研究进展

硒多糖是硒与多糖结合在一起的有机硒化合物，是一种新型的硒源，具有清除自由基、保护神经活性、增强免疫力、抗肿瘤、抗炎等多种功能。硒多糖具有特殊的化学结构——硒氧键（O=Se=O），有别于普通多糖，其能够发挥硒和多糖的双重功效，活性远高于硒或多糖。本文就硒多糖的来源、提取、分离纯化及生物学功能等方面的研究进展进行综述，以期为未来畜牧业新型饲料添加剂的开发、应用和推广提供理论依据。 [关键词] 硒多糖|来源|提取|生物学功能