三丁基锡（TBT）对罗非鱼精巢细胞凋亡的影响

以雄性奥利亚罗非鱼为试验材料,研究了三丁基锡(TBT)对鱼类精巢细胞凋亡的影响。通过腹腔注射染毒TBT(剂量分别为0、1、3、5、10μg·kg-1体重),取染毒后的精巢,一部分用于制备石蜡切片,原位末端标记法(TUNTEL法)进行细胞凋亡分析,另一部分用于研究TBT对精巢细胞Ca2 -ATP酶活性的影响。结果表明,染毒后24和48h,随着染毒剂量的升高,罗非鱼精巢细胞凋亡率先增高后降低,在5μg·kg-1体重时达最高;染毒后96h,相应细胞凋亡率先降低后升高,在5μg·kg-1体重时最低。与之相对应的精巢细胞Ca2 -ATP酶活性,低剂量组(1～3μg·kg-1)与对照组相比,差异不显著;高剂量组与对照组相比,差异显著或极显著;在试验剂量范围内,Ca2 -ATP酶活性随着注射剂量的升高而升高。     

A型肉毒毒素单克隆抗体的制备及初步鉴定

制备了A型肉毒毒素(BoNT/A)单克隆抗体(mAb),并对其免疫学特性进行了初步鉴定.用BoNT/A重组抗原(BoNT/A Hc)免疫Balb/c小鼠后,取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系Sp2/0融合,经3次亚克隆建立了3个稳定分泌抗BoNT/A抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2A8、4F7和2F2,3株抗体均属IgG1亚型,效价为10-4～10-5,3株单抗抗相同抗原表位,交叉反应结果表明,3株单抗与BoNT/A的类似物均无交叉反应,具有较高的特异性.     

粉纹夜蛾（Trichoplusia ni）卵巢细胞系克隆株Tn5B1—4特性的研究

通过用限稀释法由粉纹夜蛾Ｔｎ５Ｂ１细胞系中分离出多个细胞株，经筛选获得一个理想的克隆株Ｔｎ５Ｂ１－４，该克隆株的特性不同于原细胞系Ｔｎ５Ｂ１。该克隆株的细胞形态一致，细胞群体倍增时间较原细胞株短，而且细胞活力强，特别是在维持粉纹夜蛾单粒包埋核型多角体病毒的复制能力方面高于原细胞系，另外经生物测定看出，在该克隆株中增殖的病毒毒力与虫体内增殖的病毒无显著差异。     

小麦禾谷镰刀菌毒素抗性系的筛选及抗性特性

以稳定生长的小麦（抗盐０３×Ｎｏ１８）Ｆ１花药愈伤组织为材料，小麦强致病禾谷镰刀菌的粗毒素为选择剂，进行抗毒素变异细胞系的离体筛选。结果从多步正筛选系统和一步正筛选系统分别获得抗性变异细胞系ＫＮｒ－ａ和ＫＮｒ－ｂ．抗性系的毒素抗性具有显著提高，且其细胞膜透性、硝酸还原酶活性、苯丙氨酸解氨酶活性、游离氨基酸组成均发生了明显变化。据此提出了细胞水平上禾谷镰刀菌毒素作用的机理及抗性变异细胞系对毒素表现出一定抗性的可能原因     

日本沼虾雄性生殖系统的研究——雄性生殖系统的结构及发育

日本沼虾的雄性生殖系统由精巢、输精管、端壶腹和雄性生殖孔组成。精巢外被一层结缔组织膜，内为许多生精小管，小管壁包括生精上皮和管壁上皮，生精上皮不断向管腔内增殖，形成不同发育阶段的雄性生殖细胞，输精管分为前输精管(细段)、中输精管(螺旋段)和后输精管(直段)，其管壁均由高柱状上皮和矮柱状上皮构成，具有分泌功能；端壶腹壁肌肉层厚，其它结构与输精管壁相仿。精巢的发育季节性明显。     

滨州畜牧兽医研究院新获两项省级科研基金资助

近日,省科技厅自然基金项目立项公布,滨州畜牧兽医研究院高三阳博士申报的《蜂胶在小鼠B一淋巴细胞IgM表达中的活化调节机制研究》（项目编号：2011ZRAl6002）项目成功立项,并获得省自然科学基金资助。同时,该院王文秀博士申报的《永生化鸭胚成纤维细胞系的建立及DHV增殖特性研究》（项目编号：2011BSAl6009）项目获省优秀青年科学家科研奖励基金（博士基金）资助。     

岷县黑裘皮羊肾组织成纤维细胞系的建立及其生物学特性研究

采集岷县黑裘皮羊肾组织,用胰蛋白酶热消化法制备原代细胞,通过差速消化和差速贴壁法进行继代培养和细胞纯化,并对复苏细胞的形态、活力、生长曲线、荧光蛋白质粒转染表达、核型以及乳酸脱氢酶同工酶等生物学特性进行了分析。结果显示:原代和传代细胞生长形态均好,群体倍增时间为28.3 h;染色体2 n=54,二倍体占主体(84%)乳酸脱氢酶同工酶电泳图谱有明显特征,未见LDH4、LDH5谱带,与其它羊有明显区别;外源性荧光蛋白转染质粒在该细胞中能进行复制和表达;细菌、真菌、病毒、支原体检测呈阴性。表明该研究已成功建立岷县黑裘皮羊肾组织成纤维细胞系,为在细胞水平上保存岷县黑裘皮羊种质资源以及进行相关研究提供了理想的生物材料。     

稳定表达乙型脑炎病毒NS1蛋白细胞系的建立

为建立稳定表达乙型脑炎病毒(JEV) NS1蛋白的真核细胞系,本研究将编码JEV NS1蛋白的人工合成基因克隆到真核表达载体pCAGG-TK-neo中,构建了重组质粒pCAGG-opti-NS1.重组质粒经脂质体转染RK-13细胞,以含G418的选择性培养基选择培养,经细胞克隆纯化,以间接免疫荧光试验(IEA)筛选表达目的基因的细胞.结果表明,转染的RK-13细胞经G418加压及IFA筛选后,获得表达JEV NS1蛋白的阳性RK-13细胞系.经RT-PCR、western blot和IFA鉴定,该细胞系在传代至第15代后仍然可以稳定表达NS1蛋白.本实验获得了能够稳定表达JEV NS1蛋白的细胞系,为进一步开展JEV相关的研究奠定了基础.     

南方型紫花苜蓿耐盐细胞系的筛选及生理特性分析

以NaCl为选择因子,对长期继代培养的紫花苜蓿愈伤组织进行选择,筛选出耐1.2%NaCl的耐盐细胞系并对其进行生理分析,结果表明:耐盐细胞系对逆境的忍受能力高于对照,积累的脯氨酸和可溶性蛋白含量也高于对照,维持着较高的K+/Na+比,在盐分胁迫下能维持较高的超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性。     

抗Bt Cry1Ac毒素粉纹夜蛾离体细胞与敏感细胞的差异蛋白定量分析

苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)产生的毒素对许多昆虫具有特异性高效毒杀作用[1-2],但是随着Bt杀虫毒素的广泛使用,昆虫对Bt的抗性风险越来越高.这种抗性机制非常复杂[3],而蛋白质组学技术可较全面揭示昆虫细胞抗Bt毒素的分子机制.作者等[4]通过人工选择获得了高水平抗Bt Cry1Ac毒素的粉纹夜蛾细胞系,在此基础上本试验采用双向凝胶电泳技术对BtCry1Ac毒素敏感粉纹夜蛾细胞和抗性选择细胞的差异蛋白质进行了定量分析.