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11.
棉花黄萎病菌毒素结合位点初探 总被引:6,自引:1,他引:5
以纯化的棉花黄萎病菌毒素(PLPC)免疫新西兰白兔制备了PLPC特异性抗血清。将PLPC(15μg·ml 1)用不同浓度的抗体(1~20μg·ml 1IgG)吸附后处理泗棉3号的切根苗,毒素所引起的症状都有不同程度的减轻。表明所制备的抗体在与毒素发生特异性免疫学反应的同时,可部分封闭毒素分子上与毒素受体结合的位点。利用竞争ELISA测定了泗棉3号幼苗子叶的质膜制剂与PLPC的结合活性。结果表明,质膜制剂与毒素结合后能部分阻断毒素与其抗体的免疫学反应,即质膜制剂中含有毒素的结合位点。分别用胰蛋白酶和煮沸处理质膜制剂后,质膜制剂对毒素与其抗体的反应的抑制作用消失,初步表明质膜制剂中与毒素结合的是蛋白质。 相似文献
12.
13.
以CP23重组蛋白为抗原建立检测微小隐孢子虫抗体间接ELISA方法的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
摘要:以在E.coli高效表达的微小隐孢子虫子孢子表面抗原CP23为抗原,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗鼠IgG为二抗,建立了检测微小隐孢子虫抗体的间接ELISA方法。经检测筛选出最佳反应条件为1μg/孔纯化的E.coli表达的CP23抗原包被酶标板,用10%免血清进行封闭,以正常E.coli裂解上清液稀释待检血清。实验表明应用CP23重组蛋白作为诊断C.parvum抗原具有特异性高、抗原易纯化和成本低等特点。 相似文献
14.
利用IBV重组N蛋白建立ELISA抗体检测试剂盒的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
利用表达鸡传染性支气管炎病毒Gray株N蛋白的基因工程重组菌,表达IBV—N蛋白,并利用表达载体上带有组氨酸标记的特点,应用金属螯合填料将其纯化。用纯化的IBV—N蛋白作为包被抗原,成功地建立了一种检测血清中IBV抗体的间接ELISA方法。确定抗原最佳包被浓度为0.58μg/ml;被检血清的最佳稀释度为1:100;酶标二抗的工作浓度为1:1000。确定了血清样品阴、阳性临界0D值为0.14。与IDEXX公司IBV抗体检测试剂盒比较,结果表明自建ELISA试剂盒具有较高的敏感性和特异性。 相似文献
15.
鸡白血病病毒抗原ELISA试剂盒的研制和应用 总被引:5,自引:2,他引:3
以双抗体夹心酶联免疫吸附试验(DAS-ELISA)为基本原理,成功地研制出鸡白血病病毒抗原ELISA试剂盒,该试剂盒与国外同类试剂盒相比,具备相同的特异性和敏感性,对RAV-1纯化样品的最小检出量可达0.78ug/ml,且敏感性高于直接补体结合试验。经初步应用发现,我国商品种鸡群ALV阳性率为0.7-14%,在部分SPF鸡群中未检出阳性鸡。 相似文献
16.
单抗酶联试剂盒与PCR方法快速检测沙门氏菌的比较 总被引:18,自引:1,他引:17
本文对单抗酶联试剂盒与PCR方法快速检测沙门氏菌进行了比较。将沙门氏菌与大肠杆菌以不同比例混合后 ,分别用ELISA和PCR法检测 ,在 1∶1 0 0的比例时 ,用这 2种方法均能检测出阳性样品 ;在 1∶1 0 0 0的比例时 ,用ELISA法检测为阴性 ,而用PCR法则能检测出。检测鲜牛奶、龙虾、虾仁、熟食制品等样品 ,2种方法的符合率达 97 6 %。对冻虾仁、人粪便样品的前增菌、选择性增菌、后增菌过程进行同步检测 ,在样品的前增菌液 ,直接ELISA法检测的OD值小于 0 5 ,而PCR法扩增能出现特异条带 ,经国标方法验证为阳性 ,证实PCR法的敏感性优于直接ELISA法 ,而在选择性增菌液和M 肉汤后增菌液中 ,2种方法均能检出阳性样品。 相似文献
17.
