实验性感染山羊脑内弓形虫包囊检查方法比较

６只实验性感染弓形虫的山羊于感染后４０～４２ｄ扑杀，采用小鼠生物学检查法、直接镜检和免疫酶组织化学法检查脑内弓形虫包囊。结果三种方法均可检到脑内弓形虫包囊，其中免疫酶组织化学法优于其它两种方法。     

弓形虫ROP2基因的克隆及原核表达

应用PCR技术从刚地弓形虫（Toxoplasma gondii）RH株的基因组DNA中扩增编码棒状体蛋白ROP2（rh—potryprotein2）的部分基因，构建pGEX—KG—ROP2重组表达质粒，经酶切、PCR及DNA测序鉴定后，将阳性质粒转入E．coli BL21CodonPlus中，在IPTG诱导下表达，表达产物用SDS—PAGE和Western—blot分析鉴定。结果表明，扩增的ROP2基因与GenBank上发表的相应基因序列的同源性达99.9％，该基因可以在大肠杆菌中高效表达，表达的ROP2融合蛋白表观相对分子质量约为64000，可被兔抗弓形虫免疫血清识别。     

新疆猪、牛、羊弓形虫病的血清学调查

目的为摸清新疆地区家畜弓形虫感染情况。方法作者对新疆乌鲁木齐周边地区的猪、牛和阿勒泰地区的牛、羊随机抽样,采用间接血凝试验(IHA)进行了血清学调查。结果乌鲁木齐周边地区的猪的感染率为66.39%(243/336),牛为31.94%(23/72);阿勒泰地区牛为31.8%(28/88),羊为33.33%(12/36);结论弓形虫在这三种动物中均有相当高的感染率,应引起人们的足够重视,加强防范。     

动物源性食品中弓形虫Nested PCR-RFLP分子检测技术的建立

目的为了建立一种快速、特异、灵敏检测动物源性食品中弓形虫的技术。方法根据原虫rDNA的部分序列,找出弓形虫和新孢子虫共同保守DNA片段,设计套式PCR两对引物,以UltraPureTM基因组DNA快速提取试剂盒提取弓形虫和新孢子虫DNA为模板,初步建立了检测两种虫体的Nested PCR技术。将纯化的Nested PCR产物成功地克隆到pGEM-T-easy载体中,经鉴定、测序并进行同源性分析。结果Nested-PCR的外、内引物对两种虫体rDNA基因均能进行扩增,长度分别在800~900 bp、400~500 bp之间。内引物扩增DNA序列与公布的同种虫体DNA序列同源性较高,弓形虫和新孢子虫分别达99.1%、97.2%,但它们两者之间差异较大,同源性仅为86.6%。用软件寻找能区别两者基因序列差异的酶切位点,挑选内切酶进行RFLP实验,结果表明新孢子虫NestedPCR扩增片段能被Vsp1酶切。同时进行该分子检测技术的特异性和敏感性试验,实验证明该Nested PCR能对弓形虫和新孢子虫rDNA基因进行特异性的扩增,而对其它原虫基因未能扩增出任何片段;该Nested-PCR能检测出100个弓形虫速殖子/g猪肉。结论本实验建立Nested PCR检测方法不仅可用于检测动物性食品中弓形虫,而且能明确区分弓形虫和新孢子虫。     

弓形虫抗体免疫胶体金快速检测试纸条的研制

将样品垫（加样区）、包被了弓形虫排泄分泌抗原和胶体金结合物的结合垫、包被了弓形虫排泄分泌抗原和抗弓形虫抗体的硝酸纤维素膜、吸水垫依次首尾互相衔接粘贴在白色塑料板上，组装成检测弓形虫抗体的免疫胶体金快速试纸条。然后用其进行动物弓形虫病血清抗体检测，并用弓形虫IHA诊断试剂进行对照试验。经对已知弓形虫阴、阳性血清检测，与弓形虫IHA检测结果的符合率为82．5％，金标试纸条较弓形虫IHA诊断试剂能提前2d检测到抗体。结果表明，检测弓形虫抗体免疫胶体金试剂（金标试纸条）的敏感度高于IHA。     

Occurrence of Anti-Toxoplasma gondii Antibodies in Dogs in the Urban Area of Monte Negro,Rondônia,Brazil

The prevalence of anti-Toxoplasma gondii antibodies in dogs in an urban area of the municipality of Monte Negro, Rondônia, Brazil, was evaluated using an indirect immunofluorescent antibody test (IFAT). Blood samples were taken from 157 dogs living in 85 of the 94 blocks of the city. A seropositivity of 76.4% (120/157) was found and associations between the prevalence and the variables sex, age, type of raising and food were studied. The prevalence tended to increase with age (p<0.05); dogs over 24 months old had 85.5% (100/117) positivity, compared with 50% (20/40) in dogs less than 24 months old, showing postnatal exposure to the agent. It was also observed that dogs with access to the streets showed greater prevalence (84.9%) than companion animals (58.8%). There was no association between sex or the type of food (home-made or commercial) and anti-T. gondii antibodies.     

抗弓形虫药物研究进展

刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种呈世界范围分布的人兽共患寄生原虫,给人类生活和畜牧业生产带来极大的危害,然而至今仍没有理想的治疗弓形虫病的药物。近年来,研究人员主要从干扰弓形虫的叶酸代谢、检测抗其他病原微生物和寄生虫药物的抗弓形虫活性,以及针对弓形虫独特的生理结构和生化反应路径进行药物设计,开展抗弓形虫药物的研究,取得了许多重要的成果。随着人们对弓形虫研究的不断深入,对其分子生物学特性会有更加全面的了解,将给新的药物靶标的发现和特效药物的研发提供重要的理论依据。     

不同中药方剂对弓形虫感染小鼠脾细胞分泌 IL-2活性的影响

通过观察不同方剂对小鼠感染弓形虫后脾 IL-2含量的影响,确定对弓形虫病治疗效果最佳的复方中药。将昆明系小鼠随机分为中药复方方剂组（A、B、C 组）、复方 SMZ 组（D 组）、模型组（E 组）和对照组（F 组）。用 RH 株弓形虫速殖子腹腔感染小鼠,2 h 后灌胃给药,其中 A、B、C 3个组每只每次0．5 mL 自拟弓形虫汤剂;D 组每只每次0．5 mL 复方 SMZ 混悬液300 mg／（kg· d－1）,疗程15 d。采用双抗夹心ELISA 法,观察不同方剂对小鼠脾细胞 IL-2含量的影响,并对照不同方剂之间的差异,采用 F 检验和 q 检验进行统计分析。结果表明,A、B、C 组和 D 组 IL-2活性水平均随着时间延长而逐渐升高;A、C、D 组与 F组有显著性差异;B 组 IL-2水平活性保持了较高值,与 E 组差异极显著。说明3种自拟中药复方方剂均能显著提高弓形虫感染小鼠脾细胞 IL-2的含量,增强小鼠免疫功能,其中复方二提高最显著,对 IL-2活性影响最大。