Neuroimmunological regulation of α-MSH release in tilapia (Oreochromis mossambicus)

This study describes the effects of IL-1 (interleukin 1) and LPS (bacterial endotoxin lipopolysaccharide) on the release of α-MSH (alpha melanocyte stimulating hormone) from the neurointermediate lobe (NIL) of the teleost Oreochromis mossambicus (tilapia). In vivo treatment of tilapia with IL-1 for 8 days led to a 49% inhibition of basal α-MSH release, measured by means of an in vitro micro-superfusion technique. The treatment did not affect the sensitivity of the tissue to TRH. In vitro, the release of α-MSH was inhibited by LPS in a dose dependent manner. In addition to its effects on the unstimulated release of the hormone, LPS also blunted the response to a TRH stimulation. Together with recent results obtained by others demonstrating the effects of (neuro-)peptides on immune parameters and the presence of cytokines in fish, the present data establish the bidirectional character of the communication between the immune and the (neuro-)endocrine systems in teleosts.

---

Résumé Cette étude décrit les effets de l'IL-1 (interleukin 1) et du LPS (bacterial endotoxin lipopolysaccharide) sur la libération de α-MSH (alpha melanocyte stimulating hormone) par le lobe neurointermédiaire (NIL) d'un téléosteen Oreochromis mossambicus (tilapia). Le traitement in vivo du tilapia avec l'IL-1 pendent 8 jours conduit à une inhibition de 49% de la libération basale d'α-MSH mesurée à l'aide d'une technique in vitro de micro-superfusion. Ce traitement ne modifie pas la sensibilité du tissue au TRH. In vitro, la libération de α-MSH est inhibée par le LPS de manière dose-dépendante. En plus de ses effets sur la libération basale de α-MSH, le LPS bloque aussi la réponse à une stimulation par le TRH. Confrontés à des donnés récemment publiés montrant les effets de (neuro-)peptides sur les paramêtres immunitaires et la présence de cytokines chez les poissons, nos résultats établissent le caractère bidirectionnel de la communication entre le système immunitaire et les systèmes (neuro-)endocriniens.

     

布鲁氏杆菌LPS抗原制备及其免疫原性测定

采用热酚水法提取布鲁氏杆菌脂多糖,分离、纯化并SDS-PAGE银染鉴定。纯化的细菌内毒素免疫小鼠,通过斑点ELISA测定血清抗体效价,检测细菌内毒素免疫原性。采用热酚法能获得较高纯度的细菌内毒素,其免疫原性较高,斑点ELISA测血清效价达到1∶1 000 000,与全菌免疫原性接近。本研究为制备布鲁氏杆菌单克隆抗体和建立布鲁氏杆菌病快速诊断方法奠定研究基础。     

Antigen-nonspecific macrophage factors modulating the antibody response in vitro

Antibody response to an antigen involves the co-operation between three types of cells: macrophages, T cells and B cells. The cognate interactions between these cells play a fundamental role in the expression of a specific antibody response, but the last is modulated by antigen-nonspecific soluble factors produced either by macrophages or by T cells. Macrophages elaborate a spectrum of molecules modulating the function of lymphoid cells; among them are IL1 and prostaglandins of the E series, which are respectively enhancer and inhibitor of the antibody response in vitro. These molecules alter T cell and B cell activities through different mechanisms involving activation or inhibition of IL2 production, or alteration of cells surface antigens. However, the cellular events following the fixation of soluble factor on its receptors are not known.     

中华鳖对嗜水气单胞菌粗脂多糖(LPS)的免疫应答

将采用温酚法从嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、柱状嗜纤维菌(Cytophaga columnaris)和叉尾鮰爱德华菌(Edwardsiella ictaluri)中提取的粗脂多糖(crude lipopolysaccharide,LPS)作为免疫原,注射接种中华鳖(Pelodiscus sinensis)后,通过测定受免鳖的交叉凝集抗体效价、肾脏和血液中吞噬细胞的吞噬活性和对A.hydrophila活菌细胞内杀菌活性,比较了3种致病菌的粗LPS对中华鳖的免疫原性。试验结果表明,从3种致病菌中提取的粗LPS对中华鳖均具有较强的免疫原性,受免鳖的血清中存在对3种致病菌的交叉凝集抗体,与对照鳖相比,肾脏和血液中吞噬细胞对吞噬原的吞噬活性和对A.hydrophila活菌杀菌活性明显上升。说明在3种供试菌的粗LPS上不同程度地存在3种致病菌的共同保护性抗原。     

