向日葵锈菌弹性金属蛋白酶基因克隆及生物信息学分析

为了研究向日葵锈病的致病机制,将向日葵锈菌转录组中表达量较高的一个基因(KU994904)中成熟部分进行生物信息学分析及基因克隆。利用Interpro对蛋白ORF区域进行分析,确定其成熟区域,通过生物信息学相关软件对其进行结构预测及预测分析,从向日葵锈菌中提取总RNA,并利用RT-PCR方法扩增此蛋白酶成熟基因并克隆。结果显示:该蛋白酶成熟基因序列全长1 335 bp,编码445个氨基酸,分子质量49.5 ku,其与M36家族中5条序列具有较高相似性,并发现同胞外金属蛋白酶基因序列相似度达到53.77%。因此,推断其为弹性金属蛋白酶。     

科技

建明中国召开新产品发布会——八宝威蛋白酶重装上阵 2014年4月18日，建明中国在辽宁沈阳发布了最新的酶制剂研究成果——八宝威TM蛋白酶，力图解决蛋白原料成本上涨带来的难题。     

16种微生物蛋白酶的生物信息学分析

蛋白酶(protease)是以降解蛋白质为主的糖苷酶,具有丰富的多样性,在生物有机体中发挥着重要而又广泛的作用,具有广泛的研究和应用价值。本研究采用ProtParam、ProtScale、SignalP 4.1 server和NPSA serve等生物信息学软件,对天蓝色链霉菌、普通拟杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌等16种微生物蛋白酶的理化性质、蛋白结构、系统发生树和功能域等进行了分析。结果表明:通过分析16种微生物蛋白酶的稳定性发现,金黄色葡萄球菌、唾液链球菌、短小芽孢杆菌、绿脓杆菌为不稳定蛋白;二级结构由α螺旋、β转角、无规则卷曲和延伸链等结构元件组成;除了节杆菌属、无乳链霉菌、普通拟杆菌、肠杆菌属具有信号肽,其余蛋白酶氨基酸序列不具有信号肽的特点。可以推测出蛋白酶为非分泌性蛋白;只有绿脓杆菌和猪链球菌有跨膜结构,剩下其余几种微生物均没有跨膜结构。具有2个蛋白功能域,分别为Peptidase S8 familyi、Fn3_5like domain。     

单环刺螠(Urechis unicinctus)幼体肠道消化酶活性的测定方法

探究了单环刺螠(Urechis unicinctus)幼体(平均体重(1.468±0.222)g)肠道蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶的测定方法、操作步骤、注意事项。蛋白酶测定采用Folin-酚法,其中建立的酪氨酸回归方程为y=15.487x-0.092 3(决定系数R~2=0.999 2);淀粉酶测定采用淀粉-碘比色法,以0.08%的淀粉溶液为底物。脂肪酶测定采用聚乙烯醇橄榄油乳化液水解法(NaOH滴定法)。结果表明,单环刺螠幼体肠道蛋白酶活力、淀粉酶、脂肪酶活力分别为29.350±2.592、10.600±0.844、(5.266±0.224)U/mg prot。     

“瑞利源金属蛋白酶”在番茄上的应用试验

为验证瑞利源金属蛋白酶对番茄生长发育及其产量的影响效果,明确金属蛋白酶的适用剂量,一三三团在番茄上进行了金属蛋白酶的大区对比试验,为今后推广应用提供科学依据。1材料及方法1.1供试材料瑞利源金属蛋白酶,由新疆瑞利源农业科技发     

持续被动运动通过抑制软骨细胞NO合成下调MMP-1和MMP-13表达

目的：观察持续被动运动（CPM）和补充一氧化氮（NO）供体——硝酸甘油（NG）对兔骨关节炎（OA）模型中软骨基质金属蛋白酶-1（MMP-1）和MMP-13表达以及NO含量的影响，探讨CPM下调MMPs的可能机制。方法：30只3~4月龄雄性新西兰大白兔，其中6只进行假手术作为正常对照组（NC组），另外24只建立膝关节OA模型，术后随机分为4组，即OA对照组（OA组）、OA硝酸甘油给药组（NG组）、OA持续被动运动组（CPM组）、OA持续被动运动+硝酸甘油给药组（CPM+NG组），每组各6只。NC组和OA组不作处理，NG组给予NG软膏膝关节局部涂抹，CMP组在CPM训练仪上进行膝关节持续被动运动，CMP+NG组即在运动干预的同时给予NG局部涂抹。4周后取各组软骨组织，硝酸还原酶法测定NO含量，HE染色观察软骨形态学变化并进行Mankin''s评分，实时荧光定量PCR（RQ-PCR）检测MMP-1和MMP-13 mRNA水平，免疫组织化学法测定MMP-1和MMP-13蛋白表达量。结果：NO含量、Mankin''s评分以及MMP-1和MMP-13 mRNA和蛋白水平在OA组明显高于NC组（P<0.01），NG组高于OA组（P<0.01），CPM组低于OA组和NG组（P<0.01），CPM+NG组低于NG组（P<0.01），但高于CPM组（P<0.01）。结论：CPM通过抑制软骨细胞NO合成下调MMP-1和MMP-13表达，进而对软骨细胞起保护作用。     

外源核苷酸在动物饲养中的作用

1胃肠道功能 促进消化器官功能的发挥。体外试验发现，添加核苷酸后小肠上皮细胞中碱性磷酸酶、蔗糖酶活性上升；体内试验发现，日粮中添加核苷酸与核苷混合物将对肠内碱性磷酸酶、亮氨酰基肽酶、麦芽糖酶、蔗糖酶和乳糖酶的含量和活性产生影响，小肠黏膜中总蛋白酶活力提高，且对十二指肠及空肠近端的酶活性影响较大。     

酶制剂的功能与动物营养学

<正>饲料酶制剂研究发展很快,但是目前饲料酶制剂开发仍然存在许多问题,酶制剂在畜禽日粮中的应用还有不少的争议,而且这些问题和争议将会很长时间存在,目前不少的饲料酶制剂产品并不达到作为饲料添加剂的要求,产品设计的盲目性还比较普遍。     

不同单酶制剂混合检测对比研究

试验以木聚糖酶、纤维素酶、淀粉酶和酸性蛋白酶为对象,首先研究了酸性蛋白酶分别和其他3种单酶进行混合后酶活测定值变化情况,结果表明,酸性蛋白酶对其他3种单酶的检测结果没有影响;试验第二部分研究了4种单酶整体混合在一起后各单酶测定值的变化情况,结果表明,木聚糖酶测定值出现很大偏高,其他3种单酶测定结果未出现显著偏差;进行进一步论证试验表明,淀粉酶可能是使木聚糖酶测定结果偏高的原因。