小鼠睾丸支持细胞分离培养及生物学特性鉴定

为了揭示睾丸支持细胞在精子发生及睾丸免疫豁免中的生物学作用,采用胰蛋白酶、胶原酶分步消化法和1/3浓度的Hank′s低渗液、50mmol/L Tris-HC(l pH7.1)液分别低渗处理及油红O脂质染色法对16～22d的幼鼠睾丸进行分离、纯化和生物学特性鉴定。结果表明:分离、纯化后的睾丸支持细胞损伤少、活率高、睾丸支持细胞占培养细胞总数的90%以上;根据形态学观察及油红O脂质染色法鉴定,睾丸支持细胞的生长状态良好,细胞突起很多,核仁清晰,胞质中可见大小不等的红色空泡状脂质小滴。     

Extraction and purification of the polysaccharides in Hippohaere rhamnoides L.

The different extraction technology and purification technology of Hippohpae rhamoides polysaccharides were researched in the paper.The best method of papain extraction were obtained,the ratio of papain 2%,pH at 5.5,temperature at 45℃and extraction time of 20 min were suitable for papain extraction.The highest content of Hippohpae rhamoides polysaccharides was 44.28 mg·g~(-1). The optimum process of ultrasonic extraction were obtained,namely extracted for 55 min at 480 W with the material ratio of 1:20. The highest content of Hippohpae rhamoides polysaccharides was 48.63 mg·g~(-1).The results showed that the ultrasonic and papain extraction together was the best method,the content was 54.30 mg·g~(-1).After the removing protein,pigment and dialysis.Two fraction were separated from the purified Hippohpae rhamoides by DEAE-cellulose chromatography,the main fraction was collected finally. The fraction was identified by Sepharose CL-4B gel filtration.Ultraviolet spectrometry,freeze-thawing analysis showed that fraction was purified.Its molecular weight was probably 109.4 ku.     

金丝桃素的提取纯化工艺研究

用乙醇从贯叶连翘中提取金丝桃素并对其进行纯化,考察了金丝桃素的工艺流程.用乙醚作为除杂剂,用乙醇热浸贯叶连翘,后浓缩浸提液为浸膏;用热水溶解浸膏,乙酸乙酯萃取,浓缩萃取液为浸膏(粗提物).然后再用乙醇溶解,利用树脂柱层析分离纯化金丝桃素,减压浓缩洗脫液,干燥,即得金丝桃素产品.经HPLC测定,结果表明:该产品中金丝桃素的含量高达1.2% ;该工艺不但有效改善了金丝桃素产品易吸湿、易发粘的缺点,而且具有操作简单,经济易行的特点.     

牛羊胆汁中甘氨胆酸提取纯化工艺研究

采用盐析、萃取、柱层析等生物化学方法,从牛、羊胆汁中提取出了有效成分甘氨胆酸,并采用薄层层析法及薄层扫描法进行定量、定性检测,测得甘氨胆酸的纯度可达98%以上,牛羊胆汁甘氨胆酸的回收率分别为64%和62%。     

鸡T淋巴细胞和B淋巴细胞分离纯化方法的建立

将鸡胸腺和腔上囊淋巴组织剪碎后与PBS磷酸盐缓冲液混合，通过密度梯度离心和尼龙棉柱过滤对T、B淋巴细胞进行了分离纯化。纯化的T、B淋巴细胞以FITC标记的鼠抗鸡CD4单抗，RPE标记的鼠抗鸡CD8单抗，FITC标记的鼠抗鸡Bu-1单抗染色，用流式细胞仪分类检测其纯度，用台盼蓝排斥试验检测T、B淋巴细胞的活力。结果表明，以本研究建立的方法分离到的T、B淋巴细胞纯度较高（均达90％以上），细胞活力强，与流式细胞仪分选的效果相当，且经济简便。     

凝胶过滤层析纯化辣木絮凝剂研究

试验用已知分子量的乳酸菌肽和溶菌酶为标准品,将其混合物通过Sephadex-G50葡聚糖凝胶柱,获得标准品的洗脱时间及洗脱体积,在同等条件下将辣木絮凝剂粗提物上柱,根据标准品获得的洗脱时间与分子量的关系,收集分子量为3kDa～13kDa的组分。经过纯化后的辣木絮凝剂可把污浊度为82.00NTU的澜沧江水降到3.66NTU,去除率达95.54%,较辣木絮凝剂粗提物的去除率提高23.48%。     

沸石净化养殖水体的研究进展

沸石由于比表面积大、吸附性能高、离子交换性良好，还可做为理想的生物载体，已在环保和饲料工业领域中得到了广泛的应用。本文从沸石的结构和功能展开，综述了其在养殖水体净化中去氨增氧、减少赤潮发生、治理富营养化水体以及培养生物沸石处理养殖废水等的应用。并进一步展望了沸石分子筛吸附微生物组合来改善养殖水体底泥的可能性，沸石的活化、改性和复合工艺更将拓展沸石净化养殖水体能力。     

分离纯化低聚异麦芽糖的酵母菌菌株筛选

利用酵母菌对不同碳源消耗能力和消耗速度不同的原理，对酵母菌进行筛选试验，选出一株只利用葡萄糖，麦芽糖而不利用异麦芽糖，潘糖，异麦芽三糖等分枝低聚糖的优良酵母菌10号，并对该菌的特性进行了研究。利用10号菌种发酵低纯度的低聚异麦芽糖溶液，可使其纯度达到95%以上。     

斜卧青霉菌P6木素过氧化物酶的纯化与特性

木素过氧化物酶是降解木素类物质的主要酶类。使用硫酸铵盐析、DEAE 纤维素和CM 纤维素离子交换层析、SephadexG 10 0凝胶过滤等分离与纯化技术 ,从斜卧青霉菌P6 (PenicilliumdocumbensP6 )发酵培养 7d的液体培养液中分离纯化得到电泳纯的木素过氧化物酶 ,经SDS PAGE鉴定为单一条带 ,表观相对分子质量为 4 6 3× 10 3 。以藜芦醇为底物测定了该酶的Km,vmax,作用的 pH和温度范围 ,结果为Km0 5 6 5mmol·L-1,vmax0 0 88mmol·(L·min) -1,pH 4～ 9,温度 2 5～ 5 5℃。N末端序列为VLLPADEKNA ,与真菌LiP无同源性。此结果拓宽了木素过氧化物酶的微生物来源     

凋亡素原核表达及纯化

为进一步研究凋亡素结构与功能和制备凋亡素单克隆抗体,本试验构建了凋亡素的原核表达载体pET-28a-VP3,并将该质粒转化到大肠杆菌E.coli BL21中,以IPTG对其进行诱导表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳分析蛋白.结果证明在E.coli BL21中正确表达了凋亡素,同时对表达蛋白进行纯化,SDS-PAGE显示在1.4 kD处出现目的蛋白带与预期相符.