用犊牛睾丸细胞培养传染性牛鼻气管炎病毒(IBRV),反复冻融,差速离心提取病毒,用Triton X-100溶解,超声波处理,制成IBRV TritonX-100亚单位抗原,经SDS-PAGE电泳,其分子量在176kD-53kD之间,其中有6条清晰的蛋白带。该抗原与一定比例的白油-司盘佐剂乳化,接种育成年,经间接ELISA检测,可使接种的育成牛产生高效价的血清抗体(OD492mm=1.57)。2种不同剂量(80mg/头,40mg/头)的IBRV亚单位疫苗接种育成牛,体内抗体效价相差不显著,抗体可在体内持续12周,用IBRV TrionX-100亚单位疫苗2次接种育成牛,其体内抗体效价显著高于用灭活疫苗2次接种育成牛体内的效价。试验结果表明:提取的IBRV多肽制作的亚单位疫苗具有良好的免疫原性,且抗体持续时间较长。 相似文献
18.
本文应用间接法Dot-ELISA进行鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗原的检测,其最低检出量为0.43μg/ml。对人工感染/自然病例的各组织脏器进行检测,结果法氏囊的IBDV检出率为100%,脾脏的检出率为80%/84.9%,其它器官组织如肾、胸腺、心、肝、肺、盲肠扁桃体、胸肌等均含有一定量的病毒(11~60%)。经统计学分析,法氏囊与脾脏的病毒检出率之间具有显著性差异(人工感染差异极显著P<0.01,自然病例差异显著P<0.05),进一步证实法氏囊是IBDV最主要的靶器官。试验结果表明,该法检测IBDV抗原,敏感性高、特异性强、重复性好,并且经济、方便、快速,适于大批量样品检测,可作为一种诊断IBD的比较理想的方法。 相似文献
19.
0.05MpH9.6碳酸盐缓冲液和0.05MPH13NaOH溶液作为包被液,分别用于间接ELISA检测乙型五号病病毒抗体。结果表明,用0.05MPH13NaOH溶泡包被可完全灭活五号病病毒抗原而用0.05MPH9.6碳酸盐缓冲液却有87%的五号病病毒抗原未被杀灭;用于检测时,以0.05MPH13NaOH溶液为包被液在敏感性及检测结果的梯度方面都优于用0.05MPH9.6碳酸盐缓冲液。 相似文献
20.
K. Tagata S. Yokoyama T. Ginbo M. Honda T. Okimura M. Odakura M. Nomura S. Yamamoto 《Veterinary research communications》1996,20(1):21-30
A capillary reversed passive latex agglutination test (capillary RPLA) was developed which allows quantification of serum C-reactive protein (CRP) within approximately 15 min. The logarithmic regression line (calibration curve) obtained after measuring each CRP concentration three times in twofold dilutions of a standard canine serum containing 222 g/ml of CRP was y=6.394+0.030x (r=0.995). Capillary RPLA permitted quantification of CRP in the range 6.9–222 g/ml. The coefficients of variation ranged from 10.28% to 12.40%. The recovery rates (percentage recovery) of CRP by capillary RPLA were within the range 87% to 106%. On measuring the CRP concentrations in sera from 78 dogs by capillary RPLA, single radial immunodiffusion (SRID) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), close correlations were demonstrated between SRID and capillary RPLA (y=7.250+1.109x, r=0.978), between SRID and ELISA (y=3.042+1.059x, r=0.967), and between capillary RPLA and ELISA (y=1.778+0.929x, r=0.962). Capillary RPLA may be considered useful as a routine biochemical technique for measurement of serum CRP concentration in the dog.Abbreviations CRP
C-reactive protein
- ELISA
enzyme-linked immunosorbent assay
- RPLA
reversed passive latex agglutination test
- SRID
single radial immunodiffusion 相似文献