山羊传染性胸膜肺炎荧光定量PCR检测方法的初步建立

为实现山羊传染性胸膜肺炎(CCPP)快速检测,研究基于病原体山羊支原体山羊肺炎亚种的16S rRNA基因,设计合成特异性引物及探针,采用5'FAM-TAMRA3'标记物进行标记.结果显示,试验建立的CCPP-16S实时荧光定量PCR方法可特异性检测CCPP,产生特异性荧光信号,对相关其他病菌无法检出荧光信号;以CCPP...     

TaqMan荧光定量RT-PCR检测猪脂蛋白酯酶mRNA方法的建立

【目的】克隆猪cDNA,作为猪LPL mRNA定量检测的标准品,建立检测方法。【方法】用RT-PCR,从猪背最长肌的总RNA中逆转录扩增LPL的cDNA,将纯化的LPL cDNA与pGM-T载体进行连接,转化宿主菌TOP10,提取重组质粒DNA,PCR鉴定并测序分析,对质粒标准进行实时荧光定量PCR 检测。纯化质粒并检测260 nm吸光度,确定原液的重组质粒拷贝浓度并以此制备荧光定量PCR梯度浓度标准品。【结果】建立了猪LPL mRNA实时定量PCR检测方法,特异性好,检测灵敏度达103拷贝,线性范围为1×103 ～1×1010拷贝,阈值与PCR体系中起始模板量的对数值之间有着良好的线性关系（R2＝0.9871）。【结论】成功克隆了LPL实时荧光PCR定量标准,且TaqMan荧光定量RT-PCR的方法可对猪背最长肌LPL mRNA的表达进行准确定量。     

Bimembrane diffusion probe for continuous recording of dissolved and entrapped bubble gas concentrations in peat

Peatlands are significant sources of the important greenhouse gas CH₄ and generally known as sinks for atmospheric CO₂ through peat accumulation. Accurate measurements of the subsurface concentrations of these gases are of pivotal importance for experimental studies improving our understanding of the dynamics and controls on the exchanges of these gases between peat soils and the atmosphere. In this paper we first briefly outline examples of different probe-based techniques for the determination of subsurface gas concentrations and thereafter we document the development and testing of two different membrane probe systems. Finally we discuss a few applications of the probes and show some results obtained by testing them in the laboratory.     

鸡的DNA指纹条带数目与屠宰性能的相关性研究

利用肉鸡ＳＲ９２Ａ系（♂）与萧山鸡（♀）的杂交一代群体,以ＥＡＶ（禽内源性反转录病毒片段）为探针,限制性内切酶为ＥｃｏＲⅠ,探讨ＤＮＡ指纹条带数目与若干屠宰性能之间的相关性。结果发现,条带总数与各性状均呈负相关,即条带总数越多,性状值越低,但只有与胸肌重的相关系数达到显著水平（Ｐ＝０．０２３４＜０．０５）。携带１０个条带的个体胸肌重比携带１６个条带的个体平均值高出７８．２２％。研究结果初步表明,ＥＡＶ产生的ＤＮＡ指纹条带总数可作为改良或预测鸡屠宰性能的遗传标记。     

乔木茎体水分传感器探针结构实验

基于驻波率测量原理的乔木茎体水分传感器,其测量装置由信号源、同轴传输线及双针平行不锈钢探针组成.乔木茎体的介电特性决定了同轴传输线两端电压差值(即传感器的输出电压)的大小,通过测量传感器的输出电压,可达到测量乔木茎体体积含水率的目的.通过两个实验来确定传感器的探针结构:模拟实验中研究了在不同有机试剂中探针长度对传感器输出电压的影响,实验中选取了不同的有机试剂来模拟不同体积含水率的乔木茎体.根据模拟实验数据,得出了传感器输出电压与探针长度的单调变化关系,选取了传感器的探针结构参数;对侧柏乔木茎体样本进行了干燥实验,得出传感器的输出电压与样本的体积含水率之间有较好的线性关系.     

应用PCR技术合成生物素化蓝舌病病毒核酸探针的研究

用禽类成髓细胞病毒（AMV）反转录酶将蓝舌病病毒RNA反转录成cDNA,以dATP、dGTP、dCTP、dTTP和bio-11-dUTP作为TaqDNA聚合酶的底物,应用PCR技术合成了生物素化蓝舌病病毒核酸探针,经斑点杂交试验证明,合成的探针为蓝舌病病毒特异性核酸探针。     

光生物素标记DNA探针检测牛巴贝斯虫研究初报

光生物素标记重组质粒DNA(c51A)探针检测牛巴贝斯虫研究的初步试验结果表明,能特异地检出感染牛血中的巴贝斯虫,灵敏度为10pg质粒DNA,相当于约150个感染红细胞的虫体DNA。     

T-TDR传感器热电偶结点位置优化试验

为提高T-TDR（Thermal-time domain reflectance）土壤水分传感器的测量准确度,优化传感器的结构参数,对比研究了热电偶结点嵌入位置和大小对T-TDR传感器热特性敏感度和测量精度的影响规律。设计热电偶结点分别在探针中点和中点下移2mm处的位置,通过点焊方式减小热电偶结点体积,制作出3种类型的T-TDR传感器及其测定系统。分别在砂土、砂质壤土、粘壤土的5种不同含水率条件下对3种传感器进行热特性试验,测定其热特性曲线并计算含水率,利用干燥法进行精度检验。结果表明,热电偶在中点位置下移2mm及采用点焊方式小结点的传感器对中间探针的辐射热量较其他两类传感器敏感,灵敏度也较高,含水量测定结果与干燥法测量值有较好的相关性（R 2 为0.981,RMSE为0.0152）,测量精度比传统结构参数的传感器有所提高。     

利用非线性模型提高加长型热脉冲双探针土壤热参数测定精度

热脉冲双探针技术被广泛应用于土壤热参数和含水率的测定。然而长度为2.8 cm的常规热脉冲双探针空间测试范围太小,加长探针可增加测定结果的代表性,但容易出现探针倾斜(探针间距改变),进而影响测量精度。设计制作了长度为10 cm的热脉冲双探针,通过室内土柱试验测定了四种倾斜方式(共面外倾、非共面外倾、共面内倾以及非共面内倾)下的土壤热参数和含水率,并利用线性和非线性修正模型对探针倾斜引起的测定误差进行了校正。结果表明:对于加长型双探针,非线性模型对探针间距的原位校正效果明显优于线性模型;非线性模型校正后的土壤容积热容和含水率准确度大幅提高。有效解决了加长型热脉冲双探针倾斜引起的测量误差,为探针的广泛应用提供了理论基础。     

晚稻免耕抛秧关键技术初探

为解决双季晚稻季节紧张的矛盾,寻找一条既能赶上季节,又能节本增效的水稻栽培新技术,以常耕抛秧为对照（CK）,进行免耕抛秧不同晒蔸时间、沤田时间对比试验及不同基蘖肥与穗粒肥简比试验。试验结果表明：经过适当缩短晒田和沤田时间以后,提早抛秧5d的单产比对照提高15.6%,早抛3d产量比对照提高13.5%。同一水稻品种在相同的...