成团泛菌低分子脂多糖的急性毒性、刺激性、致敏性及遗传毒性评估

本研究对成团泛菌低分子脂多糖（Pantoea agglomerans lipopolysaccharide,LPSp）的安全性进行初步评估。本研究采用一次限量法,用昆明种小鼠进行LPSp急性经口毒性试验,了解LPSp的急性毒性;采用新西兰兔分别进行LPSp急性和多次皮肤刺激性试验以及急性眼刺激性试验,了解LPSp的皮肤和粘膜刺激性;采用豚鼠进行LPSp皮肤变态反应试验,了解LPSp的致敏性;应用平板掺入法进行鼠伤寒沙门氏菌/回复突变试验和小鼠骨髓细胞微核试验考察LPSp的遗传危害。急性毒性试验结果显示,LPSp对小鼠经口一次灌胃的LD50大于5000mg/kg体重,属实际无毒级别;LPSp急性和多次皮肤刺激性试验以及急性眼刺激性试验结果显示,皮肤刺激和眼刺激积分均为0分,LPSp对皮肤无刺激性、对眼睛无急性刺激性;在皮肤变态反应试验中,LPSp在各观察时间点的皮肤变态反应积分均为0分,其致敏率均为0%,说明LPSp对豚鼠无致敏性;LPSp的鼠伤寒沙门氏菌/回复突变试验结果呈阴性（P〉0.05）;LPSp的小鼠骨髓细胞微核试验结果亦呈阴性,LPSp各剂量组的微核发生率与阴性对照组未见统计学差异（P〉0.05）,而与阳性对照组有明显差异（P〈0.01）。本研究结果表明,在本实验剂量范围内,LPSp对小鼠经口毒性极低,属实际无毒级别,对家兔皮肤和眼睛无明显刺激性,对豚鼠无致敏性,对所试菌株和小鼠体细胞无诱变性和致突变性。     

复合抗氧化剂对脂多糖诱导的大鼠肠道损伤的修复作用

本试验旨在通过脂多糖(LPS)诱导自由基建立大鼠肠道损伤模型,研究复合抗氧化剂对肠道损伤的修复作用.36只42日龄的SD大鼠随机分成3组,每组12只.对照组和诱导组饲喂基础饲粮,修复组在基础饲粮中添加复合抗氧化剂.诱导组和修复组大鼠在试验的第5、9、13和17天每千克体重腹腔注射0.8 mg LPS,对照组注射等量生理...     

山羊实验性内毒素血症时颈静脉、肝静脉及门静脉血TNF-α和IL-6的动态变化

在实验性内毒素血症诱导的全身性炎症及免疫反应中,肝脏发挥着十分重要的作用.为了进一步分析这种机能,选用8头1～2、15～22kg的去势公山羊,外科手术装置颈静脉瘘管、门静脉瘘管和肝静脉瘘管.手术4 d后,从颈静脉一次性灌注脂多糖(1ipopolysacchride,LPS,3μg/kg)生理盐水溶液,于灌注前、灌注后1～5、8 h采集各静脉血样,并测定体温和白细胞总数.分离血浆,采用放射免疫测定法检测其中TNF-α和IL-6水平的动态变化.结果表明,在LPS灌注后0.5 h直肠温度即有上升,并保持在较高水平达4 h,其后迅速下降.白细胞总数在灌注LPS后l h内迅速降低,在2～8 h内缓慢回升.灌注后l h颈静脉、肝静脉和门静脉血TNF-α水平迅速上升达到峰值,分别为0.76±0.052 ng/mL、0.82±0.050ng/mL、0.711±0.071 ng/mL,其中以肝静脉血中TNF-α的浓度变化最为显著.颈静脉血中的IL-6水平在灌注后1 h达到峰值,1～3 h则逐渐回落到基础水平并一直保持到实验结束;肝静脉和门静脉血IL-6水平在0～2 h范围内呈下降趋势,在4 h出现峰值,4 h后则呈下降趋势.颈静脉、肝静脉及门静脉血IL-6的峰值分别为70.325±4.094pg/mL、80.337±14.919pg/mL和74.433±25.187 pg/mL.推测肝脏及腹腔消化道等器官IL-6的分泌除受TNF-α和IL-1β的诱导外,还可能受其它因素的影响.     

白头翁汤及其主要成分对LPS诱导内皮细胞分泌NO、E-selectin和IL-8的影响

拟探讨白头翁汤及其主要成分对细菌内毒素(LPS)导致的机体炎症等病理损伤的治疗作用.培养内皮细胞至单层融合状态,加入内毒素刺激,3h后加入高、中、低3种浓度的8种药物,继续培养21 h后收集细胞上清液,用ELISA方法测定NO、E-selectin和IL-8的含量.结果显示,白头翁汤高剂量组、白头翁素高剂量组和小檗碱高剂量组的NO含量极显著低于LPS对照组(P＜0.01),白头翁汤中剂量组、白头翁素中剂量组、小檗碱中剂量组和秦皮乙素高剂量组显著低于LPS对照组(P＜0.05);白头翁汤高剂量组和药根碱高剂量组的E-selectin含量极显著低于LPS对照组(P＜0.01),白头翁皂苷B4高剂量组、小檗碱高剂量组和药根碱中剂量组显著低于LPS对照组(P＜0.05);秦皮乙素高剂量组的IL-8含量极显著低于LPS对照组(P＜0.01),白头翁汤高剂量组、秦皮甲素高剂量组和中剂量组、秦皮乙素中剂量组显著低于LPS对照组(P＜0.05).结果提示白头翁汤及其主要成分具有明显的抗细菌内毒素作用,可在由NO、E-selectin和IL-8介导的机体炎症等病理损伤过程中发挥治疗作用.     

天门冬多糖对猪脾淋巴细胞体外增殖的影响

试验旨在研究不同浓度的天门冬多糖(ASP),在ConA或LPS的协同刺激下对猪脾淋巴细胞体外增殖的影响。猪脾淋巴细胞体外培养体系中加入不同浓度的天门冬多糖使其终浓度为400、200、100、50、25、12.5μg/ml,在ConA(5μg/ml)或者LPS(10μg/ml)的协同刺激作用下,细胞培养24、48、72 h时,观察猪脾淋巴细胞增殖情况。结果表明,天门冬多糖及其协同ConA或LPS能显著或极显著的促进猪脾淋巴细胞体外增殖(P<0.05或P<0.01)。