First report on the isolation of immunoglobulin M of guppy, Poecilia reticulata, for the production of polyclonal antibodies

As guppies are one of the commercially important fish in freshwater ornamental aquaculture industry, it is important to gain an understanding of guppy immune response for infectious disease control. Till now, the number of study that examined the immune response of guppies is limited and effective tools for monitoring guppy antibody have not been reported. In this study, we successfully isolated guppy IgM using mannan-binding protein (MBP) affinity chromatography and produced specific polyclonal antibodies against guppy IgM heavy and light chains, that showed a molecular weight of approximately 74 and 23 kDa respectively. The produced polyclonal antibodies were used to develop an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and have demonstrated to be an effective tool for the detection and quantification of antigen-specific antibody of guppies immunized with Pseudomonas fluorescens. In conclusion, the produced anti-guppy IgM polyclonal antibodies should prove its future implications for immunology and epidemiology studies in guppies.     

牙鲆免疫相关组织特征及抗体阳性细胞的免疫组化定位

应用抗牙鲆免疫球蛋白单克隆抗体(2D8、1H1)对牙鲆外周血系统、肾、脾、肝、胰、肠道组织中抗体阳性细胞进行了定位观察,并对其组织学特征进行了描述。两株单抗均能在外周血滴片和组织切片中成功地检测到抗体阳性细胞。外周血系统中的抗体阳性细胞主要为淋巴细胞,没有发现抗体阳性的巨噬细胞;牙鲆头肾中没有肾单位,肾小管、肾小球等主要存在于后肾中,脾脏和肾脏都含有巨噬细胞、粒细胞、淋巴细胞等免疫相关细胞,抗体阳性细胞存在方式也极为相似,成簇或单独分布于黑色素巨噬细胞中心和血管周围;牙鲆的胰组织镶嵌在肝上,形成肝胰脏,也参与免疫应答,抗体阳性细胞单个存在,分布于肝组织中,胰组织中没有发现抗体阳性细胞;肠道抗体阳性细胞主要存在于固有层中,有成簇存在现象,在上皮层也可见到单个存在的抗体阳性细胞。     

猪瘟病毒-猪圆环病毒2型疫苗联合免疫效果的评价

为建立一种既有效又简便的猪瘟和猪圆环病毒病疫苗联合免疫方法,通过细胞感染试验和动物免疫试验,评价了猪圆环病毒2型(PCV2)灭活疫苗和猪瘟病毒(CSFV)冻干活疫苗联合免疫的可行性.通过细胞感染试验证明了PCV2灭活疫苗稀释CSFV冻干活疫苗不影响CSFV疫苗的病毒活性;将PCV2灭活疫苗稀释的CSFV冻干活疫苗免疫试...     

预防仔猪大肠杆菌性腹泻卵黄抗体的研究进展

仔猪大肠杆菌性腹泻病的致病机理主要与产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)菌毛介导的粘附作用和肠毒素的产生与释放密切相关。通过特异性免疫生产的鸡卵黄抗体,是预防仔猪大肠杆菌性腹泻病的一种新的方法;而且能有效降低仔猪的腹泻发生率,并提高仔猪的增重。文中综述了国内外用鸡卵黄抗体防治仔猪大肠杆菌腹泻的研究进展,讨论了现阶段鸡卵黄抗体存在的不足,并提出基因工程技术在卵黄抗体研制开发中的应用前景。     

甲砜霉素及氟苯尼考胺单克隆抗体的制备及特性鉴定

将氟苯尼考胺与HSA载体蛋白相连作为抗原免疫Balb/c小鼠,经杂交瘤技术获得了两株能稳定分泌抗甲砜霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株1E及5C。用间接竞争ELISA方法测定,其细胞株1E单克隆抗体的细胞上清液效价为1∶5×103,腹水效价为1∶1×106,抗体亚类为IgG2b,50%抑制浓度(IC50)为15μg/L。其分泌的单克隆抗体与其结构类似物氟苯尼考及氟苯尼考胺的交叉反应率为10.4%和10.8%,和其他化合物基本无交叉反应。体外传代培养和冻存复苏后抗体分泌稳定,可为检测试剂盒提供长期稳定的抗体。     

氯霉素单克隆抗体免疫金标快速检测试纸的研制及性能测定

以分泌抗氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞株的建立为基础,应用胶体金免疫层析试验(GICA)成功研制出CAP残留快速检测试纸(CAP_Strip),并对其性能进行了测定。结果表明,CAP_Strip的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,目测检测限为0.5μg/L;与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应为160%,与其他酰胺醇类和抗菌药物无交叉反应;其敏感性与竞争ELISA试剂盒相当,符合率为100%;10 min内显示结果,具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合CAP残留快速检测的推广应用。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒持续感染与保护性免疫应答机制

对猪繁殖与呼吸综合征病毒持续感染与保护性免疫应答机制目前尚未完全阐明,有报道认为病毒中和抗体对抗感染不起保护性作用,甚至起负作用。近年来的研究结果表明,中和抗体在保护性免疫中起重要作用。文章针对猪繁殖与呼吸综合征病毒持续感染与清除,病毒抗原表位与中和抗体的产生机制,病毒感染动物免疫应答反应模型,病毒中和抗体在保护性免疫中的作用等内容做一综述。     

肠炎沙门菌非编码小RNA RyhB调控SopE蛋白的表达研究

为研究肠炎沙门菌(SE)50336非编码小RNA(RyhB-1、RyhB-2)对毒力蛋白SopE的调控作用,利用pET原核表达系统表达SE50336 SopE蛋白,免疫BALB/c小鼠获得SopE蛋白的特异性多克隆抗体(多抗)并分析制备血清的特异性。通过Western-blot检测野生株SE50336、RyhB单缺失株(SE50336 ΔryhB-1、SE50336 ΔryhB-2),以及RyhB双缺失株(SE50336 ΔryhB-1ΔryhB-2)中SopE蛋白的表达水平,分析RyhB对SopE的调控作用。结果显示:成功构建重组质粒pET28a-sopE,转化BL21(DE3)感受态细胞后,在IPTG 0.3 mmol/L、温度37℃、转速220 r/min、诱导时间4 h的条件下,SopE蛋白在包涵体中表达;Western-blot结果显示制备的多抗可特异性检测肠炎沙门菌SopE蛋白;与野生株相比,RyhB单缺失株SopE蛋白表达量下降,双缺失株下降更明显,表明RyhB-1和RyhB-2均可上调SopE蛋白的表达。以上结果为进一步研究RyhB-1和RyhB-2对SopE的调控作用机制奠定基础。